张成全
- 作品数：12 被引量：41H指数：4
- 供职机构：扬州大学兽医学院江苏省人兽共患病学重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 鸡IL-2、IL-18、IFN-γcDNA和CpG DNA在减毒沙门氏菌运送H5亚型禽流感核酸疫苗中的佐剂作用
- 将携带DNA疫苗的重组沙门氏菌SL7207(pVAX1-HA-IL2)、SL7207(pVAX1-HA-IL18)、SL7207(pVAX1-HA-IFN-γ)、SL7207(pVAX1-HA-CpG)、SL7207(p...
- 胡青海张成全潘志明焦新安刘秀梵
- 文献传递
- 鸡CD3分子单克隆抗体及其免疫生物学特性
- 研制抗鸡CD3分子特异性单克隆抗体(mAb)。用重组真核表达质粒pcDNA3.1-CD3免疫6周龄BALB/c小鼠,应用淋巴细胞杂交瘤技术,制备抗鸡CD3分子mAb。共获得7株特异性分泌抗鸡CD3分子的mAb,分别命名为...
- 张小燕白海焦新安潘志明胡青海胡茂志孙林李玉君董慧单艳菊张成全
- 关键词：单克隆抗体
- 文献传递
- 鸡IL-2、IL-18、IFN-γ cDNA和CpG DNA在减毒沙门菌运送H5亚型禽流感DNA疫苗中的佐剂作用被引量：4
- 2007年
- 目的探讨鸡IL-2、IL-18、IFN-γcDNA和CpG DNA在减毒沙门菌运送H5亚型禽流感DNA疫苗中的佐剂作用。方法将携带禽流感病毒(AIV)DNA疫苗的重组沙门菌SL7207(pVAX1-HA- IL2)、SL7207(pVAX1-HA-IL18)、SL7207(pVAX1-HA-IFN-γ)、SL7207(pVAX1-HA-CpG)、SL7207(pVAX1-HA)和SL7207(pVAX1)经口服和滴鼻途径首免1日龄商品代伊莎褐蛋鸡,测定免疫鸡的体液和黏膜免疫应答水平,并进行攻毒保护试验。结果二免后3周,SL7207(pVAX1-HA-CpG)、SL7207(pVAX1-HA- IFN-γ)免疫组以及SL7207(pVAX1-HA)和SL7207(pVAX1-IFN-γ)联合免疫组鸡产生了较高水平的特异性黏膜免疫应答(P<0.05),但重组菌免疫鸡血清中抗AIV HI抗体水平与空载体组相比差异无统计学意义。SL7207(pVAX1-HA-CpG)、SL7207(pVAX1-HA-IFN-γ)的免疫保护指数显著高于阴性对照组。结论初步观察佐剂效应依次为:CpG>IFN-γ>IL-18,IL-2未表现出佐剂效应。
- 胡青海潘志明张成全焦新安刘秀梵
- 关键词：减毒沙门菌H5亚型禽流感DNA疫苗
- 破伤风毒素C片段单克隆抗体的研制被引量：2
- 2009年
- 目的:研制抗破伤风毒素C片段(TetC)的单克隆抗体(mAb)。方法:以纯化蛋白His-TetC免疫6周龄雌性BALB/c小鼠,末次加强免疫后取其脾细胞与骨髓瘤细胞Sp2/0-Ag-14融合,应用间接ELISA筛选阳性克隆。Westernblot鉴定mAb的特异性,并用mAb亚类试剂盒鉴定mAb亚类。结果:共获得5株稳定分泌抗TetC的杂交瘤细胞株,分别命名为1E5、5G10、6B9、7D6、7F5,其腹水效价除1E5为3×210外,其余均为1×105,亚类鉴定结果均为IgG1。West-ernblot分析结果显示,5株mAb均与融合蛋白His-TetC发生特异性反应。结论:成功制备了抗TetC的mAb,为进一步研究TetC的生物学功能、破伤风毒素结构与功能的关系以及建立快速检测破伤风抗毒素水平的方法奠定了基础。
- 单艳菊潘志明程宁宁张成全孙林焦新安
- 关键词：单克隆抗体
- 鸡IL-2、IL-18、IFN-γcDNA和CpG DNA在减毒沙门氏菌运送H5亚型禽流感核酸疫苗中的佐剂作用
- 目的:探讨鸡IL-2、IL-18、IFN-γcDNA和CpG DNA在减毒沙门氏菌运送H5亚型禽流感核酸疫苗中的佐剂作用。方法:将携带禽流感病毒(AIV)DNA疫苗的重组沙门氏菌SL7207(pVAX1-HA-IL2)、...
- 胡青海潘志明张成全焦新安刘秀梵
- 关键词：减毒沙门氏菌H5亚型禽流感核酸疫苗
- 文献传递
- 破伤风毒素C片段单克隆抗体的研制
- 目的:研制抗破伤风毒素C片段(TetC)的单克隆抗体(mAb)。方法:以纯化蛋白His-TetC免疫6周龄雌性BALB/c小鼠。末次加强免疫后取其脾细胞与骨髓瘤细胞Sp2/0-Ag-14融合,应用间接ELISA筛选阳性克...
