李艳军
- 作品数：14 被引量：118H指数：7
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：湖北省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- RGD序列肽修饰的丝素蛋白仿生支架材料对骨髓间充质干细胞黏附、增殖的影响被引量：4
- 2007年
- 目的:为了促进种子细胞在韧带组织工程支架材料上的黏附增殖,在丝素薄膜上共价接枝人工合成的具有生物活性的GRGDS序列,并观察RGD多肽修饰的丝素蛋白支架材料对骨髓间充质干细胞的黏附、增殖的影响。方法:实验于2006-07/2007-07在华中科技大学同济医学院协和医院中心实验室和骨科实验室完成。利用市购的白色家蚕蚕丝制备丝素蛋白薄膜,在丝素蛋白支架材料表面接上海吉尔公司合成的RGD多肽,为丝素-RGD组,以未接多肽的丝素蛋白材料和细胞培养板分别作丝素组和阳性对照组。取第3代骨髓间充质干细胞接种到以上材料和培养板上培养4,12 h后,沉淀法定量检测黏附的细胞数检测细胞黏附率;培养1,2,3,4 d后比较材料上的细胞标准化细胞密度来反映细胞的增殖程度;培养24 h后对细胞骨架作免疫荧光染色,在激光共聚焦显微镜下观察两组细胞骨架的组织情况。结果:培养4,12 h时丝素-RGD组细胞黏附率均显著高于丝素组(P<0.01),但与阳性对照组无明显差异(P>0.05)。培养1,2,3,4 d时各组细胞的增殖程度无显著性差异(P>0.05)。培养24 h丝素-RGD组细胞完全铺展开,有粗大的细胞骨架组织,细胞内应力纤维清晰可见,其肌动蛋白的荧光强度显著高于丝素组(P<0.05)。结论:RGD多肽修饰能显著促进骨髓基质细胞在丝素蛋白支架材料上的黏附、铺展,但对细胞增殖无明显促进作用。
- 马亮王洪杨述华邵增务孟春庆段德宇李艳军
- 关键词：RGD骨髓间充质干细胞增殖
- 冷冻同种异体骨软骨移植修复大面积关节软骨缺损的可行性研究被引量：11
- 2007年
- 目的观察冷冻同种异体骨软骨移植修复大面积关节软骨缺损的可行性,为临床应用提供实验依据。方法共选取36只新西兰兔,随机数字表法分成供体组、实验组和对照组,每组12只。供体组制备冷冻同种异体胫骨内侧髁骨软骨移植物后处死;实验组将经程序深低温冷冻保存的同种异体胫骨内侧髁移植;对照组将取下的胫骨内侧髁原位植入。所有实验动物在术后12周处死。应用苏木精-伊红染色观察关节软骨组织的病理学变化,软骨缺损的组织学评分以半定量的改良Wakitani score法评估,内容包括:细胞种类、髓质染色、表面完整性、软骨的厚度、移植软骨在受体周围组织的完整性5个方面,采用0、1、2、3、4评分,最高总分14分。观察两组动物的大体标本、X线片、组织学检查、Waki-tani score评分及免疫组织化学检查结果。结果①移植软骨的大体观察:两组动物关节活动度正常,关节腔无粘连、无积液,实验组移植软骨颜色及高度与周围关节软骨大致相同,关节面较平整,基底部界限模糊。对照组关节软骨面平整、无塌陷,厚度不变。②两组动物关节X线片均见骨折线已模糊,对位、对线良好。③组织学检查:两组动物关节软骨均已被透明软骨覆盖,细胞排列有序,软骨基质大量分泌,未见淋巴细胞和浆细胞浸润。④两组动物关节软骨Wakitani score评分结果无显著性差异,总评分相近(P>0.05)。⑤两组修复软骨Ⅱ型胶原免疫组织化学染色强阳性。结论冻存同种异体骨软骨移植后可完全修复大面积关节软骨缺损,并与自体骨软骨块修复兔的关节软骨缺损在组织学上相近,未见免疫排斥反应。
- 王洪周游李宝兴马亮袁文旗李艳军崔树北
- 关键词：关节软骨同种异体移植
- 单螺旋和3股螺旋蚕丝纤维支架的力学性能及其细胞黏附性能比较被引量：6
- 2007年
