孔繁荣
- 作品数：55 被引量：236H指数：8
- 供职机构：北京大学第一医院更多>>
- 发文基金：深圳市宝安区科技计划项目国家自然科学基金卫生部临床学科重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学动力工程及工程热物理更多>>
- 用滚环扩增技术检测污染细胞的5种支原体被引量：6
- 2010年
- 目的 建立滚环扩增技术检测5种常见的细胞污染支原体（猪鼻支原体、发酵支原体、口腔支原体、精氨酸支原体、莱氏无胆甾原体）的方法.方法 使用细胞污染支原体16S-23SrRNA间隔区公共引物（SPS1,SPA2）扩增间隔区靶基因.设计每一种支原体特异性锁式探针,锁式探针与扩增的靶基因杂交结合形成环化单链分子,加入特异性引物在Corbett RotorGeneTM 6000扩增仪滚动扩增环化单链分子,观察结果.结果 滚环扩增技术能敏感和特异的检测上述5种支原体标准株,并能敏感的检测10个拷贝的靶基因.在62个细胞培养物样本的检测中,37个样本检测出一种支原体,14个样本检测出两种支原体,11个样本为支原体阴性.滚环扩增方法检测结果与支原体种特异性PCR检测结果一致.结论 滚环扩增作为一种新的扩增技术能敏感和特异的检测细胞污染支原体.
- 王辉周小勇孔繁荣王玮蓁段逸群
- 关键词：滚环扩增锁式探针
- 反向线点杂交同时检测和鉴定十种常见的细胞污染和致病支原体
- 目的使用反向线点杂交方法检测、鉴定常见细胞污染支原体(猪鼻支原体、发酵支原体、口腔支原体、精氨酸支原体、莱氏无胆甾原体)和临床致病支原体(生殖道支原体、人型支原体、微小脲原体、解脲脲原体和肺炎支原体)。方法设计这十种支原...
- 王辉王玮蓁孔繁荣段逸群琳.吉尔伯特
- 关键词：生殖道支原体发酵支原体反向线点杂交
- 文献传递
- 不同DNA提取方法对PCR检测解脲支原体的影响被引量：1
- 2002年
- 目的 : 比较PK、NK和PCI三种不同DNA提取方法对解脲支原体PCR的影响。方法 : 从临床得到的 330份怀孕妇女的尿标本 ,接种到液体培养基和A8琼脂平板 ,液体培养阳性的标本 1 10稀释后 ,用PK、NK和PCI三种不同DNA提取方法进行提取 ,分别作PCR及抑制实验 ,比较三种提取方法的敏感性和特异性。结果 : 液体培养和A8琼脂平板培养的阳性率分别为 6 8.1%和 39%,两者符合率为 76 %,PK、NK和PCI的敏感性为 5 2 .5 %,5 5 %,87.5 %;特异性为 6 5 .8%,76 .3%,6 0 .5 %;抑制率为 33.3%,33.0 %,3.3%。结论 : 在PK、NK和PCI三种不同DNA提取方法中 ,以PCI敏感性最高 ,抑制率最低。
- 王辉郑义孔繁荣王玮蓁段逸群
- 关键词：解脲支原体PCR
- PCR反向线点杂交技术快速检测B族溶血性链球菌9个耐药和耐药相关基因
- 曾宪玉王辉王玮蓁段逸群孔繁荣
- B族溶血性链球菌（Streptococcus agalactiae/ group B streptococcus, GBS）是新生儿和产妇感染最常见的病原体，也是免疫力低下患者的一个机会性感染菌。GBS通常对青霉素敏感，...
- 关键词：
- 关键词：耐药PCR相关基因反向线点杂交耐药基因
- 解脲脲原体的分群和分型研究被引量：6
- 1996年
- 目的建立解脲脲原体的分子生物学分群及分型方法。方法采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法对１４个血清型的解脲脲原体标准株进行检测和分群，并对２７２例泌尿生殖道临床标本进行了检测和分群。采用随机扩增多态性脱氧核糖核酸方法对解脲脲原体１、３、６、１４、８、１０及１１型标准株进行了分析和比较。结果经ＰＣＲ检测，第一群解脲脲原体的扩增片段长度为４０３ｂｐ，第二群解脲脲原体的扩增片段长度为４４８ｂｐ；２７２例泌尿生殖道临床标本，解脲脲原体阳性７２例，其中第一群阳性６９例，第二群阳性３例。构建了１、３、６、１４、８、１０及１１型解脲脲原体的基因指纹图谱。结论本研究建立了用ＰＣＲ对解脲脲原体进行分群的方法；泌尿生殖道临床标本解脲脲原体阳性者以第一群常见，随机扩增多态性脱氧核糖核酸方法可用于解脲脲原体分型。
- 孔繁荣朱学骏周骏马张耕耘陈受宜任桂珍曹玉璞
- 关键词：枝原体解脲脲原体分群PCR
- 滚环扩增技术检测耐氟康唑白念珠菌TAC1点突变被引量：2
- 2010年
- 目的 利用滚环扩增技术检测耐氟康唑白念珠菌的TAC1点突变,建立一种准确、快速、特异的检测核酸单点突变的方法,同时进一步了解TAC1点突变与耐药的关系.方法 收集33株耐氟康唑白念珠菌（8株来自美国,25株来自澳大利亚）,根据文献报道的与耐药有关的点突变和挂锁探针设计原则设计4个挂锁探针.提取DNA、PCR扩增获得TAC1的三个目的 片段;然后用滚环扩增技术检测耐药株的点突变.将滚环扩增所得结果与测序结果进行比较.结果 33株耐氟康唑白念珠菌中,有5株TAC1出现与耐药相关的点突变,分别为T225A（1株）和A736V（4株）,其中4株菌来自美国.4株氟康唑敏感白念珠菌中TAC1未见与耐药相关的点突变.结论 滚环扩增技术能准确、快速检测核酸单点突变;TAC1点突变与耐药的关系有待进一步研究.
