田瑞阳
- 作品数：4 被引量：10H指数：2
- 供职机构：中国科学院上海生命科学研究院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- B淋巴细胞刺激因子C端肽及其突变体和受体的研究
- 第一章该文中涉及的部分质粒载体的构建为了在各种宿主细胞(大肠杆菌和多种哺乳动物细胞)中表达本文所研究的各种蛋白,对多种质粒载体进行了改造:第二章B淋巴细胞刺激因子C端肽的研究及抗血清制备用套式PCR从人胎脑cDNA文库中...
- 田瑞阳
- 关键词：BLYS复性抗血清复性受体
- 文献传递
- BLyS受体TACI、BCMA与人IgG1 Fc融合蛋白在哺乳动物细胞中的表达与鉴定被引量：8
- 2004年
- 从人肝脏和肾脏cDNA文库中扩增了人IgG1Fc与B淋巴细胞刺激因子 (BLyS)的受体TACI及BCMA的胞外编码区 ,构建了TACI Fc及BCMA Fc融合表达质粒pSec1 Fc TACI与 pSec1 Fc BCMA ,并使用电穿孔法转染COS 7细胞 ,从 1L无血清培养上清中可纯化得到分泌表达的TACI Fc与BCMA Fc融合蛋白约 2mg。为获得TACI Fc与BCMA Fc的稳定来源 ,构建了TACI Fc与BCMA Fc的CHO稳定表达细胞株。免疫沉淀和ELISA结果显示 ,TACI Fc及BCMA Fc能特异性地结合其配体BLyS而不与BLyS同家族的TNF结合。TACI Fc及BCMA
- 田瑞阳黄玉辉陈悦韩威俞缨刘惠翁忠辉杨胜利龚毅
- 关键词：融合蛋白哺乳动物细胞CDNA
- 抗人B-淋巴细胞刺激因子噬菌体单链抗体库的构建
- 2007年
- 目的构建抗人B-淋巴细胞刺激因子噬菌体单链抗体库。方法从B-淋巴细胞刺激因子免疫小鼠的脾细胞中抽提总RNA,经逆转录聚合酶反应合成cDNA,分别扩增小鼠重链可变区基因和轻链可变区基因。通过重叠延伸拼接法将重链可变区基因和轻链可变区基因组装成单链抗体基因,重组于载体pFUSE5,电转化E.coliXL 1-Blue。在辅助噬菌体援救下,构建成噬菌体单链抗体库。采用聚合酶链反应、核苷酸序列测定和酶联免疫分析鉴定单链抗体库的特征。结果本抗体库的噬菌体库容量约1×106,单链抗体基因插入效率为93%,存在序列差异性并含有抗B-淋巴细胞刺激因子单链抗体。结论成功地构建了抗人B-淋巴细胞刺激因子单链噬菌体抗体库,为筛选抗B-淋巴细胞刺激因子单链抗体药物奠定了良好的基础。
- 韩威田瑞阳刘惠姚新生杨胜利龚毅
- 关键词：单链抗体噬菌体展示技术聚合酶链反应
