江凌
- 作品数：34 被引量：79H指数：6
- 供职机构：福建医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：福建省自然科学基金福建省卫生厅青年科研基金福建省教育厅科技项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程更多>>
- 等位基因特异PCR结合熔解曲线分析快速检测线粒体DNA A1555G突变被引量：2
- 2009年
- 目的建立一种线粒体DNA A1555G突变的快速检测方法。方法以45例线粒体耳聋患者为研究对象,采用等位基因特异PCR结合熔解曲线分析对线粒体DNA A1555G突变位点进行检测,根据得到的熔解曲线分析线粒体DNA A1555G突变。并与PCR产物直接测序法结果进行比较。结果线粒体DNA A1555G同质性突变时只出现一个峰且峰尖所对应的Tm为(82±0.5)℃;线粒体DNA A1555G未发生突变时只出现一个峰且峰尖所对应的Tm为(79±0.5)℃;线粒体DNA A1555G异质性突变时出现2个峰且各自峰尖所对应的Tm为(82±0.5)℃和(79±0.5)℃。45例样本的检测结果与PCR产物直接测序法的结果符合率达100%。结论等位基因特异PCR结合熔解曲线分析具有操作简便、结果准确、快速等特点,可作为线粒体DNA A1555G突变检测的常规方法。
- 程祖建杨滨江凌陈静杨上英欧启水
- 关键词：熔解曲线分析线粒体DNA突变
- 用新生隐球菌荚膜相关蛋白10基因mRNA水平评估抗真菌药物疗效被引量：1
- 2010年
- 目的定量检测新生隐球菌(Cryptococcus neoformans,CN)的荚膜相关蛋白10(capsule associated protein 10,CAP10)基因mRNA,探索将其用于隐球菌性脑膜炎抗真菌药物疗效评估的可行性。方法构建重组质粒标准品pGEMT-Easy-CAP10并制作标准曲线;建立荧光定量PCR(fluorescent quantitative PCR,FQ-PCR)反应体系并对其进行评价。利用建立的FQ-PCR体系检测11例氟康唑联用5-氟胞嘧啶治疗、9例两性霉素B联用5-氟胞嘧啶治疗患者治疗前后脑脊液(CSF)CAP10 mRNA拷贝数的变化,并结合临床资料进行分析。结果建立的FQ-PCR体系适合于CAP10 mRNA拷贝数的测定。两性霉素B联合5-氟胞嘧啶治疗组CAP10 mRNA的拷贝数的log值治疗前为3.43±0.84,治疗后下降为2.35±0.85(P<0.05);氟康唑联合5-氟胞嘧啶治疗组治疗前为2.65±1.24,治疗后下降为1.84±1.07(P<0.05)。2组患者临床症状均明显改善。结论构建的新生隐球菌CAP10 mRNA的FQ-PCR定量检测体系适合于脑脊液标本的检测,为新生隐球菌感染患者抗真菌药物疗效的判断提供了新的依据。
- 杨福坤林旎戴琳孙江凌陈勇程祖建欧启水
- 关键词：新生隐球菌荧光定量PCR疗效判断
- 分支DNA技术定量检测HBV DNA的临床意义被引量：4
- 2013年
- HBV DNA是反映病毒量及复制活跃程度的重要指标。临床上常用实时荧光定量（fluorescence quantitative，FQ）-PCR法检测HBV DNA，该方法具有特异度好和敏感度高的特点。新近发展的分支DNA技术（branched DNA，bDNA）以微孔形式对杂交信号级联放大，实现特异性核酸扩增，并通过化学发光或其他显色系统显示检测结果。
- 刘辉江凌商红艳杨滨欧启水
- 关键词：HBVDNADNA技术实时荧光定量
- 福建省486例耳聋患者致聋原因及线粒体DNA突变分析被引量：10
- 2008年
- 目的分析486例耳聋患者的致聋原因,探讨线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)突变与耳聋的关系。方法对486例耳聋患者进行病因学调查,并同时进行线粒体DNA1 555、3 243、7 445突变位点的检测。结果486例中发现家族遗传性聋126例(25.9%),药物性聋221例(45.5%),近亲结婚致聋39例(8.02%),高热或耳部疾病致聋76例(15.6%),不明原因致聋24例(4.9%);在486例耳聋患者中,mtDNA A1 555G突变阳性44例,突变阳性率为9.05%,其中32例为同质性突变,12例为异质性突变;检出1例mtDNA G7 444A突变;所有样本均未检出mtDNA A3 243G、mtDNA A7 445G突变。结论遗传因素和使用耳毒性药物是导致耳聋的重要原因,mtDNA A1 555G突变是常见的突变形式,是氨基糖苷抗生素致聋的重要原因。
