陈铨
- 作品数：5 被引量：6H指数：2
- 供职机构：华中科技大学同济医学院附属协和医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- ^99Tc^m-亚锡葡庚糖酸钠结合GGC序列监测基因治疗的实验研究被引量：4
- 2011年
- 目的 构建以金属结合肽（双甘氨酰半胱氨酸,即GGC序列）为核素报告基因、人VEGF165为治疗基因的重组腺病毒载体,以99Tcm-GH为报告探针,探讨该报告系统监测治疗基因表达的可行性.方法 pcDNA3-VEGF165质粒线性化后,将金属结合肽GGC序列连于VEGF165基因C端,通过内部核糖体切入位点（IRES）连接增强型绿色荧光蛋白（EGFP）,构建重组腺病毒载体Ad5-VEGF165GGCmotif-IRES-EGFP（Ad5-VIE）,同时构建腺病毒包装EGFP（Ad5-EGFP）为对照.以不同感染复数（MOI=0,10,25,50,100）Ad5-VIE感染大鼠骨髓间充质干细胞（MSC）后,用99Tcm-GH为报告探针,研究感染细胞摄取动力学（30,60,90和120 min）情况,以检测GGC序列在MSC中的表达,并与实时定量PCR、Western-blot蛋白印迹、免疫组织化学等方法鉴定的VEGF165表达进行对比分析.通过荧光显微镜及实时定量PCR检测EGFP在细胞中的表达.采用SPSS 13.0软件进行统计学处理,组间比较运用独立样本成组t检验、q检验和直线（Pearson）相关分析.结果 以Ad5-VIE感染MSC后,不同MOI摄取实验结果示细胞对99Tcm-GH的摄取率随病毒MOI的增加而逐渐增加（r2=0.86,P＜0.05）,并且在MOI=100时达到（7.94±0.75）%;不同时间摄取实验示随99Tcm-GH孵育时间延长,细胞摄取率逐步增高,至120 min时达到（7.72±0.22）%.Ad5-VIE感染组与Ad5-EGFP感染组摄取率在各个不同时间点差异均有统计学意义（t=15.10～54.92,P均＜0.05）.在mRNA水平上,VEGF165及EGFP表达均随病毒MOI增加而增加（r2=0.99,P＜0.05）.不同MOI下细胞对99Tcm-GH的摄取与VEGF165蛋白表达呈较好的相关性（r2=0.90,P＜0.05）.免疫组织化学检查结果表明人VEGF165目的 基因在MSC中成功表达.荧光显微镜下可以观测到被感染细胞中的EGFP蛋白.结论 成功构建的重组腺病毒系统Ad5-VIE感染MSC对99Tcm-GH的摄取与VEGF165表达呈正相关.以GGC多肽为报告基因可以监测治疗基因VEGF165的表达,为
- 张国鹏兰晓莉何勇陈铨张永学
- 关键词：甘氨酸半胱氨酸肽类
- 人非小细胞肺癌A549在环磷酰胺作用下细胞增殖和对18F-FDG摄取动力学的变化
- 目的探讨人非小细胞肺癌细胞株A549在环磷酰胺作用下细胞增殖变化和对~(18)F-FDG摄取动力学变化,以期为应用~(18)F-FDG PET显像进行化疗药物疗效早期评估提供细胞水平依据和理论基础。方法体外培养A549细...
- 陈铨兰晓莉张永学
- 报告基因系统HSV1-sr39tk/FIAU监测治疗基因表达的体外研究被引量：1
- 2010年
- 构建HSV1-sr39tk为报告基因,以VEGF165为治疗基因的重组腺病毒载体Ad5-sr39tk-IRES-VEGF165(Ad5-SIV),将其以不同感染复数(MOI=0、10、25、50、75、100)感染大鼠骨髓间充质干细胞,用免疫激光共聚焦技术检测HSV1-sr39tk与VEGF165的表达。用酶联免疫吸附试验(ELISA)监测感染病毒后细胞培养上清中VEGF165蛋白分泌量;细胞摄取131I-FIAU实验监测HSV1-sr39tk报告基因的表达情况,以腺病毒包装增强型绿色荧光蛋白(Ad5-EGFP)为对照。结果显示:免疫共聚焦显微镜可观察到HSV1-sr39tk蛋白与VEGF165蛋白在细胞内成功表达;VEGF165蛋白分泌情况与MOI间呈线性正相关(P<0.05);感染Ad5-SIV后细胞对131I-FIAU摄取率增高与MOI间呈线性正相关(P<0.05)。不同时间摄取实验结果显示:30-150min间细胞摄取率迅速增高,之后增高减慢,进入平台期。MOI相关摄取结果与MOI相关ELLISA结果具有较好相关性(P<0.05)。Ad5-SIV经感染后可在大鼠骨髓间充质细胞中成功表达,并且治疗基因VEGF与报告基因HSV1-sr39tk的表达呈正相关,说明可通过报告基因HSV1-sr39tk监测治疗基因VEGF165的表达,为动物水平报告基因显像提供理论支持。
- 张国鹏兰晓莉陈铨曹卫何勇张永学
- 关键词：血管内皮生长因子骨髓间充质细胞报告基因基因治疗
- 18F-FDG PET/CT监测大细胞肺癌化疗效果的实验研究
- 陈铨兰晓莉王朋李崇佼袁辉高雪梅张永学
- 分子成像技术的研究进展被引量：2
- 2011年
- 分子成像是新时代的医学成像，它可以无创性监测活体内的细胞和分子水平的生物学过程，其中包括核医学分子显像、磁共振分子成像、超声分子成像、光学分子成像和X射线分子成像等。目前，由于多学科融合的发展，多模式融合成像技术已成功用于临床，如PET—CT和PET—MRI。随着分子探针的发展和多模式融合成像技术的成熟，越来越多的分子成像技术将会运用于临床诊断和治疗。
- 陈铨张永学
- 关键词：分子探针核医学显像磁共振成像超声检查光学成像