- 目的:经蚕茧缫丝脱胶而成的丝状纤维是一种无生理活性的天然结构性蛋白,这种结构使丝状支架具有良好的力学性质和生物相容性。观察采用单螺旋和3股螺旋蚕丝两种不同编织方法制备的丝状支架力学性能和细胞黏附性能的差异。方法:实验于2005-10/2006-05在华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科实验室完成。将蚕丝用不同的编织方法制备单螺旋、3股螺旋两种丝状支架,直径4.5mm。实验方法:①丝状支架的力学检测:两种丝状支架各取10cm置于AGS-H多功能材料力学实验机的夹具中,固定后以10mm/min的速度行拉断试验。②对SD大鼠骨髓基质干细胞分离培养。实验评估:①通过拉断实验测定最大载荷、最大拉伸长度及弹性模量。②对骨髓基质干细胞进行苏木精-伊红染色。③扫描电镜观测骨髓基质干细胞与丝状支架的黏附情况。结果:①力学性能检测结果:单螺旋、3股螺旋两种丝状支架的最大载荷、最大拉伸长度、弹性模量[分别为(870±32),(846±20)N;(14.60±0.85),(13.90±0.64)mm;(6519±287),(6373±375)MPa]差异无显著性意义(P>0.05)。②免疫组织化学鉴定结果:骨髓间充质干细胞的细胞膜抗原CD44有阳性表达,CD34均为阴性表达。③骨髓基质干细胞与丝状支架的黏附情况:两种编织方法的丝状支架的丝状纤维表面均光滑,有较多的骨髓间充质干细胞黏附在丝状纤维上。结论:单螺旋和3股螺旋两种丝状支架的力学性能和细胞黏附性能相近。
- 王洪李艳军杨述华严力军吴宏斌邵增务段德宇孟春庆袁文旗赵玉鑫
- 关键词：蚕丝骨髓基质干细胞生物材料
- 复方七叶皂甙凝胶外敷与关节腔内注射玻璃酸钠治疗膝关节骨性关节炎被引量：4
- 2006年
- 目的:观察复方七叶皂甙凝胶外敷并玻璃酸钠关节内注射治疗膝轻、中度骨性关节炎的临床疗效。方法:选择2003-05/2004-12在华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科门诊就诊符合膝轻、中度骨性关节炎诊断标准的126例患者纳入治疗观察对象,将126例膝骨性关节炎患者随机分为两组。对照组60例,采用单纯膝关节内注射玻璃酸钠(商品名为施沛特,每支含玻璃酸钠20mg,为无色透明的粘稠液体,山东正大福瑞达制药有限公司研制生产,批号:200201171,200306253)治疗,1周1次,连续5次为1疗程。观察组66例,在对照组治疗的基础上配合复方七叶皂甙凝胶(商品名利百素,主要成分是二乙胺水杨酸和七叶皂甙,德国马博士大药厂,批号:D0328674,D0328675)外敷治疗,即用复方七叶皂甙凝胶3g均匀外涂于患侧膝关节处皮肤,4次/d,疗程为5周。全部患者随访时间为6～10个月,平均8个月。根据膝关节综合评分表,进行两组患者治疗前、后膝关节功能综合评分和治疗后两组之间的疗效对比。结果:纳入126例,均进入结果分析。①对照组和观察组膝关节评分值治疗后均较治疗前显著降低(5.63,11.23;2.96,11.51;t=12.965,25.432,P<0.05),且治疗后评分值观察组低于对照组(t=-0.517,4.977,P<0.05)。②对照组治疗后优16例,良20例,可16例,差8例,优良率为60.0%(36/60例);观察组治疗后优30例,良23例,可10例,差3例,优良率为80.3%(53/66例),观察组优良率显著高于对照组(χ2=6.246,P<0.05)。结论:关节内复方七叶皂甙凝胶外敷配合注射玻璃酸钠是一种治疗膝关节骨性关节炎简单有效的治疗措施,对膝轻、中度骨性关节炎的治疗效果较好,其临床疗效优于单用膝关节内注射玻璃酸钠者。
- 王洪袁文旗赵玉鑫李艳军
- 关键词：膝关节关节内透明质酸
- 半月板纤维软骨细胞与小肠黏膜下层相容性的研究被引量：4
- 2007年
- 严重的半月板损伤需要进行半月板的移植，防止膝关节的退行性变。我们以猪小肠黏膜下层（SIS）作为支架材料，通过观察兔半月板纤维软骨细胞在此载体中的生长、增殖情况，评价SIS的生物相容性，为应用SIS作为支架材料构建组织工程半月板提供实验依据。
- 王洪赵玉鑫杨述华袁文旗李艳军朱长谋
- 关键词：半月板损伤小肠黏膜下层纤维软骨细胞构建组织工程退行性变SIS
- 关节镜下可吸收螺钉固定腘绳肌重建前交叉韧带疗效评价被引量：12
- 2006年