- 程祖建杨滨江凌刘奇才陈静陈勇欧启水
- 关键词：耳聋流行病学线粒体DNA
- 7个非综合征型耳聋家系患者的mtDNAA1555G突变性质与特点
- 程祖建杨滨江凌陈静欧启水
- 非综合征型耳聋患者mtDNA A1555G异质性突变比例与临床表型的关系被引量：6
- 2008年
- 目的定量检测非综合征型耳聋患者线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)1555突变型/野生型的拷贝数,探讨突变型/野生型比例与临床表型之间的关系。方法建立实时定量PCR技术和扩增阻滞突变系统(Real-time quantitative PCR和Amplification refractory mutation system,RT-ARMS-qPCR系统)对含突变型和野生型mtDNA 1555位点的拷贝数进行定量检测并计算比例。共检测散发组12例、家系组7例异质性突变患者,结合耳聋患者的临床资料,分析突变型与野生型的比例与耳聋严重程度的关系。结果散发组mtDNA A1555G异质性突变的患者中,突变型mtDNA所占的比例与耳聋轻重程度相关(r=0.771,P=0.003);家系组患者中,突变型mtD-NA所占的比例亦与耳聋轻重程度相关(r=0.850,P=0.015)。结论突变型mtDNA占所有mtDNA的比例与耳聋的严重程度密切相关,是非综合征型耳聋临床表型多样性的分子基础。
- 程祖建杨滨江凌欧启水
- 关键词：非综合征型耳聋突变临床表型
- 建立FQ-PCR体系定量检测新型隐球菌CAP10 mRNA及其应用
- 目的建立荧光定量PCR(nuorescent quantitative PCR.FQPCR)体系定量检测新型隐球菌(cryptococcus neoformans,CN)的荚膜相关蛋白10(capsule associa...
- 林旎戴琳孙江凌欧启水
- 文献传递
- RNA干扰隐球菌cap10基因的siRNA表达载体的构建与鉴定
- 2010年
- 目的构建cap10基因RNA干扰(RNAi)的小干扰RNA(siRNA)表达载体,为将其应用于隐球菌的改造及隐球菌性脑膜炎的生物治疗奠定基础。方法根据GenBank发表的cap10基因序列,按照干扰模板设计原则,选择设计1条可形成发夹结构的核苷酸序列,克隆连接到空载体psilencer4.1-CMVneo中构建重组质粒ps4.1neo-cap10并测序鉴定。用LiAc化学法将重组质粒转染新生隐球菌细胞并用G418筛选。比较重组质粒转染前后新生隐球菌cap10基因表达量的变化。结果成功构建针对cap10基因的ps4.1neo-cap10,经测序证实符合预期设计;ps4.1neo-cap10转染组新生隐球菌内cap10基因表达(175534.6±47004.3)copies/μl明显低于空质粒转染组(321995.5±32611.8)copies/μl和空白组(562931.7±65928.4)copies/μl,P<0.05。结论成功构建cap10基因的shRNA表达载体,其可以明显抑制新生隐球菌细胞内cap10基因的表达。
- 肖玉鹏苏晓霁江凌程祖建欧启水
- 关键词：新生隐球菌RNA干扰
- 2型糖尿病一家系中新发现的线粒体DNA G7444A突变分析
- 本研究报告了一个线粒体DNA突变引发的糖尿病家系,证实其突变位点为mtDNA 7444发生了G→A的突变，这是1个新的突变位点，国内外尚未见报道将通过进一步的试验了解该突变位点的致病机制，发生的频率，为线粒体糖尿病防治提...
- 程祖建杨滨刘奇才江凌谢海花欧启水
- 关键词：基因突变致病机制
- 文献传递
- 一个2型糖尿病家系中新发现的线粒体DNA G7444A突变分析被引量：7
- 2007年
- 应用PCR-RFLP和测序对一个2型糖尿病家系的线粒体DNA G7444A的突变进行检测,并分析其临床资料的特点。结果发现,27例家系成员中,11例母系亲属均存在线粒体DNA G7444A突变,而配偶及父系亲属中未发现该突变。11例突变者中确诊为2型糖尿病患者5例,糖耐量受损1例,均表现为乳酸和血糖增高。因此,线粒体DNAG7444A突变是该家系中糖尿病的遗传易感因素,是导致2型糖尿病的一个新的突变位点。
- 程祖建杨滨刘奇才江凌谢海花欧启水
- 关键词：线粒体DNA2型糖尿病
