公共文化服务平台

陈小琳: 作品数：33 被引量：129H指数：7; 供职机构：武汉大学人民医院更多>>; 发文基金：湖北省自然科学基金国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>

合作作者

Reg3β干扰载体的构建及在H9C2心肌细胞中的鉴定: 2020年; 目的构建再生基因蛋白3β(regenerating islet-derived protein 3 beta,Reg3β)干扰载体,并在H9C2大鼠心肌细胞中优化转染条件,鉴定抑制效果,为深入探索Reg3β在心血管疾病的作用提供有利的工具。方法设计合成Reg3β干扰序列,在5'端加入一个Sac 1的酶切位点,3'端加人L0OP环序列和反向互补序列,构建pG1.2-Reg3βshRNA沉默载体。接着分别用Li-pofectamine2000和Lipofectamine3000优化摸索转染大鼠H9C2心肌细胞的效率,以q-PCR和Western blot法检测H9C2细胞内Reg3β的表达量。结果设计合成了3对Reg3β干扰序列,从中筛选出抑制效率最高达67.93%的序列.酶切和测序结果证实成功构建了pG1.2-Reg3βshRNA。经过优化比较发现,pG1.2-Reg3βshRNA沉默载体Lipofeetamine3000比例为1μg:3μl时,其转染效率最高(50%以上)。q-PCR和Western blot法检测结果显示,最佳干扰载体在最高转染条件下可使H9C2细胞Reg3β表达量降低50%以上。结论成功构建了pG1.2-Reg3βshRNA沉默载体,并在H9C2细胞中有效干扰Reg3β的表达,可用于探讨Reg3β在心血管疾病中的作用。; 易波蔡玉立李俊峰包艳陈小琳文重远; 关键词：心肌细胞

RNAi介导线粒体融合素2基因沉默导致BALB／c小鼠葡萄糖代谢紊乱和胰岛素抵抗: 2010年; 目的研究RNA干扰（RNAi）介导线粒体融合素2（mitofusin－2，Mfn2）基因沉默对BALB／c小鼠葡萄糖代谢和胰岛素敏感性的影响。方法构建带有绿色荧光蛋白（GFP）基因的Mfn2短发卡RNA质粒载体（Mfn2shRNA）和阴性对照质粒载体（HK）。44只BALB／c小鼠分为转染组（Mfn2）和阴性对照组。将含有75μg质粒溶液1．5ml以流体力学法注入小鼠体内。质粒注射5d后，采用腹腔葡萄糖耐量和胰岛素耐量试验观察Mfn2基因干扰对小鼠葡萄糖代谢和胰岛素敏感性的影响；采用氚标记葡萄糖（3－[^3H]－葡萄糖）通过尾静脉注射到小鼠体内，留取血标本，液体闪烁计数仪测定标本放射性浓度，计算小鼠肝脏葡萄糖生成率；Western印迹法检测肝脏组织中Mfn2蛋白表达。结果与阴性对照组小鼠比较，Mfn2组小鼠肝脏组织Mfn2蛋白表达明显减少（8．05±0．15对8．56±0．01，P〈0．05），空腹血糖升高[（6．95±0．83对4．68±0．29）mmol／L，P〈0．05]，胰岛素敏感性下降，肝脏葡萄糖生成增加[（49．43±16．31对24．91±4．07）μmol·kg^-1·min^-1，P〈0．05]。结论下调Mfn2基因表达使BALB／c小鼠葡萄糖代谢异常和胰岛素抵抗，Mfn2基因在维持体内葡萄糖代谢稳态中起重要作用。; 陈小琳蔡小俐范明霞; 关键词：基因沉默糖代谢胰岛素抵抗

采用卵巢冰冻切片和改进H&E染色方法分析小鼠发情周期卵泡形态（英文）被引量：7: 2017年; 通过观察卵巢组织中不同发育阶段的各级卵泡的形态和数量,并结合促性腺激素和性激素的测定能够更好地评估卵巢功能。本研究目的在于改进现有的卵巢组织切片及染色方法,建立更快观察和评价卵巢组织中各级卵泡数量和质量的方法。取动情前期、动情期、动情后期和动情间期雌性C57BL/6J小鼠卵巢,用4%多聚甲醛固定,梯度蔗糖脱水,OCT(optimal cutting temperature compound)包埋,冰冻切片(厚7μm),快速H&E染色后进行观察。结果显示,本方法能够分辨次级卵泡、窦前、窦状和排卵前卵泡,虽然不能区分和分辨始基卵泡和初级卵泡,但是其它观察结果与复杂的方法相当。以上结果提示,快速和改进的小鼠卵巢冰冻切片和H&E染色方法可以与激素分析结合,用于小鼠模型中的卵巢发育和功能研究。; 陈小琳陈晨; 关键词：卵巢冰冻切片卵泡

