郭良让
- 作品数：5 被引量：10H指数：2
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- 发文基金：广东省自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 植物DNA混合物中物种成分实时荧光PCR定量分析
- 2009年
- 目的：建立植物DNA混合物中物种成分实时荧光PCR定量方法。方法：建立PCR反应管中某物种DNA质量和该物种特异性基因扩增Ct值之间的定量关系,通过260 nm处光密度值的测定计算DNA提取液的浓度和DNA总质量,并以某物种DNA和总DNA的质量百分比表示该物种DNA含量。对56个待测样品中的物种成分进行定量测定以验证新建方法的准确性和精密度。结果：新建方法的LOQ低于0.51%;B ias为0.00%～20.79%,RSD为0.43%～19.64%。结论：新建方法的准确度和精密度均符合现行要求。
- 杨永存杨冬燕王学林杨小柯周向阳郭良让林健荣邓平建吴水清
- 关键词：实时荧光PCR
- 利用TaqMan定量PCR技术不依赖参比内源基因测定转基因植物外源基因拷贝数被引量：6
- 2008年
- 目的:建立一种利用TaqMan荧光PCR定量技术不依赖参比内源基因测定转基因植物外源基因拷贝数的分析方法。方法:以转基因大豆RRS和转基因玉米Bt176为材料,通过转基因植物外源基因与品系特异序列拷贝数的比较测定外源基因整合拷贝数。结果:3次测得的Bt176玉米中Cry1A(b)基因的整合拷贝数分别为2.69,3.43和2.83,平均为2.98,标准偏差(SD)为0.40,相对标准偏差(RSD)为13.28%,即Cry1A(b)基因在Bt176玉米中的整合拷贝数为3;3次测得的RRS大豆中EPSPS基因拷贝数分别为1.08,1.01,0.96,平均为1.01,SD为0.06,RSD为6.06%,即RRS大豆中EPSPS基因拷贝数的测定结果是单拷贝。结论:本研究建立的转基因植物外源基因拷贝数测定方法可准确测定转基因植物外源基因的拷贝数。与现有的通过外源基因与参比内源基因拷贝数比较测定转基因植物外源基因拷贝数的方法相比,不但避免了选择物种特异性的看家基因及测定看家基因拷贝数等大量工作,而且应用范围更广泛。
- 杨冬燕郭良让杨小柯杨永存陈宏敏邓平建
- 关键词：定量PCR外源基因拷贝数
- 不依赖内源基因的转基因成分实时荧光PCR定量分析模式的建立
- 自1994年世界第一例转基因番茄投放美国市场以来，经过短短的十几年，市场上大量涌现转基因食品(Genetically Modified Foods，GMF)。在食品转基因成分的标识管理和安全性评价中，不少国家和地区均规定...
- 郭良让
- 关键词：实时荧光PCR转基因成分
- 文献传递
- 转基因成分定量分析技术的研究进展被引量：5
- 2008年
- 杨小柯郭良让杨冬燕杨永存周向阳李永红邓平建
- 关键词：转基因成分
- 多物种复合样品中转基因DNA成分的定量分析
- 2009年
- 目的：在前期研究建立的不依赖参比内源基因定量单物种植物样品中转基因DNA的方法的基础上,定量测定多物种复合样品中转基因DNA的含量。方法：以转基因和非转基因大豆、玉米、大米按比例混合配制的多物种复合材料为研究对象,通过实时荧光PCR法测定样品DNA提取物中转基因DNA量,通过测定260 nm处的吸光值测定样品DNA提取物中总DNA量,以样品DNA提取物中各物种转基因DNA量与总DNA量之比表示多物种复合样品中各物种转基因DNA成分含量,并以各物种转基因DNA成分含量之和计算样品中转基因DNA的总含量。结果：7个大米与玉米两物种混合样品和7个大米、大豆与玉米三物种混合样品用于验证新建的定量体系的准确度和精密度。结果表明,两物种和三物种复合样品转基因成分总含量测定值与理论值的偏离度分别为2.22%-19.54%和5.24%-20.51%;其转基因成分总含量测定的变异系数分别为2.11%-13.43%和0.56%-10.74%。结论：新建的多物种复合样品中转基因DNA的含量测定方法满足转基因成分定量分析准确度和精密度要求。
- 杨冬燕侯红利杨永存周向阳杨小柯郭良让李永红林健荣邓平建
- 关键词：转基因实时荧光PCR
