齐刚 作品数:6 被引量:23 H指数:4 供职机构: 西华师范大学生命科学学院西南野生动植物资源保护教育部重点实验室 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 四川省教育厅资助科研项目 四川省教育厅重点项目 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 更多>>
三种柚叶悬浮培养愈伤组织黄酮类有效成分的比较研究 被引量:3 2009年 用MS+2,4-D 1.0 mg/L+6%蔗糖培养基诱导三种柚叶片愈伤组织,悬浮培养法扩大培养,进行有效成分分析。结果表明沙田柚含有较高黄酮物质、柚皮苷和野漆树苷,琯溪蜜柚次之,江津柚含量最低,约为沙田柚的50-60%。柚苷元在三个品种愈伤组织中含量相似。该结果为柚类进一步遗传转化和改良提供了基础数据。 周梦春 苏智先 胡进耀 齐刚 曾艳 刘美关键词:柚子 愈伤组织 柚皮苷 黄酮 珙桐热休克蛋白序列分析及功能预测 被引量:4 2011年 从本实验室已构建好的珙桐种子cDNA文库中获得热休克蛋白18(HSP18)核苷酸序列,该序列编码蛋白属小热休克蛋白(sHSP)。用生物信息学的方法对HSP18从同源性、氨基酸组成、理化性质、疏水性/亲水性、信号肽、跨膜结构域、卷曲螺旋、蛋白质二级及三级结构进行预测和分析。结果表明,珙桐HSP18是不具有信号肽、没有跨膜卷曲螺旋结构的亲水性稳定蛋白,无规则卷曲是其蛋白质结构的主要结构元件,α-螺旋与β-折叠分散于整个多肽链中,并存在1个结构功能域。 刘美 苏智先 齐刚 胡进耀 阮期平关键词:生物信息学 三种柚子品种的离体快速繁殖 被引量:5 2010年 以三种柚子(Citrus grandis L.)品种叶片为外植体诱导愈伤组织,以幼嫩茎段诱导不定芽和不定根。结果表明:1.0 mg/L2,4-D与6%蔗糖处理的叶片愈伤组织诱导率最高,最高诱导率达82.5%;6-BA0.5 mg/L和NAA0~0.5 mg/L激素配比诱导丛生芽效果最高,最高可在每个茎段上诱导4个不定芽;1/4 MS+IBA 2.0 mg/L诱导生根效果最好,最高达40%,虽然根系很弱,难以成苗,但可以用于试管微嫁接。所有的培养中,?溪蜜柚和沙田柚的诱导率接近,都比江津柚高大约30%~50%。 周梦春 苏智先 胡进耀 齐刚 曾艳 刘美关键词:柚子 愈伤组织 不定芽 不定根 珙桐干种子总DNA提取方法的比较 被引量:3 2008年 以珙桐干种子为材料,采用简易CTAB法、SDS法、高盐沉淀法与高盐低pH值法分别对珙桐干种子进行了总DNA提取效果的比较分析。结果表明,四种方法均能有效地提取较高质量的珙桐种子DNA,其中SDS法效果最好,获得的DNA纯度最高,产量最大,CTAB法次之,高盐沉淀与高盐低pH值法获得DNA质量相对较低,低于其它两种方法。获得最佳的DNA提取方法,可为PCR扩增,引物设计,筛选珙桐种子中的相关基因奠定基础。 齐刚 苏智先 阮期平 雍妮关键词:干种子 DNA提取 SDS法 休眠期珙桐种子cDNA文库构建及EST分析 被引量:10 2009年 以休眠期27个uniEST,经网上BlastN及BlastX分析,其中75个序列是已知功能的基因标签,相似性较高,而32个序列在GenBank中相似性较低,13个序的珙桐种子为材料,利用SMARTTMcDNA Library Construction Kit构建珙桐种子的cDNA文库。结果表明:该文库的滴度为1.5×106pfu.mL-1,重组率为98%,cDNA文库插入片段大小主要集中在0.5~1.0kb。随机测序获得148个EST序列,拼接成1列在GenBank中没有匹配。这些数据有助于对珙桐种子的相关功能蛋白及分子机制的研究。 齐刚 苏智先 李劲涛 阮期平关键词:休眠 CDNA文库 表达序列标签 珙桐中一个与低温相关基因的克隆及其表达研究(英文) 被引量:5 2010年 低温诱导膜蛋白是由低温诱导表达蛋白基因编码的一类疏水性蛋白,在植物抵御寒冷环境时起着一定的保护作用。从珙桐cDNA文库中获得一个未知基因(DiRCI),该基因长539bp,其中包括174bp的开放阅读框,92bp的5′末端非编码区和273bp的3′末端非编码区,编码57个氨基酸残基蛋白,在氨基酸水平上同源性较高的是车前草的低温诱导膜蛋白(登入号:ACA66247.1),其相似性为89.5%。半定量RT-PCR分析发现,25℃以上,该基因在珙桐各器官中基本上均未表达,但经8℃低温处理时,在成熟叶片、叶柄和成熟未萌发的种子中均有表达,但是在根中基本没有表达,进一步研究发现该基因在24h~48h内表达量增多并达到最高值,48h后其表达量逐渐减弱直至消失,说明该基因确实与低温诱导相关,从而初步推测该基因为低温诱导膜蛋白基因。该基因的克隆丰富和保存了珙桐基因资源,并为进一步研究冷胁迫的分子机制奠定了基础。 季红春 苏智先 杨军 边春象 胡进耀 齐刚关键词:基因 克隆 半定量RT-PCR