李跃纲
- 作品数：7 被引量：29H指数：4
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- 铜蓝蛋白/PTEN在石英致组蛋白修饰改变中的作用
- 铜蓝蛋白(Cp)是一种急性反应蛋白,在矽肺机制研究中受到了广泛的关注.本研究以人胚肺成纤维细胞(HELF)为实验模型,围绕组蛋白修饰这一中心,探讨Cp在石英诱导的HELF中在组蛋白修饰改变中的作用以及PTEN在其中的影响...
- 张夏男李跃纲贾效伟刘秉慈叶萌
- 关键词：矽肺铜蓝蛋白遗传修饰
- 铜蓝蛋白/PTEN 在石英致组蛋白修饰改变中的作用被引量：1
- 2014年
- 目的探讨铜蓝蛋白(Cp)在石英诱导的人胚肺成纤维细胞(HELF)组蛋白修饰改变中的作用以及人第十号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因(PTEN)在其中的影响。方法不同浓度的石英(50、100、200μg/ml)和不同浓度的Cp(10、20、30μg/ml)作用HELF细胞24 h,用蛋白免疫印迹(Western Blot)实验检测蛋白质赖氨酸乙酰化(acety-lys)水平以及组蛋白H2B、H3、H4乙酰化和H3甲基化水平。200μg/ml石英作用于HELF细胞和转染PTEN shRNA的HELF细胞(PT)1 h后,加入30μg/ml Cp作用24 h,用Western blot检测acety-lys水平,组蛋白H2B、H3、H4乙酰化和H3甲基化水平。结果石英暴露可诱导蛋白质acety-lys水平的增高,组蛋白H2B(lys5/12)、H3(lys9/14)、H4(lys12)乙酰化水平增加,组蛋白H3的2位精氨酸的甲基化水平降低。Cp可以逆转石英暴露所致的蛋白质acety-lys水平的增加,组蛋白H3、H4赖氨酸乙酰化水平的增加和组蛋白H3甲基化水平的减少。抑制PTEN的水平后,观察不到Cp对上述现象的逆转。结论 Cp可以逆转石英暴露诱导的组蛋白乙酰化和甲基化改变,PTEN参与了Cp对石英诱导的组蛋白修饰作用的改变。
- 张夏男李跃纲贾效伟刘秉慈叶萌
- 关键词：石英PTEN组蛋白修饰铜蓝蛋白
- 铜蓝蛋白在石英诱导的PI3K/PTEN信号通路中的作用被引量：4
- 2014年
- 目的 探讨铜蓝蛋白（Ceruloplasmin,Cp）在石英诱导的人胚肺成纤维细胞（HELF）中PI3K/PTEN信号通路改变中的作用.方法 建立稳定转染空载体pGenesil1.1的HELF细胞及pGenesil 1.1与shRNA PTEN质粒共转染的HELF细胞（简称PT）,复苏转染p85显性失活突变体质粒的HELF细胞（简称DN-p85）.实验中石英浓度为100 μg/ml,Cp浓度为10、20、30 μg/ml,Cp在石英作用1h后加入.在HELF、PT和DN-p85 3个不同细胞系中,分别设立对照组、石英染毒组、石英＋不同浓度Cp组.用噻唑蓝（MTT）比色法观察分别抑制PTEN和p85后,Cp对石英诱导的HELF细胞增殖的影响.蛋白免疫印迹（Western blot）实验检测PTEN、p85、p110、AKT及AKT308位点和AKT473位点磷酸化水平、总ERK、JNK及其磷酸化水平的变化.结果 抑制PTEN后,100 μgml石英与30 μg/ml Cp共同诱导的p85蛋白水平增加被明显抑制（P＜0.05）,p110蛋白水平无变化（P＞0.05）.抑制p85后,石英以及石英＋不同浓度Cp诱导的细胞增殖加快被抑制;100 μg/ml石英与30 μg/ml Cp共同诱导的AKT308位及AKT473位磷酸化水平、总ERK、磷酸化ERK和磷酸化JNK水平的增加低于相应的对照组（P＜0.05）,但是总JNK水平的变化没有统计学差异（P＞0.05）.结论 Cp通过PI3K/AKT/MAPK信号通路参与石英诱导的HELF细胞增殖,PTEN可以影响PI3K调节亚单位p85蛋白水平.
