王晓晶
- 作品数：6 被引量：11H指数：2
- 供职机构：赤峰市医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金转基因生物新品种培育专项国家基础科学人才培养基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 拉曼光谱在病毒检测中的应用及研究进展被引量：4
- 2021年
- 病毒可以导致人类患有传染性疾病,常规检测病毒的方法步骤繁琐、灵敏性较低、耗时耗材,迫切需要一种新型简便、快速、灵敏性较高的病毒检测方法。近年来,表面增强拉曼光谱技术(surface enhanced Raman spectroscopy,SERS)因其指纹图谱性、高分辨率、无损检测等独特优势,在生物医学领域展现出巨大的应用前景。其中,拉曼光谱在病原微生物快速鉴定及耐药性分析方面有望获得颠覆性的技术革新。本文聚焦于拉曼光谱在病毒检测中的研究进展,从应用拉曼光谱的技术方法入手,重点阐述了基于SERS的技术在寨卡和登革热病毒、流感病毒、M13噬菌体、人类免疫缺陷病毒、禽流感病毒、呼吸道合胞病毒及慢性乙型肝炎病毒等具体实例的应用,并展望了SERS技术在临床检验中的应用前景。本文通过综述SERS检测技术在不同病毒中的应用研究,有望为临床科研工作者研发新型快速、简便、灵敏的病毒检测方法提供新思路,为临床实验室病毒早期检测提供一种新的技术手段。
- 王晓晶张辉李连友府伟灵张阳
- 关键词：拉曼光谱病毒检测
- 羟基脲联合沙利度胺治疗JAK2V617F阳性骨髓增殖性肿瘤的临床疗效及安全性评价
- 2024年
- 目的研究羟基脲联合沙利度胺治疗JAK2V617F阳性骨髓增殖性肿瘤(MPN)的临床疗效及安全性评价。方法采用前瞻性分析方法,选取2020年1月—2023年1月在我院门诊或住院接受荧光定量PCR检测确定为JAK2V617F阳性MPN的患者80例为研究对象,根据治疗方案分为观察组(40例)与对照组(40例)。对照组采用沙利度胺治疗,观察组患者采用羟基脲联合沙利度胺治疗。统计并比较两组患者治疗前及治疗后6、12个月的临床疗效,JAK2V617F突变负荷,血小板(PLT)、白细胞(WBC)、血红蛋白(HGB)、红细胞比容(HCT)水平,骨髓纤维化程度,骨髓形态学及用药安全性。结果治疗后,观察组总有效率显著高于对照组(P<0.05);治疗后6、12个月,两组患者JAK2V617F突变负荷,PLT、HGB水平,MPN-10评分,MF分级均显著低于治疗前,且观察组均显著低于对照组(P<0.05);而WBC、HCT水平无明显变化(P>0.05);观察组患者骨髓细胞异常增生发生率明显低于对照组(P<0.05);两组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论羟基脲联合沙利度胺治疗JAK2V617F阳性MPN患者具有显著效果,可有效改善临床症状,降低JAK2V617F阳性突变负荷,逆转骨髓纤维化水平。
- 宋腾飞王晓晶马丽丽
- 关键词：骨髓增殖性肿瘤羟基脲沙利度胺
- 内蒙古白绒山羊erk2基因的克隆及表达模式分析
- 2013年
- 旨在克隆内蒙古白绒山羊erk2基因cDNA并分析其基本表达模式。采用RT-PCR方法克隆白绒山羊erk2基因cDNA。通过在线软件Blast进行核酸序列分析,用SMART与Psite进行氨基酸序列分析。定量RT-PCR检测erk2基因在绒山羊组织中的表达特异性。免疫组化法检测绒山羊睾丸中erk2表达。克隆到的内蒙古白绒山羊erk2基因cDNA片段(GenBank Accession No.JX569765)长1 083 bp,包含了编码360个氨基酸残基的全长ORF,氨基酸序列与牛的ERK2(Bos Taurus BC133588.1)同源性为100%。SMART分析表明,ORF编码的蛋白包含了活化位点"TEY"及具有丝氨酸/苏氨酸激酶催化活性的S-TKc结构域。