梁瑞霞
- 作品数：13 被引量：53H指数：3
- 供职机构：军事医学科学院生物工程研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 前列腺特异启动子和部分靶基因在转基因模型中的应用进展
- 2006年
- 遗传工程小鼠模型已被大量用于前列腺癌发生、发展、恶化和转移的研究。构建小鼠模型的途径主要包括转基因的过表达、基因敲除或敲入,以及使用Cre/lox技术进行条件调控。本文综述了目前构建的有明显遗传表型的转基因小鼠模型所用到的前列腺特异的启动子,以及所用到的靶基因。
- 梁瑞霞姜飞周建光黄翠芬
- 关键词：前列腺癌启动子靶基因
- RNA干涉抑制NIH3T3细胞中外源PC-1基因表达
- 2005年
- 目的:获得能有效抑制PC 1基因表达的RNAi靶标,用RNAi技术研究PC- 1基因表达在前列腺癌中的作用。方法:用DNA重组技术构建了可表达短发夹RNA的重组质粒,将重组质粒与表达PC-1- EGFP融合蛋白的质粒共转染NIH3T3细胞,通过荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达差异,从 5个候选靶标中初筛出最合适的RNAi靶标,再通过RT- PCR和Western印迹从mRNA水平和蛋白质水平检测该RNAi靶标抑制PC- 1基因表达的效果。结果:利用RNA干涉有效靶点抑制了NIH3T3细胞中外源PC -1基因表达。结论:这一策略适合大量筛选RNAi有效靶标序列,其结果为研究RNAi技术降低PC 1基因的表达对前列腺癌细胞的影响奠定了基础。
- 周立权张惠高雪松王健梁瑞霞洪宝发周建光
- 关键词：RNA干涉基因表达前列腺肿瘤
- 前列腺癌细胞特异性启动子及其应用
- 本发明公开了一种前列腺癌细胞特异性启动子及其应用。该启动子，是3端序列为如SEQ ID NO：9或10或11或12所示的核苷酸序列，由595－1544个核苷酸组成的DNA片段。本发明的启动子，在前列腺癌细胞中具有组织特异...
- 周建光梁瑞霞黄翠芬
- 文献传递
- 前列腺癌细胞特异性启动子及其应用
- 本发明公开了一种前列腺癌细胞特异性启动子及其应用。该启动子，是3′端序列为如SEQ ID NO：9或10或11或12所示的核苷酸序列，由595-1544个核苷酸组成的DNA片段。本发明的启动子，在前列腺癌细胞中具有组织特...
- 周建光梁瑞霞黄翠芬
- 文献传递
- 与人PC-1同源的鼠PC-1基因的启动子的分子克隆和特性分析(英文)被引量：1
- 2006年
- 为了鉴定鼠mPC-1基因表达的调控元件,克隆并分析了该基因的启动子.构建了一系列mPC-1基因启动子的截短序列.通过荧光素酶报道基因,分析了它们在前列腺癌细胞和其它细胞中的表达.结果表明,在AR阳性细胞系中,mPC-1基因启动子活性远远高于SV40和p61-PSA启动子,mPC-1基因启动子599bp至449bp可能含有一个负调控元件;mPC-11.1kb启动子控制的表达主要在前列腺癌细胞系中;雄激素可调控mPC-11.1kb启动子表达.mPC-11.1kb序列是一个有前列腺癌细胞特异性和较强的启动子,经过进一步的修饰有可能作为一种有用的前列腺癌基因治疗元件.
- 梁瑞霞涂智杰王健张惠姜飞庞博郑斌李素萍施庆国黄翠芬周建光
- 关键词：启动子前列腺癌LNCAP细胞
- 一种肿瘤细胞模型
- 本发明公开了一种肿瘤细胞模型。本发明所提供的肿瘤细胞模型，是可表达PC－1蛋白全序列或至少可表达PC－1蛋白N端46个氨基酸残基的真核宿主细胞。本发明的肿瘤细胞模型可用于研究肿瘤，特别是前列腺癌的致病机理；也可用于筛选抗...