动态血糖监测技术与临床研究进展被引量：23: 2021年; 动态血糖监测(CGM)技术迅速发展,已成为DM管理的重要方法。规范合理应用CGM系统可明显降低DM患者HbA_(1)c水平,减少血糖波动及低血糖风险,提高血糖控制效果和生活质量,对改善DM患者预后意义重大。本文对CGM技术与临床研究进展进行综述。; 蔡玉立易波陈小琳文重远; 关键词：动态血糖监测糖尿病血糖波动低血糖

MC4R基因敲除对雌性小鼠代谢和肝脏脂肪性病变的影响被引量：1: 2019年; 目的观察黑皮质素4基因(melanocortin 4 receptor,Mc4r)敲除对C57/BL6雌性小鼠代谢和肝脏脂肪性病变的影响。方法以MC4R敲除(MC4RKO)和野生型C57/BL6(WTLM)雌性小鼠作为研究对象,观察小鼠摄食量、体重、体长、血糖、胰岛素水平;采用腹腔葡萄糖耐量实验(glucose tolerance tests,GTT)和胰岛素耐量实验(insulin tolerance tests,ITT)评估小鼠糖代谢和胰岛素敏感度;HE染色和油红染色观察肝脏脂肪病变。结果与WTLM小鼠比较,MC4RKO小鼠日摄食量、体长、体重、内脏脂肪明显增加(P=0.000)。MC4RKO雌性小鼠从12周龄显示空腹、餐后血糖和胰岛素水平显著高于WTLM雌性小鼠(P<0.05)。同时,MC4RKO雌性小鼠显示葡萄糖耐量异常和胰岛素敏感度降低(P<0.05)。肝组织HE染色和油红染色,结果显示MC4RKO雌性小鼠肝细胞胞质中有脂滴空泡。结论Mc4r基因敲除导致C57/BL6雌性小鼠多食、肥胖、糖代谢异常、胰岛素抵抗和严重肝脏脂肪性病变。; 陈小琳陈晨; 关键词：代谢脂肪肝

2型糖尿病大鼠心肌葡萄糖转运体4的变化及其对葡萄糖和脂肪酸代谢的影响被引量：14: 2005年; 目的探讨2型糖尿病大鼠心肌葡萄糖转运体4(GLUT4)的表达与葡萄糖及其脂肪酸氧化代谢的关系,同时观察罗格列酮使用后上述指标的变化。方法24只SD雄性大鼠随机分为实验治疗组(6只)、实验对照组(6只)、正常治疗组(6只)和正常对照组(6只)。采用高脂喂养(40%脂肪、42%碳水化合物和18%蛋白质)4周及小剂量链脲佐菌素(35mg/kg)一次性腹腔注射建立2型糖尿病大鼠模型。实验治疗组和正常治疗组给予罗格列酮3mg·kg-1·d-1灌胃2周;各组大鼠进行30min等容离体心脏Langendorff灌注,灌注液含100μU胰岛素、5mmol/L葡萄糖、0.4mmol/L3H软脂酸,测定样本葡萄糖含量及3H2O计数,评估心肌葡萄糖和脂肪酸氧化率;Western印迹法检测心肌细胞膜GLUT4表达水平。结果与正常对照组比较,实验对照组大鼠心肌葡萄糖总氧化量明显较少[(55±6)μmol/g干重vs(69±6)μmol/g干重,P<0.01],葡萄糖氧化比例较少(18%vs25%),脂肪酸氧化率较高(82%vs75%);同时心肌细胞膜上GLUT4的表达量减少53%。与实验对照组比较,给予RSG的实验治疗组,心肌葡萄糖的氧化量较高为(64±6)μmol/g干重(P<0.05),葡萄糖和脂肪酸的氧化比例分别为24%和76%,GLUT4表达量也明显较大(92%vs47%,P<0.01)。结论心肌细胞膜上GLUT4表达减少可能是2型糖尿病心肌葡萄糖和脂肪酸氧化代谢改变的重要原因,罗格列酮通过增加GLUT4的表达,可以提高心肌葡萄糖氧化、降低脂肪酸氧化,这将有助于减轻糖尿病心肌细胞损伤,增强抗缺血的能力。; 文重远吴勇李燕陈小琳王腾欧阳静萍李庚山; 关键词：2型糖尿病大鼠心肌葡萄糖转运体4 脂肪酸代谢 WESTERN印迹法 SD雄性大鼠