Psite分析表明,含2个N-糖基化位点、1个依赖于cAMP/cGMP的蛋白激酶磷酸化位点、3个蛋白激酶c磷酸化位点、5个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点、2个N-豆蔻酰化位点、2个异戊二烯基结合区(CAAX box)、7个微体羧基端靶向信号、2个蛋白激酶ATP结合区标记及一个丝/苏氨酸蛋白激酶活性区域标记。PSORT(k-NN prediction)程序预测其定位于细胞质中。定量RT-PCR分析显示erk2基因mRNA丰度在心脏、皮肤以及乳腺组织中mRNA丰度较高,脾、肾中的表达相对较低。在睾丸中检测到ERK2蛋白表达。
- 王彦凤吴曼琳王晓晶王婧李洋连梦瑶王志钢
- 关键词：ERK2基因克隆
- 克隆内蒙古白绒山羊胸腺素β4基因并稳定转染胎儿成纤维细胞被引量：6
- 2010年
- 【目的】克隆内蒙古白绒山羊胸腺素β4(thymosinbeta4,Tβ4)基因,构建皮肤特异性表达载体,转染内蒙古白绒山羊胎儿成纤维细胞,筛选出稳定表达红色荧光蛋白并可用于核移植的转基因细胞克隆。【方法】通过RT-PCR克隆Tβ4基因cDNA序列,然后与KAP6-1基因启动子片段以及红色荧光蛋白表达元件连接构成Tβ皮肤特异性表达载体pCDsRed-KT。外源表达载体以lipofectamineTM2000介导转染胎儿成纤维细胞,通过G418筛选获得稳定转染的细胞克隆。PCR鉴定外源基因在细胞基因组中的整合。【结果】克隆了内蒙古白绒山羊Tβ4基因,cDNA全长142bp,其中包含135bp的完整ORF,编码44个氨基酸残基,氨基酸序列与已报道的牛胸腺素β4(NM_001002885)同源性为100%。测序显示构建的表达载体pCDsRed-KT中,Tβ4基因正确连接在皮肤特异性启动子KAP6-1下游,顺序连接CMV启动子和红色荧光蛋白基因,载体构建正确。PCR检测显示外源KAP6-1启动子和Tβ4基因整合到细胞基因组中,筛选出的转基因细胞高效表达红色荧光蛋白。【结论】克隆得到内蒙古白绒山羊Tβ4基因并构建成功其真核表达载体,可稳定转染绒山羊胎儿成纤维细胞,为下一步通过核移植方法获得转胸腺素β4基因绒山羊提供了条件。
- 王彦凤梁燕金永王晓晶郭旭东王玮王潇王志钢刘东军
- 关键词：胸腺素Β4稳定转染
- 共转染Krox20和IGFBP5基因绒山羊胎儿成纤维细胞克隆的筛选
- IGFBPS基因被认为是第一个区分不同毛囊类型的标记基因，它在毛囊中的表达可引起毛发的弯曲与细化。本研究旨在筛选得到IGFBPS和Krox20两个基因共转染的绒山羊胎儿成纤维细胞克隆，以探索IGFBPS与Krox20在绒...
- 梁燕王晓晶王彦凤王潇郭旭东王志钢刘东军
- 关键词：转基因克隆绒山羊胎儿成纤维细胞
- 文献传递
- 表达红色荧光及转胸腺素β4基因绵羊胎儿成纤维细胞系的制备被引量：1
- 2010年
- 旨在构建胸腺素β4(thymosin beta4,Tβ4)基因真核表达载体并转染绵羊胎儿成纤维细胞,获得稳定表达胸腺素β4及红色荧光蛋白的转基因细胞克隆。将克隆载体pMD19TT中的胸腺素β4基因亚克隆到表达载体pIRES2-DsRed2的多克隆位点,构建表达载体pIRES2-DsRed2-Tβ4,脂质体介导转染绵羊胎儿成纤维细胞,G418筛选获得稳定转染的细胞克隆。RT-PCR检测Tβ4基因在宿主细胞中的转录。测序结果显示,构建的表达载体pIRES2-DsRed2-Tβ4序列中,Tβ4基因正确连接在CMV启动子下游,顺序连接IRES2序列和红色荧光蛋白基因,载体构建正确。脂质体介导的稳定转染效率约为15%,经G418筛选得到转基因细胞克隆并高效表达红色荧光蛋白。RT-PCR检测显示外源Tβ4基因在绵羊胎儿成纤维细胞中得到转录。成功构建具有红色荧光蛋白和新霉素抗性双选择标记的胸腺素β4基因真核表达载体并稳定转染绵羊胎儿成纤维细胞,筛选得到的超表达胸腺素β4绵羊胎儿成纤维细胞系为下一步通过核移植和克隆技术获得转基因绵羊提供了条件。
- 王彦凤梁燕王玮史偈君金永王晓晶郭旭东王潇王志钢刘东军
- 关键词：胸腺素Β4