- 周建光常晓彤梁瑞霞张浩王健黄翠芬
- 文献传递
- RNA干涉技术稳定抑制PC-1基因表达对前列腺癌细胞C4-2的影响被引量：4
- 2005年
- 目的:研究用RNA干涉技术(RNAi)稳定抑制PC-1基因表达对前列腺癌细胞C4-2生物学行为的影响。方法:用DNA重组技术构建携带与短的发夹结构的干涉RNA相对应DNA序列的重组质粒pSC394-414,采用脂质体将pSC394-414重组质粒稳定转染C4-2细胞,PCR分析外源DNA序列的整合情况,RTPCR及Western印迹鉴定RNAi抑制PC1基因表达的细胞株,MTT试验分析该细胞的生长速度,软琼脂克隆形成实验检测其非锚着依赖性生长能力。结果:获得了用RNAi稳定抑制PC-1基因表达的细胞株C4-2-pSC394-414,该细胞株中的PC-1mRNA及PC1蛋白的表达均显著降低,细胞生长速度显著减慢,软琼脂克隆形成能力显著下降。结论:抑制PC-1基因表达,可降低C4-2细胞生长速度及非锚着依赖性生长能力。
- 周立权张惠高雪松王健梁瑞霞洪宝发周建光
- 关键词：前列腺癌RNA干涉基因表达
- PC-1蛋白鼠单克隆抗体制备的改进及意义
- 2009年
- 目的为PC-1蛋白功能的研究奠定基础。方法以纯化后的PC-1蛋白及其N端46个氨基酸与GST的融合蛋白(GST-PC-1和GST-PC-1-46)为抗原,通过常规和脾内免疫相结合的方法免疫BALB/c小鼠,经鼠脾细胞与骨髓瘤细胞进行细胞融合,用直接ELISA法进行克隆化筛选,单克隆抗体的染色体分析及亚类鉴定,检测PC-1基因表达及分布。结果成功获得2株抗鼠PC-1基因单克隆抗体,抗体亚型为IgG1,PC-1在高恶性前列腺癌细胞C4-2中高表达,在低恶性前列腺癌细胞LNCaP中少量表达,与前期研究结果相符。免疫组化染色示PC-1蛋白定位于细胞质。结论PC-1蛋白鼠单克隆抗体成功制备,针对PC-1基因蛋白的单抗在前列腺癌的放射免疫显像诊断及导向治疗上有潜在应用价值;可用于PC-1蛋白功能的研究。
- 高雪松刘萃龙周立权孙玉龙梁瑞霞陈伟洪宝发周建光
- 关键词：PC-1基因前列腺肿瘤单克隆抗体
- PC-1蛋白单克隆抗体制备和鉴定
- 2008年
- 为获得高效价PC-1蛋白的鼠单克隆抗体(mAb),用于PC-1功能的实验,采用纯化的PC-1蛋白与GST的融合蛋白(GST-PC-1)为抗原,免疫小鼠和骨髓瘤细胞进行细胞融合,用直接ELISA法进行克隆化筛选,mAb的染色体分析及亚类鉴定及初步应用。结果表明细胞融合和ELISA筛选后,获得2株抗鼠PC-1蛋白mAb,两株PC-1 mAb效价分别为1∶25600,1∶13600,抗体亚型为IgG1,Western blot证实其特异性识别PC-1蛋白。该mAb可以用于测定PC-1蛋白。
- 高雪松张慧周立权孙玉龙梁瑞霞陈伟刘萃龙周建光
- 关键词：抗原前列腺癌单克隆抗体免疫
- 鼠mPC-1基因的克隆与特性分析被引量：3
- 2004年
- 为深入研究人前列腺癌相关基因PC 1的生物功能和进化保守状况,从小鼠肾脏中克隆了全长cDNA序列,命名为mPC 1(GenBankAccNo.AY0 4 885 2 ).mPC 1基因cDNA全长为 2 193bp,主要定位于小鼠染色体 3A1 A2区域.mPC 1基因最大开放阅读框编码的蛋白质由 2 2 4个氨基酸组成,与人PC 1蛋白编码区存在 82 %的序列一致性,含有coiled coil结构域和PEST结构域.生物信息学分析表明,由 6个外显子组成的mPC 1基因与mD5 2高度同源,其中,第一外显子代表该基因的特异性序列,实验证据显示mPC 1基因具有自己的启动子,推测mPC 1与小鼠mD5 2可能是重叠基因.对小鼠 2 0种组织器官和不同发育阶段的胚胎组织cDNA的RT PCR检测证实,该基因主要在前列腺、肾和眼组织中表达,在胃和平滑肌中有少量表达,在其他组织中表达很弱或不表达.而mD5 2基因则几乎广泛存在于小鼠的各个组织器官中,因此,两个基因虽然序列上高度重叠却是独立调控的.综上所述,mPC 1基因可能是一个与人PC
- 梁瑞霞周建光李杰之黄翠芬
- 关键词：新基因
