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淋巴细胞内钙调素mRNA的表达水平: 目的:检测静息淋巴细胞、活化的淋巴细胞和人白血病 K562 细胞 CaM mRNA 的表达水平及 CaM 拮抗剂 TFP 对它的影响,探索钙调素与细胞增殖及肿瘤发生发展的关系。方法:从全血分离的淋巴细胞以5×10/ml ...; 司峻岭李晓军武建国; 关键词：钙调素 MRNA 细胞增殖肿瘤 RT-PCR; 文献传递

重组人钙调素的制备及其对细胞增殖作用影响的研究: 2001年; 用PCR方法获得人钙调素基因Ⅲ(hCaMⅢcDNA),将其插入表达载体pBV220,构建重组表达质粒hCaMⅢ/pBV220,阳性重组子在大肠杆菌DH5α中经温度诱导可高效表达CaM蛋白,经15%SDS-PAGE分析,可观察到一分子量与理论值相符(约17kD)的诱导表达条带。进一步分析表达产物的性质表明,CaM主要以可溶性形式表达。Western blot结果证实,17kD的表达条带可与标难鼠抗CaM McAb起特异反应。用Phenyl-Sepharose CL-4B疏水亲和层析法纯化重组菌超声上清表达产物,可获得纯度达95%以上的CaM,每1L菌液可获CaM纯品3～4mg。生物活性测定结果提示,rhCaM具有与标准人脑CaM(Sitama)同样的激活NAD激酶的活性。将K562细胞及SP2/0细胞分别接种于24孔或96孔培养板,加入不同浓度rhCaM、CaM拮抗剂三氟拉嗪(TFP),培养48h后,用MTT比色法检测细胞增殖状况。rhCaM在一定浓度范围内与细胞增殖率成显著正相关;CaM拮抗剂TFP可抑制细胞增殖。将rhCaM加入已受TFP抑制的细胞,可恢复正常的细胞增殖功能。; 李晓军武建国司峻岭郭大文徐建平; 关键词：钙调素基因重组细胞增殖

抗钙调素抗体对细胞增殖抑制作用的研究被引量：4: 2000年; 为探讨兔抗钙调素抗体 (RACaM)对细胞增殖作用的影响 ,将K5 6 2细胞接种于 96孔培养板 ,加入不同浓度兔抗钙调素抗体 (RACaM)、正常兔γ球蛋白 (NR γ)或重组人钙调素 (recombinanthumancalmodulin ,rhCaM)培养 48h后 ,用MTT比色法检测细胞增殖状况。结果表明 ,兔抗CaM抗体可抑制细胞增殖 ,NR γ则无此抑制效应 ,rhCaM可改善兔抗CaM抗体对细胞增殖的抑制作用。; 司峻岭李晓军武建国; 关键词：钙调素细胞增殖自身免疫性疾病

重组人钙调素对细胞增殖作用的研究被引量：2: 2000年; 目的 :探讨外源性重组人钙调素 (recom binant human calmodulin,rh Ca M)对细胞的增殖作用。　方法 :将SP2 /0细胞接种于 2 4孔或 96孔培养板 ,加入不同浓度 rh Ca M、Ca M拮抗剂三氟拉嗪 (TFP)或兔抗 Ca Mγ球蛋白(RACa M)培养 48h后 ,用显微计数法和 MTT比色法检测细胞增殖状况。　结果 :外源性 rh Ca M在一定浓度范围内 (0 .1～ 7.5 μg/ml)与细胞增殖率呈显著正相关 ;Ca M拮抗剂 TFP或兔抗 Ca Mγ球蛋白可抑制细胞增殖。将rh Ca M加入已受 TFP或 RACa M抑制的细胞 ,可恢复正常的细胞增殖功能。　结论 :外源性重组人钙调素可促进细胞增殖。; 司峻岭李晓军武建国; 关键词：钙调素细胞增殖 TFP

钙调素及其抗体与细胞增殖的关系: 钙调素(calmodulin,CaM)是普遍存在于真核细胞内的Ca<'2+>受体蛋白,是细胞信号传导系统的重要成分.作为一种多功能的酶调节物,CaM与生物体的许多生命现象有关,影响细胞生长和细胞增殖.了解CaM与细胞增...; 司峻岭; 关键词：钙调素细胞增殖 RT-PCR TFP K562细胞 MTT比色法; 文献传递

淋巴细胞与K562细胞内钙调素mRNA表达的研究被引量：3: 2001年; 目的　探索钙调素与细胞增殖及肿瘤发生发展的关系。方法　从全血分离的淋巴细胞以 5× 10 5/ml接种于含10 %小牛血清的RPMI16 40中 ,加入PHA 2 0mg/L使其活化 ,以不加PHA者为对照 ;K5 6 2细胞以 2× 10 5/ml接种 ,加入CaM拮抗剂TFP 2 0 μmol/L ,以不加TFP组为对照。上述细胞于 37℃、5 %CO2 培养箱中培养 ,离心收集细胞 ,提取总RNA ,以管家基因 β 肌动蛋白 (β actin)为内参照 ,用RT PCR方法检测细胞内CaMmRNA的表达水平。结果　PHA活化的淋巴细胞和K5 6 2细胞CaMmRNA的表达水平分别为1 184± 0 0 2 3和 2 740± 0 132 ,均显著高于静息淋巴细胞(0 5 75± 0 15 3) (P <0 0 1) ,与TFP共育不影响K5 6 2细胞CaMmRNA的表达水平。结论　胞内CaM与细胞增殖有关。; 司峻岭李晓军武建国; 关键词：钙调蛋白 MRNA 细胞分裂淋巴细胞肿瘤细胞

细胞外钙调素与细胞增殖的调控被引量：2: 1999年; ０引言钙调素（ｃａｌｍｏｄｕｌｉｎ，ＣａＭ）作为一种耐热的脑环核苷酸磷酸二酯酶的激活剂，于１９７０年分别被Ｃｈｅｕｎｇ（张槐耀）和Ｋａｃｈｉｕｃｈｉ发现。１９７３年Ｔｅｏ和Ｗａｎｇ阐述了激活机制。随后Ｂｒｏｓｔｒｏｍ等发现该蛋白激活脑腺苷酸环化酶，Ｌ...; 司峻岭李晓军武建国; 关键词：钙调素细胞增殖细胞分裂细胞周期

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司峻岭