陈竞华
- 作品数:4 被引量:93H指数:4
- 供职机构:北京医科大学临床肿瘤学院更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 人抗-HBs Fab段基因的序列分析及表达被引量:34
- 1995年
- 对已建的噬菌体抗体库中分离的人抗-HBs克隆进行了序列分析和表达研究,发现19个克隆都具有相同的重链可变区基因,轻链可变区基因有4个相同,其余15个未进行序列测定。DNA序列分析表明VH、JH分属VHVHⅢ和JH6,D段为二个D基因的融合,VK,JK属于VKI和JK4。
- 王琰刘群英徐建军王雅明陈竞华
- 关键词:HBSAG噬菌体抗体
- 人抗HBsAg Fab段基因的序列分析及表达被引量:6
- 1995年
- 本文对已建的噬菌体抗体库中分离的人抗HBsAg克隆进行了序列分析和表达研究,发现19个克隆都具有相同的重链可变区基因,轻链可变区基因有4个相同,其余15个未进行序列测定.DNA序列分析表明 V_H、J_H分属V_HⅢ和J_H6,D对段为二个D基因的融合,V_k,J_k属于V_kⅠ和J_k4.构建了可溶性Fab段表达载体,发现在细菌培养上清和质周腔中有类似的表达,其表达量约为5ug/ml,与HBsAg可特异性结合,经测定其亲和系数约为0.5×10~9M^(-1).
- 王琰刘群英徐建军王雅明陈竞华
- 关键词:表面抗原FAB段可变区基因
- 用噬菌体抗体库技术筛选单克隆抗体被引量:5
- 1995年
- 用噬菌体抗体库技术制备单克隆抗体是近年来抗体技术中的革命性进展,本文简要介绍了我们在这方面所进行的研究工作:从乳癌细胞免疫后的小鼠脾脏细胞和接种过HBsAg疫苗的志愿者的外周血淋巴细胞扩增出k链和Fd段基因,组装到Fab段噬菌体抗体表达载体pCOMB3中,分别建立了鼠源性和人源性噬菌体抗体库,以固相化的HBsAg和乳癌细胞为抗原,通过“吸附一洗脱—扩增”富集性筛选过程获得了鼠抗人乳癌细胞和人抗HBsAg的噬菌体抗体,并通过对表达载体的改造,在大肠杆菌表达出了可溶性的Fab段,对所获得的抗体Fab段进行了特异性、亲和力以及DNA序列的分析,显示噬菌体抗体库技术是一个行之有效的抗体制备手段.
- 张广发陈竞华王雅明徐建军刘华王琰刘群英
- 关键词:噬菌体抗体库技术单克隆抗体FAB段DNA序列人源性
- 人源性噬菌体抗体库的构建及HBsAg人单抗的筛选被引量:66
- 1995年
- 用聚合酶链延伸反应(PCR)从人外周血淋巴细胞克隆出Fd段和к链基因,重组到表达载体pCOMB3中,构建了人源性噬菌体抗体库。将乙肝病毒表面抗原(HBsAg)固相化对噬菌体抗体库进行了三轮“吸附—洗脱—扩增”的筛选,使特异性噬菌体抗体得到了富集,筛选到了抗HBsAg的人单抗。
- 陈竞华王琰刘群英王雅明徐建军刘华
- 关键词:噬菌体抗体HBSAG人单克隆抗体