沈惠玲
- 作品数：6 被引量：31H指数：3
- 供职机构：江苏大学附属人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省科技计划项目国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 汉防己甲素联合屈洛昔芬对K562和K562／A02细胞NF-κB蛋白表达的影响被引量：1
- 2008年
- 目的研究汉防己甲素（Tet）和屈洛昔芬（DRL）单独及联合用药后对K562细胞及其耐药细胞株K562／A02的核因子κB（NF-κB）表达的影响，以进一步探讨其逆转多药耐药的作用机制。方法采用免疫细胞化学及Western blotting法分别检测Tet（1μmol／L）、DRL（5μmol／L）单独及联合作用于K562和K562／A02细胞后NF-κB核转位水平和胞核NF-κB蛋白表达水平的变化。结果①K562／A02细胞NF-κB核转位水平[（65．0±4．2）％]及胞核NF-κB蛋白表达（3．545±0．219）明显高于K562细胞[（39．6±0．9）％和2．366±0．141]（P〈0．01）；②Tet、DRL单独及联合作用6、12h，对K562细胞NF-κB核转位水平及胞核NF-κB蛋白表达水平无明显影响（P〉0．05）；③两药单独及联合作用6、12h，可明显降低K562／A02细胞NF-κB蛋白核转位水平和胞核NF-κB蛋白表达水平（P〈0．05和P〈0．01），两药联合作用增强（P〈0．05），作用12h较作用6h效果更显著（P〈0．05）。结论K562／A02细胞的胞核NF-κB蛋白表达水平明显高于K562细胞，NF-κB的活化可能参与了K562／A02细胞耐药的发生；抑制NF—κB活化可能参与了Tet和DRL逆转K562／A02细胞多药耐药过程。
- 苏爱玲陈宝安黄成垠高峰程坚许文林沈惠玲孙新臣成红艳丁家华高冲孙耘玉王骏赵刚陈宁娜赵慧慧
- 关键词：多药汉防己甲素屈洛昔芬核因子NF-ΚB
- 汉防己甲素对K562/A02细胞株SORCIN基因表达的影响被引量：7
- 2008年
- 本研究旨在探讨汉防己甲素(Tet)在逆转K562/A02细胞耐药与耐药相关的可溶性钙结合蛋白(SORCIN)基因表达之间的关系,为Tet的临床应用提供新的理论基础。通过MTT法筛选出所需浓度Tet,与K562/A02细胞株孵育培养48小时后,通过MTT检测Tet对柔红霉素(DNR)细胞毒性的影响,用RT-PCR方法检测SORCIN基因表达的变化,用Western blot方法检测sorcin表达蛋白的变化。结果表明:在所选浓度范围内,Tet可以增强DNR对K562/A02的细胞毒作用,(Tet浓度为0,0.5,1.0,2.0mg/L时DNR和Tet的IC50分别为11.3±0.17,5.15±0.10,3.91±0.06,2.52±0.04mg/L,p<0.01);K562/A02细胞中SORCIN基因高表达,且随着Tet浓度的增加SORCIN的表达先增强后减弱(Tet浓度为0.5mg/L时增强,1.0和2.0mg/L时减弱,p<0.05);K652细胞中sorcin蛋白低表达,K562/A02细胞中sorcin蛋白高表达,且随着Tet浓度的增加先增强后减弱(Tet浓度为0.5mg/L时增强、1.0和2.0mg/L时减弱,p<0.05)。结论:MTT检测显示Tet对K562/A02耐药逆转呈浓度依赖性,Tet可能通过调整SORCIN基因及蛋白的表达参与逆转K562/A02的耐药性,但并不与其耐药逆转作用完全相关。
- 李静陈宝安朱敏生高峰丁家华高冲孙耘玉程坚王骏赵刚宋慧慧马燕鲍文孙新臣成红艳许文林沈惠玲
- 关键词：多药耐药汉防己甲素K562/A02细胞株
- 环孢菌素A、汉防己甲素及两者联合逆转K562/A02细胞的多药耐药被引量：1
- 2008年
- 目的:探讨环孢菌素A(CsA)、汉防己甲素(Tet)及两者联合应用对人白血病耐药细胞系K562/A02多药耐药的逆转作用。方法:采用MTT法测定柔红霉素(DNR)对细胞的半数抑制量(IC50),流式细胞仪检测细胞凋亡率和细胞内DNR浓度。结果:DNR对K562细胞和K562/A02细胞IC50分别为0.27和21.22 mg.L-1;CsA(1 mg.L-1)及Tet(0.1 mg.L-1)单独和联合处理K562/A02后,DNR的IC50分别为7.83、5.32和2.32 mg.L-1;CsA和Tet对DNR作用K562的IC50无明显影响;K562/A02细胞48 h凋亡率为2.19%,DNR(1 mg.L-1)作用K562/A02细胞凋亡率为2.70%,CsA和Tet单独及联合处理后凋亡率分别为10.27%、17.64%和52.79%;两药处理后细胞内化疗药物DNR浓度亦明显增加。结论:CsA及Tet均可逆转耐药,且联合作用逆转效果更强。
