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颜秋生: 作品数：28 被引量：291H指数：11; 供职机构：中国农业科学院中国水稻研究所水稻生物学国家重点实验室更多>>; 发文基金：国家自然科学基金浙江省自然科学基金农业部农业结构调整重大技术研究专项项目更多>>; 相关领域：农业科学生物学更多>>

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水稻胚性悬浮细胞的玻璃化法超低温保存和可育植株再生被引量：24: 1996年; 玻璃化法超低温保存(Cryopreservation by vitrification)是1980年代兴起的一种冷冻保存新技术,它的基本过程是将生物样品用一定配方的玻璃化法保护剂处理后快速投入液氮贮存。描述离体培养物或再生小苗高度含水化时也用“玻璃化”一词,但本文中的“玻璃化”是指一个生物物理学过程——细胞和溶液在快速降温时进入一种均一的无定形态,细胞里的水不转变成冰,而呈超冷液体状态,一种对细胞冷冻损伤最小的状态。为了使细胞呈玻璃化。; 王君晖郑泳严庆丰黄纯农颜秋生张雪琴; 关键词：水稻胚性悬浮细胞超低温保存植株再生

水稻与大黍不对称体细胞杂交再生植株被引量：32: 1997年; 采用PEG(聚乙二醇)融合法,诱导水稻(Oryza sativa L.)原生质体与无融合生殖大黍(Panicummaximum Jacq.)原生质体融合,经过融合体筛选、培养,成功地获得了再生植株并移栽成活。在融合前,水稻原生质体经过2.5mmol/L碘乙酰胺(IOA)在室温(22～25℃)条件下处理15min,大黍原生质体经过60Kr软X射线照射处理。对获得的28株融合再生植株进行初步检查发现,在花器官形态、结构及生殖特性上与对照亲本水稻植株有显著的差异,出现多花药(一朵颖花具7～11枚甚至13枝花药)、多胚珠(1个子房内有2～3个胚珠)及“多胚囊”(1个胚珠内有2个以上类似胚囊的结构)等现象。雌、雄性育性显著降低或完全不育,仅有5株能够少量结实,I-KI溶液着色的花粉从0至68％不等。细胞胚胎学检查表明不能结实的植株雌性均不育,即不能分化出正常的胚囊结构。; 辛化伟孙敬三颜秋生张雪琴; 关键词：水稻体细胞杂交植物再生

水稻胚性悬浮细胞系建立的细胞学研究被引量：5: 1993年; 胚性悬浮细胞是禾谷类作物原生质体培养的理想材料。本文研究了水稻广亲和中粳品系02428胚性悬浮细胞系建立过程中的细胞学动态变化,结果表明:建成的胚性悬浮细胞系(后期悬浮细胞系)和前、中期悬浮细胞系相比较,细胞团内细胞结合紧凑,细胞壁簿,细胞质浓厚,颗粒状内含物丰富,细胞活力强,质膜凹陷较浅,较平整,质膜强度高。本研究结果从细胞学角度初步探讨了水稻胚性悬浮细胞系适应于原生质体培养的机理。; 向太和杨剑波吴李君吴家道钟华鑫梁海曼颜秋生张雪琴; 关键词：水稻细胞学胚性悬浮细胞

水稻悬浮细胞的超低温保存研究被引量：9: 1994年; 本研究分析了水稻悬浮细胞的生理状态和各种冷冻前处理等因素对超低温保存后细胞存活率的影响。结果表明,继代后培养3—5天,处于对数生长期的细胞,采用二步冷冻法,超低温保存后存活率最高。电镜超微结构观察显示,0.5mol/L山梨醇预培养,10%DMSO+0.5mol/L山梨醇复合保护剂处理,液泡显著变小,数目明显减少,从而降低了细胞内自由水含量,增强细胞的抗冷冻能力。在上述合适的前处理和冷冻-化冻条件下,超低温保存水稻悬浮细胞的恢复生长率为58%,恢复生长的细胞转移到分化培养基上,可再生健壮绿苗, 移植到盆钵,在温室中长成正常结实的植株。; 严庆丰王君晖黄纯农颜秋生张雪琴; 关键词：水稻悬浮细胞超低温保存

柑橘抗寒细胞变异体的获得及其抗性遗传稳定性的研究被引量：45: 1999年; 锦橙（Citrussinensis（L．）Osbeckcv．Jincneng）珠心愈伤组织悬浮细胞通过γ射线诱变与高浓度羟脯氨酸离体选择的方法，获得了抗性细胞系，并再生植株。抗性细胞系及其再生植株比供体（对照）的抗寒性分别提高1．4℃和24℃，连续3年测定结果表明再生植株抗寒性的增强是稳定的。其叶片总DNA的RAPD分析说明供体与变异植株可能在DNA水平上存在细微的差异，冷驯化进一步加强抗性细胞系与再生植株在抗氧化酶SOD、过氧化氢酶（CAT）活性和脯氨酸（Pro）、丙二醛含量上的差异。变异系抗性增强的生理基础涉及Pro代谢外的其他途径，抗氧化酶活性的提高与其抗寒性的增强有关。; 林定波颜秋生沈德绪; 关键词：柑橘体细胞变异体抗寒性抗氧化酶

