蔡友庆
- 作品数：7 被引量：4H指数：2
- 供职机构：中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生化学工程更多>>
- Nurr1在多巴胺能细胞中的表达及其短发夹RNA表达载体的构建与鉴定
- 目的:检测小鼠核受体相关因子1(Nurrl)在多巴胺能细胞系中的表达,并构建其sbRNA的真核表达载体。方法:以RT-PCR和Western blot方法检测Nurrl在多巴胺能细胞株MN9D中的表达。选择两段RNA干扰...
- 吴云成蔡友庆刘文文赵永波
- 关键词：多巴胺能神经元RNA干扰短发夹RNA基因表达
- 文献传递
- 表氯醇活化交联琼脂糖Sepharose CL-6B的工艺研究
- 利用环氧氯丙烷(表氯醇)活化交联琼脂糖Sepharose CL-6B,分别在以水和二甲基亚砜(DMSO)的反应体系中考察环氧氯丙烷的浓度、pH值、活化时间、温度对活化的影响,研究表明在水溶液中,琼脂糖的活化度较低,而在D...
- 蔡友庆宋磊甘一如
- 关键词：交联琼脂糖活化基质表氯醇
- 文献传递
- 核受体相关因子1表达下调对多巴胺能细胞酪氨酸羟化酶和神经突起生长的影响被引量：2
- 2006年
- 将合成的核受体相关因子1(nuclear receptor-related factor 1,Nurrl)特异性短发夹寡核苷酸(small-hairpin RNA,shRNA)序列插入真核表达载体pSilenCircle(pSC),构建Nurrl基因特异性shRNA真核表达载体,转染体外培养多巴胺能神经前体细胞系MN9D,分别采用实时荧光定量PCR和Western blot方法检测其对MN9D细胞内源Nurrl的干扰作用及其对酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)表达的影响,并在倒置显微镜下观察MN9D细胞神经突起生长的情况,探讨Nurrl shRNA表达载体对多巴胺能细胞表型标记物TH和以神经突起延长为特征的细胞成熟的影响。结果表明,脂质体组细胞和转染阴性对照质粒的MN9D细胞内Nurrl、TH的表达正常,而转染Nurrl shRNA真核表达载体(pSC-N1和pSC-N2)的MN9D细胞内Nurrl和TH的mRNA水平明显降低,Nurrl mRNA的下降率分别为62．3%和45．65%,TH mRNA的下降率分别为76．3%和62．6%。同时Nurrl和TH蛋白的表达亦明显下调,Nurrl蛋白的下降率分别为57．4%和72．0%,TH蛋白的下降率分别为79．1%和70．1%。另外,转染Nurrl shRNA真核表达质粒的MN9D细胞神经突起延长有所减少,但是与正常细胞无明显差异。结果提示：Nurrl shRNA真核表达载体能显著下调MN9D细胞内源Nurrl和TH mRNA和蛋白的表达,同时可能对MN9D细胞的神经突起延长有一定的抑制作用。Nurrl shRNA表达载体的成功构建为多巴胺能神经元发育以及帕金森病相关基因的功能研究奠定了基础。
- 吴云成蔡友庆赵永波费俭
- 关键词：酪氨酸羟化酶RNA干扰帕金森病发育神经突起
- 核受体相关因子1 shRNA表达载体的构建及其对多巴胺能细胞内源基因的干扰作用
- 2006年
- 目的构建小鼠核受体相关因子1(Nurr1)shRNA的真核表达载体,并检测其对多巴胺能细胞内源基因的干扰作用。方法构建两个针对Nurr1的RNA干扰重组表达载体,分别命名为pSC-N1和pSC-N2。经测序确认后,转染多巴胺能神经前体细胞系MN9D细胞株,以实时荧光定量PCR以及Western blot方法检测转染后Nurr1 mBNA和蛋白的表达。结果测序鉴定证实合成的siRNA基因序列正确并已被准确克隆人pSilenCircle载体。pSC-N1和pSC-N2可特异性抑制MN9D细胞中Nurr1 mRNA的表达,下降率分别为62．3％和45．6％;Nurr1蛋白的表达亦明显下调,其下降率分别为57．4%和72．0％,而对照质粒对其无抑制作用。结论成功构建了能特异性抑制多巴胺能细胞内源Nurr1表达的shRNA表达载体,为多巴胺能神经元发育以及帕金森病相关基因的功能研究奠定了基础。
- 吴云成赵永波蔡友庆
- 关键词：DNA结合蛋白质类转录因子RNA干扰神经元帕金森病
- 核受体相关因子1表达下调对多巴胺能细胞酪氨酸羟化酶和神经突起生长的影响
- 将合成的核受体相关因子1(Nuclear receptor related factor 1,Nurr1)特异性短发夹寡核苷酸(shRNA)序列插入真核表达载体(pSilenCircle,pSC),构建出特异性Nurr1...
- 赵永波吴云成蔡友庆费俭
- 关键词：酪氨酸羟化酶RNA干扰帕金森病发育神经突起
- 文献传递
- 基因重组10BNP在大肠杆菌中的表达与纯化被引量：2
- 2002年
- 在摇瓶中对基因重组脑钠素 (BNP)在大肠杆菌中的表达进行了研究 ,确定诱导后最佳培养时间为 4h ,表达量达 2 1 8%。采用金属螯合亲和层析法对十聚体脑钠素进行了纯化 ,比较了咪唑洗脱法和降pH值洗脱法对目标蛋白的纯化效果 ,得到了一条纯化目标蛋白最佳亲和层析纯化路线 。
- 刘荣张瑛吴蕾蔡友庆
- 关键词：脑钠素重组大肠杆菌金属螯合亲和层析BNP纯化
- 亲和层析树脂Ni-NTAAgarose的制备及其对基因重组人脑钠素的纯化研究
- 该文利用N-ε-苄氧羰基-L-赖氨酸和溴乙酸成功的合成了新型的亲和配基-N-(5-胺基-1-羧戊基)亚胺二乙酸(NTA),通过将其偶联于表氯醇活化的SepharoseRCL-6B上制备出NTA型固定化金属离子亲和层析(I...
- 蔡友庆
- 关键词：固定化
- 文献传递
