刘孟刚
- 作品数:43 被引量:148H指数:7
- 供职机构:第三军医大学大坪医院野战外科研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金海南医学院科研基金资助学报项目重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生文化科学生物学更多>>
- 谷氨酰胺酶反义基因诱导胃癌细胞凋亡的作用研究被引量:3
- 2009年
- 目的利用反义核酸技术封闭胃癌细胞的谷氨酰胺酶基因,观察反义GAcDNA能否对胃癌细胞的恶性表型有所逆转,为肿瘤的基因治疗探索一条新途径,也为后续研究及临床应用奠定基础。方法将含有GAcDNA片段的反义真核表达载体pcDNA3.0/GA,通过脂质体介导转入胃癌细胞SGC-7901,经筛选、鉴定,命名为SGC-7901GA,采用TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡情况,观察反义核酸转染后胃癌细胞凋亡的改变。结果pcDNA3.0/GA通过脂质体介导转染胃癌细胞SGC-7901,PCR证实GAcDNA目的片段已经整合到了SGC-7901细胞基因组,获得的G418抗性细胞命名为SGC-7901GA。检测胃癌细胞的凋亡情况表明重组质粒转染后SGC-7901GA的TUNEL阳性细胞数量显著上升,与对照组比较差异有统计学意义。结论本实验通过含有GAcDNA片段的反义真核表达载体pcDNA3.0/GA转染胃癌细胞株,发现胃癌细胞的凋亡指数增加,提示肿瘤细胞恶性程度有所降低,反义核酸技术封闭谷氨酰胺酶基因可能成为肿瘤基因治疗的一条新途径。
- 刘宏鸣杨俊涛袁涛刘孟刚唐春顾红光
- 关键词:谷氨酰胺酶谷氨酰胺反义核酸细胞凋亡
- 高支链氨基酸减少肝部分切除患者术后肝功能损害的研究被引量:11
- 2009年
- 目的观察高支链氨基酸对肝部分切除患者术后肝功能损害的改善作用,为临床治疗探索一条新途径。方法将接受肝部分切除的患者随机分为两组,治疗组使用高支链氨基酸,对照组使用普通氨基酸,观察两组患者围手术期的肝功能指标变化。结果两组患者术后均出现了肝功能损害,随着时间延长肝功能均逐渐改善,但治疗组在术后各个时相点肝功能改善均较对照组明显,恢复较快。结论高支链氨基酸的使用可以有效改善肝部分切除患者肝功能的损害,减少术后肝功能不全的发生。
- 刘宏鸣唐春袁涛刘孟刚陈平
- 关键词:支链氨基酸肝切除肝功能衰竭
- 谷氨酰胺酶反义基因对裸鼠胃癌移植瘤生长的抑制作用被引量:1
- 2005年
- 目的研究反义核酸技术封闭谷氨酰胺酶(GA)基因对裸鼠体内胃癌生长的抑制作用。方法将携带GA反义基因的质粒转染胃癌细胞SGC-7901,并将转染的胃癌细胞接种于裸鼠皮下,观察其在裸鼠体内的生长情况,通过病理学检查和免疫组化方法评价细胞增殖活性的改变;RT-PCR技术检测移植瘤内GA mRNA的含量。结果GA反义基因质粒载体成功转染胃癌细胞后,癌细胞成瘤能力下降,肿瘤生长速度减慢,肿瘤血管生成减少,肿瘤组织GA mRNA的含量减少。结论GA反义基因有效抑制GA基因的表达并抑制胃癌细胞在裸鼠体内的生长。
- 刘孟刚杨俊涛刘宏鸣袁涛顾红光
- 关键词:胃癌反义核酸谷氨酰胺酶裸鼠
- 腹腔镜联合胆道镜保胆取石的临床应用价值被引量:30
- 2011年
- 目的探讨腹腔镜联合胆道镜保胆取石的临床应用价值。方法对172例胆囊结石患者行腹腔镜联合胆道镜保胆取石,术后进行随访观察。结果所有腹腔镜联合胆道镜保胆取石患者均无结石残留,痊愈出院。172例患者随访1~2年,复发率为2.33%(4/172),胆囊壁厚度较术前明显变薄(P<0.05)。结论腹腔镜联合胆道镜保胆取石,可以有效地解决术中胆囊结石残留问题,是安全、易行的微创手术。
- 伍强周波袁涛刘孟刚刘宏鸣陈平
- 关键词:内窥镜胆囊结石病胆道外科手术外科手术微创性
- 过表达长链非编码RNA H19促进miR-124-3p表达抑制肝癌细胞增殖被引量:12
- 2016年
- 目的探讨长链非编码RNA H19(long non-coding RNA H19,lncRNA H19)对miR-124-3p表达的影响及在肝癌细胞增殖中的作用。方法 Real-time PCR检测肝癌细胞系及临床标本中lncRNA H19和miR-124-3p的表达;在肝癌细胞系Hep G2和SMMC7721中过表达lncRNA H19,Real-time PCR检测miR-124-3p及其靶基因cyclin D1的表达;Western blot检测cyclin D1蛋白表达水平;CCK-8法检测lncRNA H19对细胞增殖的影响;过表达lncRNA H19同时加入antagomiR-124-3p后,检测miR-124-3p及其靶基因表达情况及细胞增殖情况。结果 lncRNA H19和miR-124-3p在肝癌细胞系及肝癌组织中均低表达(P<0.05);过表达lncRNA H19后miR-124-3p表达显著增加(P<0.05),miR-124-3p的靶基因cyclin D1蛋白和mRNA表达明显下降(P<0.05),细胞增殖受到抑制(P<0.05);过表达lncRNA H19同时干扰miR-124-3p后,细胞增殖抑制作用减弱(P<0.05)。结论长链非编码RNA H19通过促进miR-124-3p表达,进而抑制其靶基因cyclin D1表达而抑制肝癌细胞增殖。