- 张夏男李跃纲贾效伟刘秉慈叶萌
- 关键词：铜蓝蛋白石英PTENPI3K人胚肺成纤维细胞
- 活性肽在大鼠小肠吸收特点的实验研究被引量：12
- 2004年
- 目的 :研究补充活性肽对大鼠小肠上皮组织形态学、氨基肽酶活性及氮代谢的影响 ,探讨大鼠小肠对活性肽的吸收特点。方法 :雄性SD大鼠 30只 ,被随机分为 :安慰剂对照组 (Pla组 )、补充大豆分离蛋白对照组 (Pro组 )和补充活性肽实验组 (Pep组 )。大鼠在适应性喂养及膳食平衡 1周后 ,进行代谢实验及指标测试。结果 :(1)Pep组大鼠小肠粘膜蛋白含量比Pro组高 4 8 6 0 % ,比Pla组高 91 37% (P <0 0 5 )。 (2 )Pep组大鼠小肠粘膜氨基肽酶活性明显增加 ,比Pla组增加了2 0 3 97% ,比Pro组则增加了 73 30 % (P <0 0 5 )。 (3)Pep组大鼠小肠粘膜厚度比Pro组高 6 99% ,比Pla组高 2 5 0 3% (P <0 0 5 )。 (4 )Pep组大鼠小肠绒毛高度比Pro组高 4 6 5 % ,比Pla组高2 2 2 2 % (P <0 0 5 )。 (5 )Pep组大鼠小肠上皮隐窝深度比Pro组高 12 5 8% ,比Pla组高 35 77%。(6 )Pep组大鼠小肠上皮绒毛表面积比Pro组高 3 30 % ,比Pla组高 2 3 6 4% (P <0 0 5 )。 (7)补充大豆分离蛋白后 ,Pep组大鼠氮平衡值、氮储存率和表观消化率较Pla组分别增高 6 41 0 3%、5 91 4 2 %和 5 1 80 % ;而补充活性肽后 ,Pep组大鼠氮平衡值、氮储存率和表观消化率较Pla组分别增高10 6 1 5 4%、982 6 9%和 71 4 3% ,较Pro组分别增高 5 6
- 李世成王启荣杨则宜李跃纲贺凤陈志民艾华李肃反
- 关键词：活性肽小肠吸收氨基肽酶氮代谢
- p53在苯并[a]芘诱导所致p21和细胞周期蛋白改变中的作用被引量：2
- 2014年
- 目的探讨在苯并[a]芘(B[a]P)诱导的人胚肺成纤维细胞(HELF)中p53蛋白对p21、cyclin D1和CDK4蛋白间相互作用的影响。方法向转染p53小干扰RNA(p53siRNA)质粒的HELF细胞即p53-H细胞组、载体CMV的HELF细胞即HELF/CMV细胞组中分别加入2μmol/L B[a]P作用24 h,向p53化学抑制剂Pifithrin-α(PFT-α)组即HELF/CMV+PFT-α细胞组中同时加入2μmol/L B[a]P和20μmol/L PFT-α作用24 h,各组同时设立不做任何处理的对照组。用免疫印迹(Western blot)法检测细胞中p53、p53-ser20以及p21、cyclin D1和CDK4蛋白水平的变化,同时利用免疫沉淀方法分析p53蛋白对p21、cyclin D1以及CDK4蛋白间相互作用的影响。结果利用PFT-α或p53 siRNA技术抑制p53蛋白后,B[a]P诱导的p53蛋白20位丝氨酸磷酸化水平和p21蛋白水平的增高受抑制,B[a]P诱导的cyclin D1水平的增加不受影响,CDK4的水平不受B[a]P的影响;免疫沉淀实验结果表明,B[a]P引起的p21和CDK4结合的增加受到抑制,B[a]P引起的p21与cyclin D1结合的增加不受影响,cyclin D1和CDK4的结合不受B[a]P的影响。结论B[a]P通过p53-ser20影响人胚肺成纤维细胞p21和CDK4的结合。