水稻胚性悬浮细胞系建立过程中生理生化变化——Ⅱ.氨基酸、多胺及内源激素的变化被引量：26: 1997年; 以水稻广亲和中粳品系02428为材料,分析了其胚性悬浮细胞系建立过程中氨基酸、多胺及内源激素的变化。结果表明:1.游离氨基酸的总量是FP_(15)>MP_(45)>LP_(90),其中FP_(15)游离精氨酸的含量很高,而在MP_(45)和LP_(90)中含量剧降。蛋白质氨基酸和蛋白质合成能力正好和游离氨基酸的总量变化相反。2.从FP_(15)→MP_(45)→LP_(90),腐胺含量呈上升、精胺含量呈下降趋势。腐胺/(精胺+亚精胺)上升了近20倍。悬浮细胞经脱壁而成游离原生质体后,其总多胺、尸胺和腐胺的含量与悬浮细胞相比均大幅度下降,而精胺和亚精胺则有所升高。3.植物内源激素IAA、2ip的含量是LP_(90)>MP_(45)>FP_(15),ABA、ZRs的含量是FP_(15)>MP_(45)>LP_(90)。上述变化在一定程度上解释了胚性悬浮细胞即后期悬浮细胞适合于进行原生质体培养的生理生化机理。; 向太和梁海曼钟华鑫颜秋生张雪琴; 关键词：水稻胚性悬浮细胞系氨基酸多胺

水稻胚性悬浮细胞系建立过程中的生理生化变化被引量：23: 1995年; 本文详细分析了水稻广亲和中粳品系02428胚性悬浮细胞系建立过程中的培养液渗透值、pH值,呼吸作用,过氧化物酶同工酶,碳、氢及矿质元素的变化。结果如下:1、前期、中期和后期悬浮细胞系（即胚性悬浮细胞系）的培养液渗透值在一次继代培养的0—3天期间剧升,并继续上升至第5天达峰值,尔后有所回降;培养液pH值的变化正好相反。2、中期和后期悬浮细胞比前期悬浮细胞更多地利用氨基酸作为代谢底物。后期悬浮细胞的EMP途径相对稍低,而HMP、TCAC途径较前期、中期稍强。3、从前期→中期→后期,过氧化物酶同工酶阴极区带显著变窄、减弱。后期的阳极区过氧化物酶同工酶也较前期为弱。4、后期悬浮细胞和前、中期悬浮细胞相比较,氮、镁的含量较高,而钙、铁的含量较低。上述生理生化变化与悬浮细胞能否适合于进行原生质体培养有一定的相关性。; 向太和钟华鑫梁海曼颜秋生张雪琴; 关键词：水稻胚性悬浮细胞系生理生化变化原生质体培养

RAPD鉴定栽培稻与野生稻体细胞杂种被引量：20: 1996年; 利用随机引物扩增DNA(RAPD)技术,对栽培稻和野生稻原生质体融合获得的体细胞杂种进行了鉴定。证实了它们包含有双亲的基因组成分,但来自双亲的基因组成分并不是对等的。一些体细胞杂种含有一个亲本更多的基因组成分,而另一些相反。利用RAPD数据和聚类图讨论了体细胞杂种和双亲的亲缘关系。; 李文彬梁红健孙勇如颜秋生张雪琴滕胜; 关键词：水稻体细胞杂种 RAPD 栽培稻野生稻

水稻原生质体植株再生技术: 张雪琴颜秋生; 该项目于1986年开始进行研究，经过几年来的努力建立了较稳定的水稻原生质体培养程序，于1987年8月首先将粳稻(台北309)原生质体培养获得了再生植株，并从再生植株上收到成熟的种子。在该基础上，1989年6月下旬又将当前...; 关键词：; 关键词：水稻原生质体培养

抗潮霉素B的水稻原生质体的再生被引量：5: 1996年; 本实验室构建的具有潮霉素Ｂ（ＨＰＴ）抗性基因、卡那霉素抗性基因（ＫａｎＲ）和虫萤光素酶基因（ＬＣＣ）的质粒ｐＴＨＬ２７ＤＮＡ，用聚乙二醇（ＰＥＧ）法导入到水稻广亲和品种０２４２８的原生质体细胞内．研究原生质体抗性筛选和原生质体再生的条件．结果，在含有２５μｇ／ｍｌ潮霉素Ｂ和１００ｎμｇ／ｍｌ卡那霉素的培养基ＫＰＲ和Ｎ６内连续处理４星期，可以很好地除去非转化的敏感的原生质体再生细胞，然后在无抗菌素选择压力的培养基中，转化细胞可再生成小植株．; 杨歧生颜秋生金小平张雪琴; 关键词：水稻原生质体

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