二甲双胍对非酒精性脂肪肝大鼠肝细胞CYP2E1表达的影响被引量：5: 2013年; 目的探讨细胞色素P4502E1(CYP2E1)在非酒精性脂肪肝形成中的作用及二甲双胍对非酒精性脂肪肝的治疗作用。方法 24只雄性Wistar大鼠分为3组,每组8只。对照组用普通饲料喂养,高脂组用脂肪乳灌胃,二甲双胍组在脂肪乳灌胃的同时给予二甲双胍灌胃。喂养8周后处死大鼠,测量体重、肝脏指数、ALT、AST、HDL-C、TG、空腹血糖(Fbg),空腹胰岛素(Ins)。大鼠肝脏组织进行HE染色观察脂肪变及炎症坏死程度。用高胰岛素正葡萄糖钳夹实验评估大鼠胰岛素敏感度。用免疫组织化学染色和反转录聚合酶链反应(RT-PCR)观察CYP2E1的表达。结果二甲双胍组大鼠ALT、AST、TG明显低于对照组和髙脂组。二甲双胍组的肝脏脂肪变程度轻于高脂组。二甲双胍组大鼠的葡萄糖输注率高于对照组。二甲双胍组大鼠的肝脏CYP2E1表达低于高脂组。结论二甲双胍能有效地治疗非酒精性脂肪肝,可能与抑制CYP2E1的表达有关。; 余辉陈小琳王佐兵张杰荣段永强谢明杨利华陈曦曹伟; 关键词：二甲双胍非酒精性脂肪肝 CYP2E1

2型糖尿病一级亲属腰围与胰岛素抵抗、脂代谢、血压和炎症因子的相关性分析: 2008年; 【目的】探讨2型糖尿病(T2DM)非糖尿病一级亲属腰围与胰岛素抵抗(IR)、血脂、血压、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、白介素-6(IL-6)之间的相关关系。【方法】测定全组67例(男性组33例,女性组34例)T2DM家系非糖尿病一级亲属的腰围、血压和空腹血脂、hs-CRP、IL-6水平以及计算HOMA-IR指数,分别分析腰围与IR、血脂、血压、hs-CRP、IL-6之间的相关关系。【结果】在全组和男、女性组中,腰围与HOMA-IR、收缩压、舒张压、hs-CRP、IL-6显著正相关(P<0.05);全组中,腰围与甘油三酯(TG)显著正相关(P<0.01),与高密度脂蛋白胆固醇(HDL-c)显著负相关(P<0.01);在男性组中,腰围与TG、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-c)显著正相关(P<0.05);在女性组,腰围与HDL-c显著负相关(P<0.01)。【结论】在T2DM非糖尿病一级亲属中,腰围是影响胰岛素敏感性、脂代谢、血压和hs-CRP、IL-6表达的重要因素。; 陈小琳孙永林李竞蔡小俐雷幼蓉; 关键词：糖尿病非胰岛素依赖型胰岛素抗药性血压

阿司匹林增加高脂喂养Wistar大鼠胰岛素敏感性和Mfn2mRNA的表达: 2015年; 目的研究阿司匹林对高脂喂养Wistar大鼠胰岛素敏感性和线粒体功能的影响。方法 24只Wistar大鼠,♂,分为对照组(NC)、高脂组(HF)和阿司匹林组(AF)(n=8),喂养8周后,以高胰岛素-正常葡萄糖钳夹测定大鼠胰岛素敏感性,取空腹血清测定大鼠谷草转氨酶(ALT)、谷丙转氨酶(AST)、高密度脂蛋白(HDL-C)、甘油三酯(TG)、空腹血糖(FBS),空腹胰岛素(FINS)的水平;将大鼠肝脏组织进行固定、包埋、切片和HE染色,观察肝脏组织学变化;取肝脏组织,测定肝糖原含量;提取肝细胞线粒体并分离线粒体超氧化物歧化酶,测定线粒体超氧化物歧化酶活性(SOD),以及提取肝组织总RNA,应用RT-PCR测定肝脏组织Mfn2 m RNA的表达。结果与NC组大鼠比较,HF组大鼠肝脏指数、TG、FBS、ALT、AST、INS明显升高(P<0.05),GIR和SOD显著降低(P<0.05),肝脏组织Mfn2 mRNA表达显著降低,肝细胞体积增大,胞质中有脂滴空泡;AF组大鼠上述各指标差异无统计学意义,显微结构无显著变化。结论阿司匹林可以改善高脂诱导的胰岛素抵抗及抑制脂肪肝的形成,这一作用可能是部分通过促进肝细胞Mfn2表达、改善线粒体功能实现的。; 陈小琳余辉黄艳江柳孙永林; 关键词：阿司匹林胰岛素敏感性线粒体

不同方法评估不同糖代谢人群胰岛β细胞功能结果的分析: 2010年; 张小飘孙永林陈小琳; 关键词：胰岛Β细胞功能糖代谢异常病理生理学血糖水平

陈小琳

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户反馈

陈小琳

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户登录

用户反馈