樊振川
- 作品数:40 被引量:59H指数:5
- 供职机构:天津科技大学更多>>
- 发文基金:天津市应用基础与前沿技术研究计划天津市自然科学基金天津市应用基础与前沿技术研究计划项目更多>>
- 相关领域:生物学农业科学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 一种发酵型牛肉酱及其制备方法
- 本发明涉及发酵型牛肉酱的制备方法,原料包括牛肉,豆粕,面粉,香菇粉,盐和水,生产工艺采用低盐固态发酵法,发酵菌种采用米曲霉A100-8、耐盐酵母S3-2及耐盐乳酸菌,具体步骤包括米曲霉A100-8种曲的制备,牛肉酱大曲的...
- 侯丽华王春玲宋潇樊振川曹小红
- 文献传递
- 莱茵衣藻IFT22蛋白的原核表达、纯化及其多克隆抗体的制备被引量:6
- 2018年
- 纤毛内运输蛋白IFT22是IFT复合物B中(IFT-B)的一个重要组分,但对其功能研究存在很大的争议,为深入研究IFT22功能,制备一支特异性好的IFT22抗体是必不可少的。该研究首先用纯度为93%的6×His标签IFT22抗原免疫新西兰大白兔,采集3次免疫后血清,间接ELISA法测定效价为1?64 000。抗血清经Protein A和抗原抗体纯化后, Western blot检测结果表明,以Chlamydomonas reinhardtii CC125全细胞为抗原时,孵育IFT22抗体后,只有一条带出现,说明anti-IFT22特异性非常好,是研究IFT22蛋白功能的绝佳材料。
- 薛斌薛斌潘强李淑婷王昊李晓瑾樊振川
- 关键词:莱茵衣藻纤毛抗原抗体
- 一种高效制备的重组Hispidalin抗菌肽及其应用
- 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种使用基因工程的方法,通过毕赤酵母诱导表达制备的Hispidalin抗菌肽及其应用。所述mHispidalin抗菌肽是将Hispidalin抗菌肽基因根据毕赤酵母表达系统偏好性进行密码子...
- 樊振川孟德梅吕玉洁孙雪晴李文娟刘庆艳贾雪霞
- 文献传递
- 稳定表达小反刍兽疫病毒衣壳蛋白的Vero细胞系的筛选和鉴定被引量:2
- 2022年
- 本研究利用PCR方法扩增小反刍兽疫病毒(PPRV)的衣壳蛋白(N蛋白)基因,并将其插入真核表达载体pcDNA3.1中,构建重组表达质粒pcDNA3.1-pN。利用电转的方法将该重组质粒转入非洲绿猴肾(Vero)细胞,并使用抗生素G418进行筛选。Western blot试验结果表明,N基因在Vero细胞中得到了表达,且能够随着细胞的传代稳定遗传。PPRV N基因的成功表达为小反刍兽疫的诊断、鉴定以及新型基因重组疫苗的开发奠定了基础。
- 贾雪霞刘莹孟德梅樊振川
- 关键词:小反刍兽疫病毒衣壳蛋白稳定细胞系
- 一种莱茵衣藻纤毛内运送蛋白IFT38的多克隆抗体、应用和方法
- 本发明公开了一种莱茵衣藻纤毛内运送蛋白IFT38的多克隆抗体,其制备步骤如下:构建重组表达载体,该重组表达载体的核苷酸序列包括SEO ID NO.2所示的序列;将所述表达载体转化至大肠杆菌感受态细胞BL21中,得到重组表...
- 樊振川孙维越刘雁霞薛斌张瑞凯王慧
- 小G蛋白ARL3多克隆抗体制备及其突变体鉴定
- 2024年
- 为探究ARL3在纤毛生成和纤毛信号转导中的功能,制备了兔抗莱茵衣藻ARL3多克隆抗体,并鉴定了arl3突变体。通过基因克隆获取arl3目的基因,构建原核表达载体pET-28a(+)-arl3,以大肠杆菌BL21(DE3)为宿主表达融合蛋白6×His-ARL3。将纯化后的目的蛋白质用于免疫兔子并获得抗血清,随后对抗血清中的protein A和抗原抗体进行纯化,并通过蛋白质免疫印迹检测莱茵衣藻ARL3抗原。结果表明,抗血清效价可达1∶102400,纯化后的ARL3抗体在1∶400的稀释条件下检测出单一目的条带。表明作者成功制备了高特异性、高灵敏度的兔抗莱茵衣藻ARL3蛋白多克隆抗体,且鉴定出一株arl3突变体,为进一步研究莱茵衣藻ARL3蛋白在纤毛内的功能提供了基础。
- 张婵张瑞凯刘雁霞樊振川
- 关键词:莱茵衣藻多克隆抗体纤毛
- Ipsen17作为制备治疗由黑素皮质素受体-4突变体引起的肥胖症药物的应用
- 本发明涉及一种Ipsen17作为制备治疗由黑素皮质素受体-4突变体引起的肥胖症药物的应用,所述肥胖症为早发性肥胖症。本发明利用Ipsen17在人肾胚胎细胞HEK293中功能拯救10种不同细胞膜表达缺陷的人黑素皮质素受体-...
