樊惠英
- 作品数：98 被引量：169H指数：7
- 供职机构：华南农业大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生文化科学更多>>
- 利用SUMO系统高效表达可溶性猪圆环病毒2型Cap蛋白被引量：11
- 2012年
- 利用pCold-SUMO可溶性原核表达载体,构建表达猪圆环病毒2型缺失核定位信号肽的Cap基因的重组表达载体pCold-SUMO-dCap,并将其转入Arctic-Express表达菌株中15℃低温诱导表达.表达产物经SDS-PAGE分析,结果表明SUMO-dCap融合蛋白获得了高效表达,可溶性SUMO-dCap融合蛋白约占总融合蛋白的50%;用NI-NTA树脂纯化可溶性的融合蛋白,然后利用SUMO蛋白酶特异性去除SUMO标签,从而得到不含任何标签的dCap蛋白,进一步的Western-blot分析表明,表达的dCap蛋白具有良好的反应原性.
- 陈春丽郭宇飞陈筱薇叶昱王强廖明樊惠英
- 关键词：猪圆环病毒2型CAP蛋白原核表达
- 双表达H9N2禽流感病毒HA基因的假型重组杆状病毒系统的构建
- 2011年
- 以含有H9N2禽流感病毒HA基因的重组质粒pMD18-H9HA为模板,扩增HA基因,将其亚克隆入杆状病毒表面展示质粒pBACsurf-1中,再次将含有H9HA及gp64的基因片段克隆到质粒pcDNA3.1(+),获得重组质粒pcDNA-H9-HA.然后将含有CMV启动子、H9HA及gp64的基因片段克隆到杆状病毒转移质粒pFastBac-G,得到重组质粒pFastBac-G-H9-HA.将该重组质粒转化到DH10Bac感受态细胞中,得到重组穿梭载体Bacm id-G-H9-HA.利用脂质体转染Sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒BV-Dual-H9-HA.间接免疫荧光实验表明,该重组杆状病毒可以转导哺乳动物细胞并表达HA蛋白.免疫电镜观察结果表明,HA蛋白可以在该重组杆状病毒表面展示.
- 林文耀樊惠英程晓亮陈筱薇叶煜廖明
- 关键词：禽流感病毒H9N2亚型HA基因
- 猪圆环病毒2型ORF2基因在昆虫细胞中的表达及其特性被引量：16
- 2005年
- 利用BactoBac杆状病毒表达系统将圆环病毒2型的ORF2全基因克隆到杆状病毒转移载体pFastBacTM1中,获得重组转移载体pFastOFR2,再将其转化进含穿梭载体Bacmid的感受态细胞DH10Bac中,发生转座作用,经蓝白菌落筛选得到含ORF2基因的重组穿梭载体Bac.ORF2,以脂质体介导的方法将重组穿梭载体转染sf9细胞,获得重组病毒,命名为Ac.ORF2。间接免疫荧光分析表明,PCV2阳性血清能使Ac.ORF2感染的sf9昆虫细胞呈强的荧光着色;SDSPAGE与Westernblotting分析可见大小约为28kD的特异性带,表明Ac.ORF2在sf9细胞中成功表达了PCV2ORF2蛋白。将该表达蛋白纯化并经磷钨酸负染后,通过电镜观察可见形态与PCV2病毒粒子相似的病毒样颗粒(VLPs),其中某些颗粒由于中心浓染而似空衣壳,其直径也为17nm左右。
- 樊惠英陈焕春佟铁铸琚春梅吕建强黄红亮
- 关键词：猪圆环病毒2型病毒样颗粒
- 一种基于自然转化的副猪嗜血杆菌高效遗传重组方法及应用
- 本发明公开了一种基于自然转化的副猪嗜血杆菌高效遗传重组方法及应用，属于细菌遗传改造技术领域。本发明中通过在上游引物中添加USS序列ACCGCTTG，使的PCR产物含有这个USS序列，副猪嗜血杆菌会识别并带入菌体内部进行重...
- 廖明樊惠英冯赛祥杨开杰
- 一种编码重组禽流感病毒HA蛋白的基因、病毒样颗粒、疫苗及制备与应用
- 本发明属于基因工程疫苗技术领域，具体涉及一种编码重组禽流感病毒HA蛋白的基因、病毒样颗粒、疫苗及制备与应用。所述的编码重组禽流感病毒HA蛋白的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1。本发明还提供了一种禽流感病毒样颗粒，...
