宋建辉
- 作品数：15 被引量：204H指数：5
- 供职机构：中南大学湘雅医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 黄芩甙诱导大鼠骨髓基质细胞向神经细胞分化的研究被引量：59
- 2002年
- 目的 探讨中药单体黄芩甙体外诱导大鼠骨髓基质细胞分化为神经细胞的可行性。方法 以黄芩甙作为主要诱导剂 ,诱导成年大鼠骨髓基质细胞 6d。采用免疫细胞化学染色、蛋白质印迹 (WesternBlot)、逆转录PCR(RT PCR)法检测神经细胞、胶质细胞标记蛋白和mRNA的表达 ;原位末端标记染色评价细胞凋亡率 ;绿色荧光蛋白转染后 ,进行同种异体脑移植 ,观察诱导后细胞在脑内存活情况。结果 黄芩甙诱导 6d后 ,骨髓基质细胞形成较典型的神经细胞形态。诱导前骨髓基质细胞不表达神经细胞、胶质细胞标记蛋白和mRNA ;诱导 6h ,nestin出现暂时表达 ,诱导 6d表达神经细胞标记蛋白和mRNA ,不表达胶质细胞标记蛋白和mRNA。细胞凋亡率为 12 2 %± 2 8%。同种异体脑移植 14d ,移植物存活良好。结论 黄芩甙可以定向诱导骨髓基质细胞分化为神经细胞。
- 贾延劼杨于嘉周燕宋元宗刘丽旭宋建辉王霞钟乐余小河
- 关键词：黄芩甙骨髓细胞细胞分化神经细胞诱导剂
- 1026例儿童肺炎支原体感染及耐药情况分析被引量：74
- 2013年
- 目的了解儿童呼吸道感染患者肺炎支原体感染及耐药情况,为临床诊断和治疗提供有力依据。方法对2010年9月到2011年9月于我院儿科门诊就诊和儿科病房住院的3529例呼吸道感染患儿进行咽拭子肺炎支原体培养,并检测对阿奇霉素、罗红霉素、红霉素、乙酰螺旋霉素、克拉霉素的药物敏感性。结果在3529例患儿中,肺炎支原体培养阳性者1026例,总阳性率为29.07%。季节分布方面,一年四季均有不同程度肺炎支原体感染病例,夏秋季节感染率高于冬春季,季节间阳性率差异有统计学意义(P<0.05)。性别方面,女性阳性率(30.43%)高于男性(28.32%),但差异无统计学意义。随患儿年龄增大,阳性率逐渐下降,且各年龄组间阳性率差异有统计学意义(P<0.05)。药敏试验结果显示,适宜儿童使用的大环内酯类抗生素耐药性由高到低依次为罗红霉素、红霉素、乙酰螺旋霉素、克拉霉素和阿奇霉素。肺炎支原体培养阳性菌株对5种抗生素的耐药情况差异有统计学意义(P<0.01)。结论呼吸道感染患儿中肺炎支原体感染率较高,学龄期儿童发病率较低,易发季节为夏秋季。对呼吸道感染的患儿应尽早进行肺炎支原体咽拭子培养及药敏检测,使患儿得到及时正确的治疗,减少耐药株出现。
- 阳爱梅宋建辉黄榕金世杰杨萍
- 关键词：肺炎支原体药敏试验儿童
- 546例PCR检测临床意义分析被引量：1
- 1995年
- 分析用多聚酶链反应（ＰＣＲ）方法检测的５４６例次结果的临床意义。其中儿科病例约占三分之二。结果：①结核杆菌１９１例，４１．４％阳性；②巨细胞病毒１８８例，３５．６％阳性；③弓形体６５例，１５．４％阳性；④乙肝病毒４８例，３９．５％阳性；⑤ＥＢ病毒２９例，３４．５％阳性；⑥单纯疱疹病毒Ⅰ型７例，未发现阳性；⑦肺炎支原体４例，未发现阳性；⑧β地贫反向点杂交４例，５０％阳性；⑨单纯疱疹病毒Ⅱ型１例，未发现阳性；⑩淋球菌１例，未发现阳性。结核ＰＣＲ阳性与临床符合率为８０．６％；巨细胞病毒在脑损伤患者阳性率为５６．４％，明显高于非脑损伤患者（２０．４％）；差异有非常显著意义（Ｐ＜０．０１）；弓形体在脑损伤患者阳性率为１７．１％，明显高于非脑损伤患者（３０例中未检出）；乙肝ＨＢｓＡｇ阳性的１１例患者中有１０例ＰＣＲ阳性，两者符合率高达９０．９％；２例β地贫患儿其中１例为双重杂合子（ＣＤ１７，Ａ→Ｔ；ＩＶＳ６５４，Ｃ→Ｔ），另１例为杂合子（ＩＶＳ６５４，Ｃ→Ｔ）。
- 杨于嘉杜娟宋建辉陶永光
- 关键词：弓形体巨细胞病毒杂合子符合率PCR检测