- 樊振川郁彭王小花
- 文献传递
- 莱茵衣藻纤毛内运送蛋白IFT27的原核表达、纯化及多克隆抗体制备被引量:10
- 2016年
- [目的]制备莱茵衣藻纤毛内运送蛋白IFT27的多克隆抗体。[方法]利用莱茵衣藻ift27基因的cDNA序列构建了原核表达载体p ET28a-ift27和p MAL-C2X-ift27,转入大肠杆菌BL21(DE3)诱导表达,获得了6×His/MBPIFT27两种重组融合蛋白。将纯化后的MBP-IFT27融合蛋白免疫新西兰大白兔,5次后采集抗血清,间接ELISA法测定效价,并对抗血清依次经protein A和抗原抗体两步纯化后使用Western Blot和免疫荧光对抗体特异性进行检测。[结果]MBP/6×His-IFT27融合蛋白表达后分子量分别为27 k Da和67 k Da。ELISA测定其效价为1∶256 000,Western Blot检测可特异性识别莱茵衣藻中的IFT27蛋白,免疫荧光结果显示可检测到纤毛中的IFT27蛋白。[结论]制备出特异性抗莱茵衣藻IFT27的多克隆抗体,效价为1∶256 000,Western Blot可特异性检测到莱茵衣藻中IFT27蛋白的目的条带,免疫荧光可定位IFT27在细胞内分布。
- 董彬吴松王晶孟德梅樊振川
- 关键词:莱茵衣藻纤毛表达纯化多克隆抗体
- 莱茵衣藻IFT20的原核表达、纯化及多克隆抗体鉴定被引量:1
- 2023年
- 莱茵衣藻鞭毛内运输(intraflagellar transport,IFT)蛋白IFT20是IFT蛋白复合物B(IFT-B)的组分之一。虽然IFT20参与调控细胞内大分子的胞内运输过程,但其作为一个鞭毛蛋白在鞭毛内的详细功能仍有待研究。为了开发高特异性的莱茵衣藻IFT20兔源多克隆抗体,作者首先在大肠杆菌中表达了N端6×His标签标记的IFT20融合蛋白(6×His::IFT20),并对其进行镍柱纯化,将纯化所得6×His::IFT20蛋白免疫新西兰大白兔。采集3次免疫后的抗血清,利用间接ELISA法测定其效价为1∶102400。利用protein A纯化珠对所得抗血清进行了IgG亚型抗体富集,接着用大肠杆菌表达纯化所得N端MBP标签标记的IFT20(MBP::IFT20),并对IgG抗血清进行抗原抗体亲和纯化。经对CC-125藻种全细胞蛋白质提取物进行免疫印迹法鉴定,所得IFT20多克隆抗体特异性较高,适合用于后续莱茵衣藻IFT20鞭毛内运输功能的研究。
- 贾瑞勤贾航郑学超薛斌薛斌
- 关键词:莱茵衣藻多克隆抗体
- 莱茵衣藻纤毛内运送蛋白IFT70的原核表达、纯化及其多克隆抗体的制备被引量:4
- 2017年
- 目的原核表达及纯化莱茵衣藻纤毛内运送蛋白IFT70,并制备其多克隆抗体。方法以质粒p GAD-ift70(含莱茵衣藻ift70基因N-末端编码380个氨基酸的核酸序列)为模板,分别构建带有6×His和MBP标签的原核表达质粒p ET-28A-ift70和p MAL-C2X-ift70,转入E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导表达6×His-IFT70和MBP-IFT70融合蛋白,并进行亲和层析。将纯化的MBP-IFT70融合蛋白免疫2只新西兰大白兔,经耳动脉采血,分离血清,ELISA法测定抗体效价,经两步亲和纯化后进行Western blot及免疫荧光法分析。结果经双酶切及测序鉴定证明原核表达质粒p ET-28A-ift70和p MAL-C2X-ift70构建正确。6×His-IFT70和MBP-IFT70融合蛋白的相对分子质量分别为40 000和80 000,纯化后纯度可达90%。家兔1及家兔2抗血清的效价分别为>128 000及>256 000,纯化的抗血清可与莱茵衣藻IFT70蛋白发生特异性结合,于相对分子质量约70 000处可见特异性结合条带,可与野生型莱茵衣藻CC-125纤毛上的IFT70蛋白发生特异反应,荧光显微镜下可见红色荧光。结论成功制备了抗莱茵衣藻IFT70的多克隆抗体,为IFT70在IFT和纤毛组装中作用的深入研究奠定了基础。
- 董彬王震刘雁霞孟德梅樊振川
- 关键词:莱茵衣藻纤毛原核细胞多克隆抗体