- 樊惠英孔德鑫廖明陈陶然胡小龙
- 表面展示猪圆环病毒2型衣壳蛋白的重组杆状病毒的构建
- 2011年
- 利用PCR方法扩增猪圆环病毒2型核定位信号区缺失的Cap蛋白基因,将其亚克隆入杆状病毒表面展示质粒pBACsurf-1的gp64信号肽和gp64成熟蛋白之间.将此融合片段亚克隆到质粒pcDNA3.1(+),获得重组质粒pcDNA3.1-gp64-dCap.然后将含有CMV启动子,gp64及dCap的基因片段克隆到杆状病毒转移质粒pFastBac-V,得到重组质粒pFastBac-dCap-V.然后将此转化DH10Bac感受态细胞,获得的重组穿梭质粒Bacmid-dCap-V,经脂质体转染Sf9细胞,获得重组杆状病毒Ac-dCap-V.该重组病毒感染Sf9细胞后可以产生典型的细胞病变,转导哺乳动物细胞后经间接免疫荧光试验证明,该重组杆状病毒成功转导哺乳动物细胞并表达dCap蛋白.
- 程晓亮林文耀叶煜陈筱薇严常燕廖明樊惠英
- 关键词：猪圆环病毒2型
- 一种复制缺陷型犬细小病毒包装载体、复制缺陷型重组犬细小病毒及制备与应用
- 本发明涉及疫苗技术领域，特别涉及一种复制缺陷型犬细小病毒包装载体、复制缺陷型重组犬细小病毒及制备与应用。所述的复制缺陷型犬细小病毒包装载体，包括载体ITR质粒和辅助质粒，其中，载体ITR质粒包含核心元件ITR‑P‑EGF...
- 罗永文吕华达毕水莲徐孟磊樊惠英
- 副猪嗜血杆菌SC096株荚膜多糖抗猪肺泡巨噬细胞吞噬能力的研究被引量：3
- 2016年
- 为探讨荚膜多糖在副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis)抗猪肺泡巨噬细胞吞噬中的作用,作者用间接免疫荧光试验和流式细胞术对H.parasuis SC096分离株及其荚膜缺陷型菌株进行了抗巨噬细胞吞噬试验。间接免疫荧光试验显示野生菌株组的H.parasuis大多数存在于巨噬细胞外,而荚膜多糖缺失突变体则主要存在于巨噬细胞内。流式细胞仪检测结果表明,对应的野生型菌株组巨噬细胞总的吞噬率为12.51%,吞入效率为89.61%;而荚膜多糖缺陷型组巨噬细胞总的吞噬率为27.18%,吞入效率为91.06%。加入外源荚膜多糖后,野生型菌株组巨噬细胞总的吞噬率降为2.72%,吞入效率降为32.72%;荚膜多糖缺陷型组巨噬细胞总的吞噬率降为3.59%,吞入效率基本不变,为91.36%。荚膜多糖缺失后H.parasuis抗巨噬细胞吞噬能力降低,表明H.parasuis SC096株荚膜多糖具有抑制巨噬细胞吞噬能力的作用。
- 周琪贺现辉阳巧梅冯赛祥樊惠英廖明
- 关键词：副猪嗜血杆菌荚膜多糖猪肺泡巨噬细胞
- 猪2型圆环病毒ORF1与ORF2基因和伪狂犬病毒基因的重组与表达的研究被引量：15
- 2005年
- 根据GenBank发布的猪2型圆环病毒(PCV2 )序列(AY0 35 82 0 ) ,设计两对特异性引物,采用PCR方法,分别扩增了猪2型圆环病毒ORF1和ORF2基因。将ORF1和ORF2基因的PCR产物回收并酶切后,依次插入到伪狂犬病毒gE gI双缺失通用转移载体pIECMV中,构建了猪2型圆环病毒_伪狂犬病毒重组中间转移质粒pIEORF1_ORF2。采用脂质体介导法,将重组中间转移质粒pIEORF1_ORF2与伪狂犬病毒TK- gE- LacZ+ 基因组共转染IBRS_2细胞,待发生细胞病变后收集病毒液进行空斑纯化,利用检测PCV2ORF1基因和ORF2基因的PCR方法筛选重组病毒TK- gE- gI- ORF1-ORF2 + ,用Southernblotting鉴定重组病毒,并用Westernblotting检测ORF1_ORF2融合蛋白的表达情况,在此基础上也测定了重组病毒在不同细胞上的增殖滴度。结果表明,外源基因ORF1和ORF2已成功插入到TK- gE- LacZ+ 亲本株的基因组中,并获得了表达,表达的蛋白可与PCV2阳性血清发生反应。同时发现ORF1和ORF2基因的插入不影响重组病毒的增殖特性,其毒力与亲本株相当。
- 琚春梅陈焕春樊惠英刘正飞曹胜波
- 兽医专业大学生创新创业能力培养的探索被引量：8
- 2009年
- 提出了兽医专业大学生创新创业能力培养的重要意义、培养途径,并结合华南农业大学兽医学院所做的探索,指出兽医专业大学生创新创业能力培养的渠道和方法。
- 陈晓梅陈浩文石达友易琳郑志明樊惠英
- 关键词：兽医大学生创新创业能力