- 体外诱导大鼠骨髓间质干细胞分化为胰岛样细胞的研究被引量：5
- 2006年
- 目的探索大鼠骨髓间质干细胞(MSCs)体外诱导分化为胰岛素分泌细胞的方法,为解决胰岛移植物来源匮乏问题提供新的思路。方法采用横向分化技术,将成年大鼠MSCs诱导成胰岛素分泌细胞;间接免疫荧光法鉴定诱导前后的细胞巢蛋白、胰岛素、胰高血糖素、生长抑素的表达;RTPCR法检测诱导前后的细胞胰岛素1、Pdx1、Pax6mRNA的表达;24h累积分泌量测定和胰岛素刺激实验评价诱导前后细胞的功能。结果诱导5h,巢蛋白阳性细胞为(44.6±7.3)%,诱导24h增至(61.8±8.4)%。此后,巢蛋白阳性细胞数开始下降,诱导第14天后,巢蛋白表达基本消失。而且,诱导后细胞可表达胰岛素、胰高血糖素、生长抑素等蛋白;表达胰岛素1及其多种转录因子基因mRNA;胰岛素刺激实验反应敏感,而诱导前MSCs不具备上述特点。结论体外大鼠MSCs可诱导成为胰岛素分泌细胞,为胰岛移植开辟新的研究思路。
- 孙吉平贾延劼宋建辉罗芳杨于嘉
- 关键词：胰岛分化
- 胰腺十二指肠同源框基因PDX-1的体外扩增被引量：3
- 2005年
- 目的提取大鼠胰岛细胞瘤细胞株的RNA,以其中的mRNA为模板,扩增胰腺十二指肠同源框-1(PancreaticDuodenalHomeobox-1)编码基因,并测定核苷酸序列,为进一步克隆及表达PDX-1cDNA奠定基础。方法采用TIZOL方法进行RNA提取;通过RT-PCR方法扩增大鼠PDX-1cRNA;琼脂糖凝胶电泳检测后进行序列测定。结果从大鼠胰岛细胞瘤细胞中提取了RNA,以其中的mRNA为模板扩增出大鼠PDX-1基因,经琼脂糖凝胶电泳鉴定为目的片断,经序列测定与Genebank公布的序列一致。结论在国内首次成功的克隆了PDX-1基因。扩增时在5'端以限制性酶切位点进行限制,对进一步进行其克隆、表达研究以及对其生物学功能进行研究奠定了基础。
- 孙吉平贾延劼宋建辉杨于嘉
- 关键词：PDX-1CDNA胰岛细胞瘤
- 胰腺十二指肠同源框-1基因促进大鼠骨髓间充质干细胞分化为胰岛样细胞被引量：4
- 2006年
- 虽然骨髓间充质干细胞(BMSCs,bonemarrowmesenchymalstemcells)具有极强的自我更新能力及多向分化潜能,但最近发现其体外分化为胰腺内分泌细胞的效率并不高,不能产生足够用于移植的胰岛样细胞.胰腺十二指肠同源框-1基因(Pdx-1,pancreaticduodenalhomeobox-1)在胰腺胚胎发育和胰岛素基因表达调控方面均具有重要作用,因此构建含有Pdx-1的真核表达载体,并使用新型纳米介质Superfect介导重组载体转染BMSCs,研究Pdx-1表达在BMSCs体外分化为胰岛样细胞中的作用.结果表明,转染重组载体后(Pdx-1+BMSCs)分化为胰岛素阳性细胞比例为(28.23±2.56)%,较转染空白载体和未转染组(Pdx-1?BMSCs)明显增多(分别为(7.08±2.69)%和(4.59±3.02)%);细胞免疫化学染色显示诱导后细胞表达胰岛素、胰高血糖素和生长抑素蛋白,而且Pdx-1+BMSCs诱导后表达明显增加,与Westernblotting和RT-PCR结果相似;葡萄糖诱导的胰岛素分泌量测定显示Pdx-1+BMSCs对不同浓度葡萄糖有不同的胰岛素分泌,25和5.5mmol/L葡萄糖刺激后胰岛素分泌量分别为(115.29±2.56)和(56.61±4.82)μU/mL,明显高于Pdx-1?BMSCs分泌量(分别为(53.26±7.56)和(25.53±6.49)μU/mL).Pdx-1+BMSCs分化的细胞同种异体移植后可以恢复糖尿病模型大鼠的血糖水平,移植物平均存活时间(30.5±15.7)天.本试验提示大鼠BMSCs体外能分化为胰岛样细胞;Pdx-1能显著增强上述分化能力;BMSCs体外分化的胰岛样细胞移植能改善STZ糖尿病大鼠的生存状态.这将为糖尿病的治疗提供一条新的途径.