- 单艳菊潘志明张成全孙林焦新安
- 关键词：单克隆抗体
- 文献传递
- 鸡CD3分子单克隆抗体及其免疫生物学特性
- 研制抗鸡 CD3分子特异性单克隆抗体(mAb)。用重组真核表达质粒 pcD- NA3．1-CD3免疫6周龄 BALB/c 小鼠,应用淋巴细胞杂交瘤技术,制备抗鸡 CD3分子 mAb。共获得7株特异性分泌抗鸡 CD3分子的...
- 张小燕潘志明胡青海胡茂志孙林李玉君董慧单艳菊张成全白海焦新安
- 关键词：单克隆抗体
- 文献传递
- 结核分枝杆菌CFP-10单克隆抗体的研制与初步鉴定被引量：5
- 2009年
- 目的:制备抗结核分枝杆菌CFP-10蛋白的单克隆抗体(mAb)。方法:应用淋巴细胞杂交瘤技术,以重组菌BL21(DE3)-pET-30a(+)-lhp原核表达的融合蛋白His-CFP-10作为抗原免疫BALB/c小鼠,以纯化的融合蛋白GST-CFP-10作为检测抗原,制备抗结核分枝杆菌CFP-10mAb;采用间接ELISA、Dot-ELISA和Western blot鉴定mAb的特异性。结果:获得2株稳定分泌抗结核分枝杆菌CFP-10mAb的杂交瘤细胞株6E8、2E7,其Ig亚类分别为IgG1、IgG2b。mAb6E8、2E7腹水的ELISA效价分别为1∶1000000,1∶1024000。在Dot-ELISA试验中,这2株mAb均只与表达His-CFP-10及GST-CFP-10的重组大肠杆菌反应,与其他5种菌株均不发生反应。在Westernblot试验中,2株mAb只与CFP-10蛋白发生反应,出现特异性条带。结果表明,mAb6E8、2E7是针对结核分枝杆菌CFP-10的特异性mAb。结论:成功地制备抗结核分枝杆菌CFP-10的mAb,它们在结核分枝杆菌诊断和致病机理研究等方面有重要应用价值。
- 申峻松张辉张成全潘志明殷月兰焦新安
- 关键词：结核分枝杆菌CFP-10单克隆抗体
- 重组牛白细胞介素4的原核表达及其单克隆抗体研制被引量：7
- 2011年
- 目的:原核表达重组牛白细胞介素4(rBoIL-4)并制备针对抗rBoIL-4的单克隆抗体(mAb)。方法:通过PCR从重组质粒pSP73-BoIL-4中扩增BoIFN-γ基因,分别克隆入表达载体pGEX-6p-1和pET-30a(+)中,构建重组菌并对其进行诱导表达、纯化和鉴定。以纯化的融合蛋白rHis-BoIL-4为免疫原,用纯化的rGST-BoIL-4为筛选抗原,应用淋巴细胞杂交瘤技术,研制抗rBoIL-4的mAb。结果:获得表达BoIL-4基因的重组菌BL21(pGEX-6p-1-BoIL-4)和BL21(DE3)(pET-BoIL-4),重组蛋白相对分子质量(Mr)的大小分别为39 000和19 000,且以包涵体的形式存在。获得7株可稳定分泌抗rBoIL-4 mAb的细胞株,命名为2B8、4A10、5D6、5D8、7G10、8B7和10F8,这些mAb腹水的效价依次为5 000、160 000、10 000、640 000、5 000、40 000和40 000,mAb亚类均为IgG1。Dot-ELISA的结果表明,7株mAb只与融合蛋白rHis-BoIL-4和rGST-BoIL-4起反应,而不与其他重组细胞因子和对照细菌起反应,显示出良好的特异性。Western blot试验显示,7株mAb均能与相应的融合蛋白发生反应,出现特异性条带。同时7株mAb均能与BoIL-4的标准品起反应。结论:7株抗rBoIL-4的mAb均具有高度的特异性,为进一步研究其在牛的免疫调控、牛疫病的致病机制及其诊断中的应用奠定了基础。
- 陈祥张成全徐正中孟闯黄金林潘志明焦新安
- 关键词：原核表达单克隆抗体
- 重组牛γ-干扰素单克隆抗体的研制被引量：14
- 2009年
- 为制备针对重组牛γ-干扰素(rBoIFN-γ)的单克隆抗体(mAb),以纯化的原核表达融合蛋白rHis-BoIFN-γ为免疫原,用纯化的rGST-BoIFN-γ为筛选抗原,应用淋巴细胞杂交瘤技术,研制抗rBoIFN-γ的mAb。结果获得13株稳定分泌抗BoIFN-γmAb的细胞株,命名为1C12、1F7、1G5、3E6、4D5、5E11、5G4、6F8、6G6、7E9、8D3、8F8和9G11。腹水的效价除单抗9G11外,其余效价都在1∶80 000以上;除5G4mAb亚类为IgG2b外,其余均为IgG1。Dot-ELISA结果表明,所得单抗只与融合蛋白rHis-BoIFN-γ和rGST-BoIFN-γ反应,而不与其它重组细胞因子和对照细菌反应,显示其良好的特异性。Western blot显示所获单抗能与相应的融合蛋白发生反应,出现特异性条带。同时所获单抗均能与牛IFN-γ标准品反应。13株单抗均为针对rBoIFN-γ的特异性mAb,为进一步研究rBoIFN-γmAb在牛的免疫调控、牛疫病的致病机制及其诊断中的应用奠定基础。
- 张成全陈祥牛中伟杨卫冲徐正中孟闯潘志明黄金林焦新安
- 关键词：原核表达单克隆抗体
