卜远虹
- 作品数：3 被引量：0H指数：0
- 供职机构：浙江理工大学生命科学学院生物化学研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划浙江省自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 家蚕新基因Bmbzj的表达、抗体制备及亚细胞定位
- 2012年
- 在自建的家蚕蛹cDNA文库中发现了一条新基因序列,GenBank登录号为DY231426。该基因是一个同源性很低的基因,未发现保守结构域,将其命名为Bmbzj。Bmbzj基因全长661bp,由99bp的5′端非翻译区序列(5′UTR)、486bp的开放读码框(ORF)和76bp的3′端非翻译区序列(3′UTR)组成。生物信息学分析结果表明蛋白Bmbzj可能存在跨膜区和信号肽。将该基因插入到载体pGEX-4T-3中,构建了该基因编码的重组质粒pGEX-4T-3-Bmbzj,转化大肠杆菌Rosetta后,IPTG诱导表达了该融合蛋白,并利用亲和层析的方法纯化该重组蛋白,免疫新西兰兔制备多克隆抗体。亚细胞定位实验结果表明该蛋白只存在于细胞质中。
- 高珍卜远虹金邦泽于威刘悦陈健张耀洲
- 关键词：家蚕原核表达纯化亚细胞定位
- 家蚕znfhit基因的克隆表达及序列分析
- 2009年
- 在对家蚕蛹cDNA文库的测序中发现了znfhit(zinc finger HIT)的EST序列(GenBank登录号DY230769)。经过比对发现znfhit全长为1019bp,由297bp的5′端非编码区序列(5′UTR)、462bp的开放读码框(ORF)和260bp的3′端非编码区序列(3′UTR)组成。将该基因的cDNA和家蚕基因组序列比对,此基因由3个外显子和2个内含子组成。ZNFHIT蛋白的疏水性最大值为1.533,最小值为-3.267,且不含跨膜区域。用PCR方法扩增获得znfhit基因,将其克隆至质粒pET-28a上,构建重组质粒pET-znfhit,并在大肠杆菌中大量表达,经镍离子亲和层析纯化得到重组蛋白,质谱鉴定其分子量为21.11KD,为后续研究其功能提供了条件。
- 卜远虹张耀洲
- 关键词：锌指蛋白克隆
- 家蚕ZNFHIT基因的原核表达以及亚细胞定位
- 在对家蚕蛹期cDNA文库测序中，我们筛选到一条cDNA序列，通过生物信息学分析，推测可能是家蚕一锌指蛋白基因。该基因长度为101.bp，由3个外显子和2个内含子构成，ORF长46.bp，编码153个氨基酸残基，蛋白分子量...
- 卜远虹
- 关键词：锌指蛋白原核表达亚细胞定位家蚕蛹
- 文献传递