- 孙吉平杨于嘉王晓莉宋建辉贾延劼
- 关键词：骨髓间充质干细胞胰岛PDX-1
- 310例TB－PCR检测临床意义与结果分析
- 1996年
- ３１０例ＴＢ－ＰＣＲ检测临床意义与结果分析湖南医科大学附属湘雅医院儿科基因诊断中心（４１０００８）宋建辉，陶永光，杜娟随着分子生物学研究发展，基因诊断技术得到了越来越广泛的应用，特别是ＰＣＲ技术，以快速、高灵敏度及准确的检测特点，已成为基因研究领域的...
- 宋建辉陶永光杜娟
- 关键词：聚合酶链反应TB-PCR
- 脂质体介导外源性基因在骨髓基质细胞表达被引量：1
- 2005年
- 目的:用阳离子脂质体介导真核表达载体pEGFP PDX 1转染大鼠骨髓基质细胞,并对其转染条件进行优化以获得较高效率。方法:构建的重组载体鉴定后,以脂质体介导其转染骨髓基质细胞,改变DNA,脂质体的量,在荧光显微镜下观察荧光并计算转染效率;转染后48h进行细胞免疫组化染色检测目的基因的表达情况。结果:限制性酶切分析证实重组后的载体成功载入PDX 1基因;克隆的目的片断经序列测定与GenBank公布的序列一致;质粒∶脂质体为1∶1或1∶2的转染效率最佳;细胞免疫化学染色检测证实转染后骨髓基质细胞有PDX 1基因表达。结论:成功构建了含有PDX 1基因的真核表达载体;通过优化转染条件提高了pEGFP PDX 1转染大鼠骨髓基质细胞的效率,为成为组织工程的种子细胞提供了实验依据。
- 孙吉平贾延劼罗芳宋建辉杨于嘉
- 关键词：外源性基因细胞表达大鼠骨髓基质细胞阳离子脂质体介导显微镜下观察细胞免疫化学
- 新生大鼠神经干细胞的分离培养被引量：17
- 2002年
- 目的 探讨新生大鼠神经干细胞的分离培养方法及其外源报告基因在神经干细胞中的表达情况。方法 采用无血清细胞培养技术，间接免疫细胞化学染色法及其绿色荧光蛋白转导技术。结果 从新生大鼠脑组织分离的细胞具有连续克隆能力，表达神经上皮干细胞蛋白，诱导分化后的细胞表达成熟神经细胞和星形胶质细胞特异性的蛋白。绿色荧光蛋白报告基因转导神经干细胞后能够有效表达。结论 该方法分离培养的神经干细胞保持了干细胞的未分化属性，具有自我更新、增殖能力和多分化潜能，而且外源报告基因在神经干细胞中能够有效表达。
- 贾延劼杨于嘉宋建辉刘丽旭刘杰波郑湘榕
- 关键词：神经干细胞新生大鼠神经系统疾病基因治疗
- 巨细胞病毒感染与婴幼儿脑损伤的关系被引量：3
- 1996年
- 巨细胞病毒感染与婴幼儿脑损伤的关系湖南医科大学湘雅医院儿科（４１０００８）黄榕，杨于嘉，宋建辉，陶永光本研究用ＣＭＶ－ＤＮＡＰＣＲ的方法检测巨细胞病毒（ＣＭＶ）感染，并结合头部ＣＴ检查，以了解婴幼儿损伤与ＣＭＶ之间的关系，为小儿脑损伤的病因学研究提供...
- 黄榕杨于嘉宋建辉陶永光
- 关键词：脑损伤婴幼儿巨细胞病毒
