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林佩蓉
作品数:
2
被引量:2
H指数:1
供职机构:
中山大学中山医学院眼科学国家重点实验室
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发文基金:
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相关领域:
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合作作者
杨璐
中山大学中山医学院眼科学国家重...
杨诚
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2013
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高糖诱导人视网膜血管内皮细胞脯氨酸羟化酶2表达变化和对内皮细胞屏障功能的影响
被引量:2
2013年
目的观察高糖诱导人视网膜血管内皮细胞(HRECs)脯氨酸羟化酶2(PHD2)的表达变化和对内皮细胞屏障功能的影响。方法将培养至融合的HRECs分为三组,分别为正常对照组、甘露醇对照组与高糖组。正常对照组细胞培养液含5mmol/L葡萄糖,甘露醇对照组细胞培养液含5mmol/L葡萄糖和25mmol/L甘露醇,高糖组细胞培养液含30mmol/L葡萄糖。培养24、48h后收集细胞蛋白、上清液及RNA。蛋白免疫印迹法检测细胞PHD2、缺氧诱导因子la(HIF-1a)及紧密连接蛋白occludin的蛋白表达水平;酶联免疫吸附试验检测细胞上清液中血管内皮生长因子(VEGF)的含量;实时荧光定量聚合酶链反应检测细胞PHD2、HIF-1a、VEGF及occludin基凶的转录水平;相对分子质量7×104的异硫氰酸荧光素标记的葡聚糖检测细胞旁通透性。结果与正常对照组相比,甘露醇对照组与高糖组HRECs中PHD2蛋白表达水平均先降低后升高,HIF-1a表达升高,occludin表达降低;高糖组细胞上清液中VEGF含量增加,差异均有统计学意义(PHD2:F=7.618、8.627,P〈0.05;HIF-1a:X2=7.692、7.652,P〈0.05;occludin:F=23.23、7.317,P〈0.05;VEGF:F=10.768、4.562,P〈0.05)。与正常对照组相比,甘露醇对照组与高糖组HRECs的PHD2、HIF-1a、VEGF及occludin基因转录水平升高,差异均有统计学意义(PHD2:F=5.69、14.27,P〈0.05;HIFla:F=6.07、10.47,P〈0.05;VEGF:F=12.31、9.14,P〈0.05;occludin:F=8.77、8.00,P〈0.05)。与正常对照组相比,甘露醇对照组与高糖组细胞旁通透性增加,差异有统计学意义(X2=20.57、F=56.09,P〈0.05)。结论高糖诱导HRECsPHD2表达发生变化。PHD2可能在内皮细胞屏障破坏中发挥一定的调控作用,其机制与HIF-1a、VEGF有关。
梁小玲
魏丽清
周焕娇
孙刚
杨诚
张熙芳
杨璐
林佩蓉
关键词:
血管内皮生长因子类
动物实验
川芎嗪对人脐静脉内皮细胞缺氧相关因子表达的影响
2013年
目的观察川芎嗪(TMP)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)缺氧相关因子表达的影响。方法体外培养HUVECs,取2~5代细胞进行实验。将HUVECs分为对照组、氯化钻(CoCl2)缺氧组及50、100、200μmol/L TMP药物处理组。对照组不作任何处理。CoCl2缺氧组利用150μmol/L。的CoCl2干预HUVECs4h;50、100、200μmol/L TMP药物处理组在CoCl2干预HUVECs4h后,再加入不同浓度TMP继续培养8h。分别提取各组细胞RNA和总蛋白,采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT—PCR)和蛋白免疫印迹法(Westernblot)检测脯氨酰羟化酶2(PHD2)、缺氧诱导因子-1a(HIF-1a)、血管内皮生长因子(VEGF)mRNA和蛋白的表达。结果实时RT—PCR检测结果显示,与对照组比较,CoCl2缺氧组PHD2mRNA表达下降(t=3.734),HIF-1a和VEGFmRNA表达升高(t=4.589、3.926),差异均有统计学意义(P〈O.05)。50、100、200ffmol/L。TMP药物处理组分别与CoCl。缺氧组比较,PHD2mRNA表达均升高(t=3.286、3.617、3.886),差异有统计学意义(P〈0.05);HIF-1amRNA表达均无明显变化(t=1.025、0.726、-1.386),差异无统计学意义(P〉0.05);VEGFmRNA表达均有所下降,但50μmol/L。TMP药物处理组与之差异无统计学意义(t=1.696,P〉0.05),100、200umol/L。TMP药物处理组与之差异有统计学意义(t=2.974、3.492,P%0.05)。Westernblot检测结果显示,与对照组比较,CoCl2缺氧组PHD2蛋白表达下降,差异有统计学意义(t=3.122,P〈0.05);HIF-1a及VEGF蛋白表达均有不同程度升高,差异有统计学意义(t=3.778、3.257,P〈0.05)。50、100、200umol/L。TMP药物处理组分别与CoCl。缺氧组比较,PHD2蛋白表达均升高(t=2.813、3.026、3.078),差异有统计学意义(P%0.05);HIF-1d、VEGF蛋白表达均有所下降,但50umol/L.TMP药物处理组与之差异无统计学意义�
梁小玲
杨诚
周焕娇
魏丽清
林佩蓉
杨璐
关键词:
内皮细胞
细胞
药物作用
川芎嗪
血管内皮生长因子类
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