涂静 作品数:4 被引量:10 H指数:2 供职机构: 重庆医科大学附属第二医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 中俄政府间科技合作项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
信号传导及转录活化因子STAT与呼吸系统疾病 被引量:3 2006年 信号传导及转录活化因子是一类存在于胞浆中,可被细胞外多肽类分子激活,参与基因转录调控的蛋白质家族,其不仅参与正常生理过程,还参与免疫、炎症和肿瘤性疾病的调控。STAT蛋白的抑制为呼吸系统疾病的治疗提供了新思路。 涂静 周向东关键词:STAT 信号传导 呼吸系疾病 转录活化因子 高渗诱导人气道上皮细胞系黏液高分泌 被引量:5 2011年 目的研究高渗条件对正常人气道上皮细胞(HBE)黏蛋白(MUC)5AC分泌的影响,以及蛋白激酶C(PKC)-热休克蛋白(HSP)70信号途径在其中的可能作用。方法 采用高渗盐水诱导培养HBE16细胞的方法复制黏液高分泌体外模型,分别用PKCμ抑制剂G 6976、PKCα抑制剂Safingol、PKCβ抑制剂LY333531和PKCδ抑制剂Rot-tlerin干预HBE16细胞。Western blot检测HSP70-2的蛋白含量;RT-PCR检测人HSP70-2转录水平;ELISA检测培养上清MUC5AC蛋白含量c各高渗组的培养上清MUC5AC蛋白含量、HSP70-2蛋白和转录水平较对照组显著升高,并随着培养时间的延长而逐渐增加(P<0.05)。G 6976处理组的上述指标显著降低(P<0.01),但仍高于对照组(P<0.05);而Safingol、LY333531和Rottlerin处理组均无改变。结论 高渗盐水可诱导人气道上皮细胞MUC5AC的高分泌,HSP70-2系通过PKC中的μ亚型在该过程中起重要作用的。 涂静 尤列.皮尔曼 维克多.科罗索夫 周向东关键词:热休克蛋白70 黏蛋白 渗透压 蛋白激酶C 渗透压反应增强子结合蛋白对高渗下人气道上皮细胞黏液分泌的影响 被引量:2 2011年 目的探讨高渗刺激下渗透压反应增强子结合蛋白(OREBP)对热休克蛋白(HSP)70的转录调控及对黏液分泌的影响。方法采用体外培养的人气道上皮细胞HBE16为实验对象,分时程施加高渗条件,Western印迹检测OREBP和HSP70—2蛋白水平,ELISA检测培养上清黏蛋白(MUC)5AC分泌;进一步构建系列截短和定点突变的HSP70-2启动子荧光素酶报告基因质粒,将其与OREBP的小片段干扰RNA(siRNA)共转染HBE16细胞,求证渗透压反应增强子(ORE)在HSP70-2基因启动子上游的结合位点及对MUC5AC分泌的影响。结果600mOsm/L高渗盐水培养HBE16细胞3h后,OREBP、HSP70-2和培养上清MUC5AC蛋白相对含量分别为(0.54±0.07,0.20±0.08,0.17±0.04),与对照组(0.21±0.05,0.15±0.06,0.13±0.04)相比显著增加到2.57、1.33和1.31倍(均P〈0.05),且随高渗培养时间延长而增加,6h时分别增加到2.81、3.07、3.77倍(均P〈0.01),9h时分别增加到3.57、5.13、4.00倍(均P〈0.01),12h时分别增加到4.24、5.33、4.54倍(均P〈0.01);siRNA抑制OREBP表达48h后,高渗刺激下的OREBP、HSP704和上清MUC5AC蛋白相对含量为(0.36±0.08,0.33±0.08,0.24±0.05),和对照组(0.95±0.27,0.75±0.22,0.58±0.22)相比显著减少(蛋白抑制率分别为62%、56%和59%)(P〈0.05,P〈0.01,P〈0.05);荧光素酶测定表明HSP70—2启动子上游-353至-66区域存在一个关键的ORE位点;定点突变失活-93区域的ORE位点可引起高渗诱导条件下HSP70-2启动子的活性显著降低(P〈0.01)。结论高渗盐水诱导OREBP通过与HSP704启动子上-93位ORE结合而激活HSP70—2转录并促进HBE16细胞MUC5AC高分泌。 涂静 尤列·皮尔曼 维克多·科罗索夫 周向东关键词:渗透压 载体蛋白质类 黏蛋白类 MARCKS及其对气道黏蛋白胞吐作用的调节 被引量:2 2009年 黏液高分泌是慢性气道炎症性疾病的重要病理特征。豆蔻酰化富丙氨酸C激酶底物蛋白(myristoy-lated alanine-rich C kinase substrate,MARCKS)是黏液分泌过程中的关键蛋白。蛋白激酶C或其他激酶、细胞内钙离子浓度、钙调蛋白、纤维型-肌动蛋白、磷脂酰肌醇4,5二磷酸、热休克蛋白70等均可通过MARCKS的桥梁作用,介导气道分泌颗粒的胞内运动和黏蛋白的出胞释放。 涂静 周向东关键词:黏蛋白 信号转导 气道炎症