王明丽 作品数:313 被引量:937 H指数:13 供职机构: 安徽医科大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 教育部科学技术研究重点项目 安徽省高校省级自然科学研究项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 生物学 文化科学 更多>>
腰痛康复评估与临床应用 吴建贤 王斌 洪永锋 黄俊 赵敬璞 汪国宏 汪敏 王明丽 研究发展现状:腰痛是临床常见多发病,有60%-80%的成年人有过腰痛经历,是45岁以下人群最常见致残原因。占用了大量的医疗和社会资源,该项目从生物-心理-社会医学角度对腰痛开展系统评估研究。腰痛的病因复杂,美英政府相继颁...关键词:关键词:康复治疗方法 人巨细胞病毒感染胎鼠大脑皮质神经元显微和超微结构观察 被引量:1 2001年 目的 :研究人巨细胞病毒 (HCMV)经小鼠胎盘垂直传播致胎鼠大脑皮质神经元病理改变的显微和超微结构特征。方法 :在 8~ 12周龄Balb/c雌雄小鼠腹腔内接种HCMV后 ,交配 ,待孕鼠临产时剖腹取出 10份胎鼠双侧大脑皮质 ,用光镜和透射电射观察了神经元的显微和超微结构 ,同时进行了病毒分离。结果 :光镜下可见胎鼠脑微血管扩张充血 ,神经元数目明显减少 ,残存的神经元缺血性改变 ,间质水肿 ;可见到软化灶及受染神经元核内及胞质内HCMV特征性嗜碱性和嗜酸性包涵体 ,电镜下可见受染神经元核仁消失 ,胞质内线粒体、内质网和高尔基复合体等重要细胞器结构严重破坏呈空泡状或溶解 ;并找到人类疱疹病毒样颗粒。病毒分离阳性。在同时设置的正常对照组则无上述阳性发现。结论 :HCMV能通过小鼠胎盘感染子代胎鼠大脑皮质神经元 。 胡闻 王明丽 陈柯 唐久来关键词:人巨细胞病毒 先天性感染 大脑皮质 超微结构 宫内感染 去N端信号肽的水痘-带状疱疹病毒糖蛋白E的原核可溶性表达及其免疫原性评价 2020年 水痘-带状疱疹病毒(varicella zoster virus,VZV)糖蛋白E(glycoprotein E,gE)是VZV亚单位疫苗的主要候选蛋白,但目前原核表达系统制备的gE蛋白以包涵体形式为主,可溶性差。本研究采用去除第1~30氨基酸序列的VZV gE胞外域基因,将其与原核表达载体pET32a连接,并转化至感受态细胞BL21(DE3)中。使用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(Isopropylβ-D-thiogalactoside,IPTG)诱导表达,His-tag柱纯化重组gE蛋白,蛋白质印迹法(Western blot,WB)检测其特异性。用该重组gE蛋白免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体,酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)和间接免疫荧光法检测多克隆抗体效价及特异性。结果显示,BL21/pET32a-VZV gE工程菌可以表达可溶性重组gE蛋白,纯化后纯度约为90%。WB鉴定该重组蛋白具有良好的免疫反应性。ELISA检测显示小鼠抗VZV gE多克隆抗体效价>1∶10000,间接免疫荧光实验结果显示该抗体特异性较高。结果表明,本研究在原核表达系统中成功表达可溶性重组VZV gE蛋白,同时该蛋白具有较强的免疫原性,这为VZV gE亚单位疫苗的研制和大规模生产奠定了基础。 魏明童 夏兵兵 何志远 周炜 刘兴东 赵俊 赵俊 陈敬贤关键词:水痘-带状疱疹病毒 糖蛋白E 泼尼松、苯那普利对阿霉素肾病大鼠podocin mRNA和蛋白表达的影响 被引量:2 2005年 目的:观察阿霉素肾病大鼠肾小球上皮细胞足突蛋白podocinmRNA和蛋白的表达及泼尼松、苯那普利对此表达的影响,探讨podocin分子在蛋白尿发生中的可能作用。方法:SD雄性大鼠,随机分4组进行观察:正常对照组、肾病对照组、肾病泼尼松治疗组、肾病苯那普利治疗组。