- 王惠平孔繁荣王斌刘全忠
- 关键词：氟康唑点突变
- 高毒力艰难梭菌的基因型和毒力相关基因检测被引量：2
- 2015年
- 目的鉴定莫西沙星耐药的艰难梭菌临床菌株的基因型和毒素相关基因的携带情况。方法 22株莫西沙星耐药的艰难梭菌临床菌株收集自澳大利亚悉尼地区,利用基于荧光毛细管电泳的聚合酶链反应(PCR)-核糖体分型技术对其进行基因分型;利用PCR方法检测其毒素A、B编码基因tcdA、tcdB和二元毒素编码基因cdtA、cdtB;利用PCR-基因测序方法检测毒素调节基因tcdC的基因序列,通过与参考菌株VPI 10463(Genbank收录号:X92982)比对了解其基因突变情况,通过与Genbank中的序列比对确定其序列型。结果 21株菌株为高毒力核糖体型027(RT027),另1株为RT078;22株菌株毒力编码基因均为tcdA+tcdB+cdtA+cdtB+;21株RT027 tcdC序列型为sc1,另1株RT078序列型为WA39,与参考株VPI 10463比较,RT027菌株tcdC序列均出现连续18个核苷酸(nt330-347)的缺失和第117位单核苷酸的缺失,RT078菌株则出现连续39个核苷酸(nt341-379)的缺失和第184位(C>T)的突变。结论高毒力RT027是最常见的莫西沙星耐药的艰难梭菌基因型;高毒力RT027和RT078均携带毒素A、B和二元毒素编码基因,且毒素调节基因tcdC均存在基因突变。
- 肖克林金萍黄丽清梁霞周天祥王中兴王秦宁孔繁荣
- 关键词：艰难梭菌
- 应用聚合酶链反应对淋球菌、沙眼衣原体和解脲支原体感染现状的调查被引量：35
- 1995年
- 采用聚合酶链反应对北京、汕头、武汉三地区ＳＴＤ门诊共３５５例患者，进行了淋球菌、沙眼衣原体和解脲支原体的检测。在三地区ＳＴＤ门诊患者中，淋球菌检出率均居首位，男性患者检出率高于女性患者；沙眼衣原体和解脲支原体的检出率及在ＳＴＤ门诊患者中的构成比，三地区间存在较大区别。聚合酶链反应适用于三种病原体的临床检测和流行病学调查。
- 孔繁荣朱学骏王雪虹王秀丽张耕耘周骏马陈受宜
- 关键词：聚合酶链反应淋球菌沙眼衣原体解脲支原体
- 阿奇霉素与环丙沙星治疗急性淋病及淋病合并衣原体感染的疗效观察被引量：11
- 1997年
- 阿奇霉素与环丙沙星治疗急性淋病及淋病合并衣原体感染的疗效观察李宁①孔繁荣①涂平①朱学骏①近年来，急性淋病的发病率日渐增高，成为我国发病率最高的性传播疾病。约３０％的淋病患者合并泌尿系统的沙眼衣原体感染，因此寻找一种能同时杀灭此两种性病病原体的药物是很...
- 李宁孔繁荣涂平朱学骏
- 关键词：淋病衣原体感染泌尿系统
- 泌尿生殖道人型支原体和生殖支原体的检测被引量：22
- 1996年
- 应用聚合酶链反应对一定数量的泌尿生殖道临床标本进行了人型支原体和生殖支原体的检测。卖淫妇女、ＳＴＤ门诊患者、妇科门诊患者、产科门诊孕妇中，人型支原体的检出率分别为４３．２％、１１．０％、２０．０％、８．０％；生殖支原体仅卖淫妇女和ＳＴＤ患者检出，检出率分别为１０．２％、４．０％。结果表明，人型支原体在不同人群泌尿生殖道标本中均有一定检出率，而生殖支原体主要在性乱人群中检出；人型支原体在人群中的检出率高于生殖支原体的检出率。
- 孔繁荣朱学骏周骏马张耕耘陈受宜任桂珍曹玉璞
- 关键词：聚合酶链反应人型支原体生殖支原体