- 吕细林黄刚肖曼刘孟刚陈玥琦张楠张艳何凤田
- 关键词:H19CYCLIND1肝癌细胞增殖
- 两种灭菌技术在腔镜手术中的应用
- 2010年
- 腔镜手术较传统手术具有创伤小、恢复快等优势,其临床应用越来越广泛。腔镜手术对器械的依赖程度要远大于传统手术,而腔镜手术器械的消毒灭菌又比传统手术器械复杂,这就对腔镜手术器械的消毒灭菌提出了更高的要求。近年来我们采用不同灭菌技术相结合的方法,对腔镜手术器械进行消毒灭菌,取得了较满意的效果,现报告如下。
- 寇慧玲张亚莉聂智容刘孟刚
- 关键词:器械灭菌
- 慢病毒介导的大鼠肝BRL-3A细胞Tmub1基因沉默及稳定感染细胞系的建立
- 2012年
- 目的:构建Tmub1基因慢病毒干扰载体,建立稳定转染细胞系,检测大鼠肝BRL-3A细胞中Tmub1基因表达的干扰效果。方法:设计并构建4对针对大鼠Tmub1基因的特异性shRNA干扰质粒,酶切鉴定、DNA测序所得质粒。将由pRSV-Rev、pMDLg-pRRE、pMD2G和pll3.7干扰质粒组成的包装系统共转染293T细胞,产生慢病毒。所得慢病毒感染大鼠正常肝细胞BRL-3A,Western Blot检测不同靶点RNAi后Tmub1蛋白表达情况,确定有效靶点。针对有效靶点大量包装慢病毒。测定病毒滴度并以最适感染复数(multiplicity of infection,MOI)感染BRL-3A细胞后,G418抗生素筛选稳定感染细胞系BRL-3A/256。RT-PCR和Western Blot检测各组细胞Tmub1 mRNA和蛋白质的表达差异。结果:结果显示Tmub1 RNAi慢病毒载体构建成功,C0020Sh2-Hops-256干扰靶点RNAi效果最强。成功包装Tmub1基因RNAi慢病毒,测定病毒滴度为2.3×108TU/ml,对293T细胞的最适感染复数为60。成功建立Tmub1 RNAi慢病毒载体稳定感染细胞系BRL-3A/256,且在该细胞系中Tmub1 mRNA和蛋白质表达明显降低。结论:成功构建Tmub1 RNAi慢病毒载体,有效干扰BRL-3A细胞中Tmub1 mRNA和蛋白表达;成功筛选出Tmub1RNAi慢病毒稳定感染细胞系BRL-3A/256。
- 王晓枫刘孟刚刘宏鸣周波王宝林陈红旭陈平
- 关键词:RNA干扰慢病毒载体
- 建构主义理论对外科临床教学的启示被引量:1
- 2010年
- 建构主义作为当代对教学实践最具影响力的教育理念之一,同传统的以"教师为中心"教学模式相比,强调"以学生为主体",它在知识观、学习观和教学观等方面的独到见解,对临床外科教学方法的改进具有重要的启示意义。将外科临床教学内容化作问题,利用情景、会话、协作等学习环境要素,充分调动学生主动性、积极性,引导解决外科临床问题、培养临床创新思维和综合分析能力,使教学过程更符合学生掌握临床知识的客观规律,可收到更好的教学效果。
- 杨俊涛刘孟刚顾红光
- 关键词:建构主义临床教学外科学
- 急腹症误诊为急性胰腺炎2例被引量:2
- 2007年
- 刘孟刚
- 关键词:急腹症误诊胰腺炎
- STAT3在肝细胞增殖过程中对C/ebpβ表达的影响被引量:2
- 2014年
- 目的探讨STAT3在IL-6刺激肝细胞增殖过程中对C/ebpβ表达变化的影响。方法用含15 ng/ml的IL-6培养基培养大鼠正常肝细胞BRL-3A,运用CCK试剂盒检测该细胞在IL-6刺激后不同时间里的增殖情况,Western blot技术检测STAT3、P-STAT3、C/ebpβ的蛋白表达变化情况;利用siRNA瞬时转染技术抑制STAT3在BRL-3A细胞中的表达并观察IL-6刺激肝细胞增殖过程中C/ebpβ的表达变化。结果 IL-6能有效的刺激肝细胞增殖,在增殖早期STAT3、P-STAT3、C/ebpβ表达均明显上调;在肝细胞增殖过程中沉默STAT3后C/ebpβ表达下调。结论在IL-6肝细胞增殖过程中STAT3对C/ebpβ起正向调控作用。
- 匡怡刘孟刚魏东陈红旭李光耀陈平
- 关键词:肝再生STAT3P-STAT3IL-6