肾病泼尼松治疗组与肾病苯那普利治疗组每日分别予泼尼松10mg/kg、苯那普利3mg/kg灌胃,共4周;实验4周时留24h尿蛋白定量及血生化,取肾脏皮质抽提总RNA和总蛋白,分别应用半定量RT-PCR和Westernblot测定podocinmRNA和蛋白质的表达。结果:正常对照组大鼠podocin蛋白表达的相对量是5.26±1.19,而肾病对照组大鼠podocin蛋白基本不表达,泼尼松、苯那普利可增加podocin蛋白的表达;正常对照组、肾病对照组、肾病泼尼松治疗组、肾病苯那普利治疗组podocin分子mRNA的相对值分别为0.99±0.21、1.96±0.98、1.31±0.24、2.46±1.49,肾病对照组大鼠podocinmRNA的表达与正常对照组相比显著上调(P<0.05)。结论:podocin蛋白表达的减少可能是阿霉素肾病大鼠蛋白尿产生的重要因素之一;临床应用肾上腺糖皮质激素和苯那普利治疗肾病综合征可能是通过改变肾小球滤过膜分子结构而产生疗效。 邓芳 鹿玲 王明丽 胡旭 李艳秋关键词:苯那普利 肾病 泼尼松 总RNA 蛋白 恶性胸水肿瘤细胞的分离、纯化及其临床意义 被引量:2 2002年 目的 探讨恶性胸水肿瘤细胞的分离、纯化方法学以及临床意义。方法 在 2 0份胸水标本中 ,同一份标本分别按离心沉渣法、密度梯度离心法和不连续密度梯度离心法 3种方法分为 3组检测 :细胞病理学 (Ⅰ组 )、单个核细胞 (Ⅱ组 )、肿瘤细胞 (Ⅲ组 )。分别计算各组阳性率 ,各组间率的比较行配对资料 χ2 检验。结果 Ⅰ组 :肿瘤细胞阳性率为45 %(9/ 2 0 ) ;Ⅱ组 :肿瘤细胞阳性率为 6 5 %(13/ 2 0 ) ;Ⅲ组 :肿瘤细胞阳性率为 2 0 %(4 / 2 0 )。Ⅰ组与Ⅱ组、Ⅰ组与Ⅲ组组间比较差异均无显著性 (P >0 0 5 ) ,Ⅱ组与Ⅲ组比较差异有显著性 (P <0 0 1)。结论 采用密度梯度离心法和不连续密度梯度离心法可以从恶性胸水中分离出肿瘤细胞 ,并有助于鉴别恶性胸水中肿瘤细胞的细胞分化和细胞起源。 马吉勇 庞玉瑛 王明丽 朱钟鸣关键词:恶性胸水 肿瘤细胞 纯化 人巨细胞病毒感染Balb/c小鼠椎间盘的相关检测 被引量:1 2008年 目的建立人巨细胞病毒(HCMV)感染Ba1b/c小鼠模型,探索HCMV感染椎间盘的依据。方法取不同剂量组HCMVAD169株腹腔注射6~8周SPF级Ba1b/c小鼠辛5各6只,同时设立灭活病毒对照组6只和细胞对照组6只。取各组小鼠椎间盘组织进行病毒分离与鉴定;采用PCR和RT-PCR分别检测HCMV UL83基因和UL54基因及其相应基因的转录;取椎间盘组织行HE染色病理并观察。结果2×10^6和2×10^5 PFU/ml病毒组♀小鼠病毒分离、PCR及RT-PCR均为阳性;HE染色可见椎间盘组织局部灶性淋巴细胞浸润等慢性炎症反应,纤维环板层结构紊乱,关节软骨钙化层增厚,大量黏液及泡沫细胞,软骨下血管明显减少。♀小鼠、其它剂量病毒组、灭活病毒组和HF对照组均为阴性。结论HCMV可以感染小鼠椎间盘组织,并与感染病毒剂量有关;人巨细胞病毒感染与椎间盘变性有相关性,可能是椎间盘退变的一个重要危险因素。 汪国宏 吴建贤 黄金华 王斌 胡勇 黄维 刘倩 张俊岭 王明丽关键词:巨细胞病毒感染 小鼠 椎间盘 MCMV感染同种异型皮肤移植小鼠间质性肺炎模型的建立 被引量:1 2011年 目的建立小鼠巨细胞病毒(MCMV)经鼻腔急性感染同种异型皮肤移植BALB/c小鼠间质性肺炎模型。方法①25只供体C57BL/6雌鼠与100只受体BALB/c雌鼠背部皮肤移植后,每只小鼠腹腔注射环孢素A(CsA,12 mg/kg),连续14 d。②移植受体小鼠随机分为5组,其中4组每只鼻腔接种30μl不同剂量MCMV悬液(102、103、104、105PFU/只),另一组为正常对照组,小鼠鼻腔接种原代小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)悬液30μl/只。