- 郭晶晶陈宝安高峰丁家华许文林沈惠玲孙新臣成红艳高冲孙耘玉程坚王骏赵刚宋慧慧
- 关键词：环孢菌素A汉防己甲素K562/A02细胞多药耐药
- 5溴汉防己甲素逆转多药耐药的体内体外研究(英文)被引量：2
- 2009年
- 本研究旨在探讨5-溴汉防己甲素(BrTet)和汉防己甲素(Tet)对K562/A02细胞多药耐药性的逆转作用。采用MTT法检测阿霉素(ADM)联合应用BrTet、Tet,对K562/A02细胞和K562细胞增殖的影响;采用流式细胞术(FCM)检测细胞内ADM浓度和P糖蛋白(P-gp)的表达;采用RT-PCR测定细胞mdr1基因mRNA表达水平。建立裸鼠皮下移植瘤模型,比较BrTet、Tet在体内的逆转耐药作用。结果发现,BrTet在0.25、0.5以及1μmol/L浓度条件下对K562/A02细胞多药耐药性的逆转作用呈剂量依赖性。流式细胞术检测提示,BrTet显著增加K562/A02细胞内ADM浓度,并呈剂量依赖性,同时抑制P-gp的表达,下调mdr1mRNA的表达。在荷瘤鼠模型中,BrTet明显增加ADM对K562/A02移植瘤的抗肿瘤作用,从单用ADM的5.8%上升至26.1%,而在K562移植瘤中没有显著差异。结论:BrTet在体内体外试验中均显示出显著的逆转MDR作用,其活性可能与抑制P-gp的过度表达和增加抗肿瘤药物的积聚有关。
- 程坚王珏琼陈宝安高峰许文林沈惠玲丁家华高冲孙耘玉王骏赵刚宋慧慧鲍文孙茜戴永援孙新臣成红艳邓雨霞李国宏陈宁娜刘莉洁王雪梅
- 关键词：多药耐药汉防己甲素阿霉素K562/A02细胞
- 环孢菌素A、雷洛昔芬及其联合应用逆转K562/A02细胞多药耐药的研究被引量：12
- 2006年
- 本研究探讨环孢菌素A(CsA)、雌激素受体抑制剂雷洛昔芬及其联合应用对K562/A02细胞多药耐药的逆转作用。采用甲基四唑蓝法(MTT)测定柔红霉素(DNR)的半数抑制量,RT-PCR法检测mdr1基因mRNA表达水平,FCM检测P-gp的表达和细胞内DNR浓度。结果表明:DNR对K562/A02和K562细胞的IC50分别为23.51和0.29mg/L,雷洛昔芬(2.5mg/L)及CsA(1mg/L)单用和两药联合处理K562/A02细胞时,DNR的IC50值分别为5.98、8.15和3.68mg/L,两药对DNR作用K562细胞的IC50没有影响。CsA及雷洛昔芬单独作用后耐药株mdr1mRNA下调微弱,联合用药下调效果明显。CsA及雷洛昔芬均可降低P-gp蛋白的表达,且具有协同作用。同时还观察到逆转剂雷洛昔芬和CsA作用后细胞内柔红霉素浓度增加,两药联合作用时效果增强。结论:CsA及雷洛昔芬均可逆转耐药,且联合作用效果增强。
- 鲍文陈宝安高峰丁家华许文林沈惠玲高冲孙耘玉程坚王骏赵刚马燕
- 关键词：环孢菌素A雷洛昔芬K562/A02细胞多药耐药
- 环孢菌素A联合汉防己甲素逆转人白血病耐药细胞株K562/A02细胞多药耐药的分子生物学机制被引量：10
- 2008年
- 目的多药耐药(multidrug resistance,MDR)是导致肿瘤化疗失败的主要原因,本研究探讨环孢菌素A(cyclosporine A,CsA)及汉防己甲素(tetrandrine,Tet)联合应用对人白血病耐药细胞株K562/A02细胞MDR的逆转作用及其分子生物学机制。方法K562/A02细胞经CsA和Tet作用后,以流式细胞仪(FCM)检测细胞内柔红霉素(daunorubicin,DNR)浓度和P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)的表达,逆转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)检测多药耐药基因(multidrug resistancegene,mdr1)mRNA表达水平。结果K562/A02细胞内DNR浓度为K562的19%,CsA(1mg/L)及Tet(0.1mg/L)单独及联合作用K562/A02细胞48h后细胞内DNR的浓度分别为K562的60%、65%、98%。K562和K562/A02细胞P-gp荧光强度分别为0.18%和96.51%,K562/A02细胞经CsA(1mg/L)和Tet(0.1mg/L)单独及联合处理后细胞P-gp荧光强度分别为75.32%,76.86%和48.61%。K562/A02细胞经过两药单独作用后耐药株mdr1-mRNA下调微弱,联合用药下调效果明显。结论环孢菌素A和汉防己甲素均可逆转白血病细胞的耐药,且两药联合作用逆转效果增强,具有协同作用。
- 陈宝安郭晶晶程坚高峰丁家华许文林沈惠玲孙新臣成红艳高冲孙耘玉王骏赵刚宋慧慧鲍文李国宏刘莉洁陈文姬王雪梅
- 关键词：环孢菌素A汉防己甲素K562/A02细胞多药耐药