- 张夏男李跃纲贾效伟刘秉慈叶萌
- 关键词：苯并[A]芘P53细胞周期调控蛋白免疫沉淀
- 铜蓝蛋白在石英诱导的JNK/ERK/AP-1信号通路改变中的作用被引量：4
- 2014年
- 目的探讨铜蓝蛋白(Cp)在石英诱导的人胚肺成纤维细胞(HELF)中JNK/ERK/AP-1信号通路改变中的作用。方法分别在100μg/ml石英作用前1 h、同时和作用后1h加入30μg/ml Cp,同时设立单独用石英和单独用Cp处理以及不做任何处理的细胞组,刺激细胞24 h后,用噻唑蓝(MTT)比色法观察Cp对石英诱导的HELF细胞增殖的影响。用100μg/ml石英分别作用于HELF细胞、转染JNK显性失活突变体质粒的HELF细胞(DN-JNK)和转染ERK显性失活突变体质粒的HELF细胞(DN-ERK)24 h;用100μg/ml石英作用1 h后,加入30μg/ml Cp作用24 h;同时设立不做任何处理的对照组。用MTT法检测分别抑制JNK和ERK后对细胞增殖的影响;用蛋白免疫印迹(Western blotting)实验检测JNK、ERK、c-Jun、c-Fos及其磷酸化水平的改变。结果石英作用1 h后加入Cp,对石英诱导的细胞增殖有促进作用,后续的实验选择这种作用模式。Cp可以明显增加JNK、ERK蛋白及磷酸化ERK(pERK)、磷酸化JNK(p-JNK)、磷酸化c-Jun(p-c-Jun)和磷酸化c-Fos(p-c-Fos)蛋白水平。抑制JNK蛋白活性后,Cp诱导的p-JNK、p-c-Jun和p-c-Fos蛋白水平的增加被抑制,Cp、石英以及Cp和石英共同诱导的细胞增殖加快被抑制;抑制ERK蛋白后,Cp诱导的p-ERK和p-c-Fos的增加被抑制,Cp、石英以及Cp和石英共同诱导的细胞增殖加快被抑制。结论 Cp通过JNK/c-Jun和c-Fos及ERK/c-Fos通路进一步增强石英诱导的促细胞增殖作用。
- 叶萌张夏男李跃纲贾效伟刘秉慈
- 关键词：石英铜蓝蛋白丝裂素活化蛋白激酶活化蛋白
- 补充活性肽对大鼠1次离心运动后骨骼肌微细损伤作用的形态学研究被引量：7
- 2006年
- 目的:本研究从形态学角度,观察补充活性肽对大鼠运动后骨骼肌微细损伤的作用。方法:雄性SD大鼠150只,按照补充不同物质(水、大豆分离蛋白和活性肽),运动与不运动,以及运动后0 hr、12 hr2、4 hr和48hr不同时间随机分为15组,所有动物平衡膳食1周后进行实验。运动组大鼠进行持续跑台训练120分钟。实验组和对照组所有动物在平衡膳食期间每天分别以15%活性肽饮料2毫升、15%大豆分离蛋白2毫升和等量的纯净水灌胃。结果:补充活性肽和大豆分离蛋白均可减轻大鼠1次离心运动后骨骼肌微细损伤的形态学改变和超微结构变化,其中活性肽的作用有强于大豆分离蛋白的趋势。
- 李世成李跃纲王启荣杨则宜李肃反
- 关键词：活性肽骨骼肌形态学离心运动