在接种后第5、9、14、21天处死小鼠,无菌取肺组织分别做HE染色、透射电镜、PCR、RT-PCR检测MCMV Smith毒株的即刻早期(IE)和晚期基因糖蛋白B(gB)基因转录产物,并进行原位杂交和免疫组织化学实验。结果 104、105 PFU实验组小鼠肺组织有局灶性的病理损害,并发现感染后第14天肺组织病理改变最明显;透射电镜检测到疱疹样病毒颗粒;PCR、RT-PCR检测实验组MCMV IE和gB基因及其转录产物均为阳性;两组原位杂交和免疫组织化学检测均可见肺间质上皮细胞中存在病毒核酸和蛋白;并在感染后的21 d内,105 PFU组小鼠相比对照组有明显的临床表现。结论成功建立同种异型皮肤移植后MCMV急性感染所致的小鼠间质性肺炎模型。 倪德群 赵纪强 张玮 甘霖 陈敬贤 王明丽关键词:疾病模型 动物 水痘-带状疱疹病毒糖蛋白E胞外域基因的真核细胞稳定表达及其免疫反应性的初步研究 被引量:5 2015年 目的真核细胞稳定表达水痘-带状疱疹病毒(VZV)糖蛋白E(g E)的胞外域基因,应用g E抗原建立VZV感染的血清学试验来评价VZV疫苗的免疫效果。方法构建含有VZV g E胞外域基因的真核表达质粒p CDNA3.1-g E,测序后脂质体转染COS-7细胞,经G418筛选出稳定表达VZV g E的细胞株。采用RT-PCR法检测VZV g E的mRNA,Western blot和间接免疫荧光法检测g E的免疫反应性,表达产物经Ni2+-NTA柱纯化后包被ELISA板,对127份0~10岁正常儿童血清中VZV-Ig G抗体水平进行检测。结果成功筛选出能够稳定表达VZV g E胞外域基因的COS-7细胞株,RT-PCR检测到g E的mRNA,经Western blot和间接免疫荧光鉴定,g E具有明显的免疫反应性,COS-7细胞株和其培养上清液中均有g E融合蛋白,表达量约为0.632 mg/ml,纯度约为90%。ELISA实验检测了127份0~10岁儿童血清中VZV-Ig G抗体,总阳性率为81.89%,特异度和灵敏度分别为93.75%和88.24%。结论本实验获得稳定高效表达VZV g E胞外域基因的COS-7细胞株,建立的ELISA血清学检测方法有助于VZV感染的流行病学研究和对易感人群VZV感染的诊断和预防。 伊兴旭 陈敬贤 甘霖 王明丽关键词:水痘-带状疱疹病毒 糖蛋白E 血清学试验 HCMV先天性潜伏感染Balb/c老年小鼠的细胞免疫状态的研究 目的;探讨HCMV先天性潜伏感染老年Balb/c老年小鼠细胞免疫功能改变与HCMV致病机制的相关性。方法:随机选取HCMV先天性潜伏感染组(A组)、HCMV先天性潜伏感染再激活组(B组)及HF细胞对照组(C组)18-20... 胡雪影 王明丽文献传递 慢性疲劳综合征的临床特征与研究进展 被引量:26 2004年 目的:慢性疲劳综合征(chronicfatiguesyndrome,CFS)是一组以疲劳为主的综合症候群,大多数给不出确切的病理解剖学诊断。研究CFS以利于临床医生对本疾病足够重视,以便正确诊断,早期干预,促进CFS患者早日康复。资料来源:以“慢性疲劳综合征”为主题词全面检索美国国家图书馆医学在线(Medline)数据库和万方数据库,获取CFS的全部资料和信息。资料选择:对获取的资料以“intitle”、“2000/2004”加以限制,筛选出近5年的主题文献,并对重点文献的主要参考文献进行手工检索追踪相关全文。文献包括基础研究和临床研究。资料提炼:37篇关于CFS的文献,29篇符合标准,排除的8篇文献是重复的同一研究,对剩余的29篇关于CFS主题文献全文中的相关信息进行分类综合研究。资料综合:CFS主要表现为持续或反复发作的疲劳和躯体疼痛、失眠、情绪抑郁和免疫功能异常。临床检查多无明显器质性改变。就其病因主要有两种学说:生物感染和由感染直接介导的免疫功能失调,另外,可能与神经内分泌紊乱、营养物缺乏、过度劳累、心理等因素相关。CFS与纤维肌痛综合征、肌纤维疼痛综合征、抑郁症等部分交叉和重叠。CFS的治疗方法很多,如药物治疗、营养支持、行为认知疗法和有氧运动疗法等,但都是非特异性的。结论:研究表明应该针对不同的患病? 王斌 洪永峰 吴建贤 王明丽关键词:疲劳综合征 慢性 治疗学