- 目的 评价关节镜下可吸收螺钉固定胭绳肌腱重建膝关节前交叉韧带（ACL）的效果。方法 27例患者（27膝）经关节镜检查证实均为ACL断裂，采用关节镜下自体胭绳肌重建ACL，生物可吸收螺钉解剖位固定重建韧带。结果所有病例均得到随访，时间6～24个月，均无术中、术后并发症，切口均一期愈合。IKDC综合评定：术前异常10例、严重异常17例，术后正常9例、接近正常16例、异常2例。Lysholm膝关节功能评分：由术前33—60分（平均45．7分）提高至83～96分（平均90．3分），差异有显著性（P〈0．05）。结论 关节镜下可吸收螺钉固定自体胭绳肌腱重建ACL手术创伤小、固定确实、操作简捷，近期疗效满意。
- 赵玉鑫王洪袁文旗李艳军朱长谋杨述华
- 关键词：关节镜检查可吸收螺钉胭绳肌
- 三维丝素支架材料制备及其与骨髓间充质干细胞的生物相容性被引量：19
- 2007年
- 目的:成为组织工程合适的三维支架材料,关键在于支架材料与骨髓间充质干细胞的生物相容性,实验应用天然高分子材料丝纤维制备三维丝素蛋白支架材料,并探索其方法的可行性。方法:实验于2006-07/2007-06在华中科技大学同济医学院协和医院中心实验室和骨科实验室完成。①用全物理相过程制备三维疏松多孔的丝素蛋白支架材料,将鼠骨髓骨髓间充质干细胞与上述载体材料体外复合培养。②观察指标:应用倒置显微镜、扫描电镜观察细胞与材料复合生长情况;复合培养1周后流式细胞仪检测细胞周期了解材料有无致畸性;在培养第2,4,6,8天用MTT法测定细胞增殖情况;诱导培养条件下在第2,4,6,8天测定碱性磷酸酶活性,了解材料对骨髓间充质干细胞分化的影响。结果:①倒置相差显微镜和扫描电镜观察显示材料为疏松多孔结构,孔隙大小较均一,骨髓间充质干细胞能在材料上良好地黏附、增殖和生长。②复合培养条件后流式细胞仪检测显示细胞周期未受材料的影响,未检测到有异倍体细胞。③MTT法检测显示细胞增殖未受材料的影响,诱导培养条件下检测碱性磷酸酶活性显示其未受到材料的影响结论:用全物理相过程可初步制备具有良好的生物相容性和较好孔隙率的三维疏松多孔的天然支架材料,其有望作为组织工程理想支架材料。
- 马亮王洪李艳军周游
- 关键词：丝素蛋白生物相容性
- 关节镜下可吸收螺钉固定腘绳肌重建膝后交叉韧带的疗效评价被引量：7
- 2007年
- 目的探讨关节镜下可吸收螺钉固定腘绳肌腱单束重建膝后交叉韧带（posterior erueiate ligament，PCL）的效果。方法2004年4月-2005年4月，我院25例（25膝）经关节镜检查证实为PCL断裂，在关节镜下行自体腘绳肌腱单束PCL重建术，生物可吸收挤压螺钉解剖位固定重建韧带。结果手术时间平均90min（80—100min）。25例膝术毕PCL重建后后抽屉试验均为阴性。术后住院时间7—14d，平均10．4d。25例术后随访12—24个月，平均18个月，23例膝后抽屉试验阴性，2例后抽屉试验1级。术后12个月Lysholm膝关节功能评分由术前（44．8±8．1）分提高至（77．8±6．4）分（t=-15．999，P=0．000）。按国际膝关节文件编制委员会膝关节标准评价膝关节功能分级，术前异常（C级）10例、显著异常（D级）15例，随访时正常（A级）8例、接近正常（B级）15例、异常（C级）2例（Z=一4．394，P=0．000）。结论关节镜下可吸收螺钉固定自体腘绳肌腱单束重建膝PCL创伤小，固定可靠，手术操作简单，术后膝关节功能恢复效果好。
- 王洪杨述华邵增务孟春庆段德宇李艳军张青松严力军杜靖远
- 关键词：后交叉韧带关节镜可吸收螺钉
- 黄芪关节腔内注射后兔骨关节炎模型软骨退行性变及滑膜组织中超氧化物歧化酶活性的变化被引量：24
- 2006年
- 目的:观察关节腔内注射黄芪后,对兔前交叉韧带切断骨关节炎模型中软骨退行性变以及滑膜组织中超氧化物歧化酶活性与丙二醛含量的影响。方法:实验于2005-08/2006-02在华中科技大学同济医学院附属协和医院动物实验中心完成。①选用成年日本大白兔16只,随机数字表法分为模型对照组、黄芪治疗组,8只/组。②两组兔均行单侧前交叉韧带切断术建立骨关节炎模型。黄芪治疗组于术后1周开始,关节内注射黄芪0.3mL/次,1次/周,连续6周。模型对照组于同一时间点关节内注射0.3mL生理盐水。③术后第7周处死两组动物,采用关节软骨病理改变评分(0～4分,分数越高病理变化越严重)对比观察两组兔股骨髁关节软骨的大体变化;采用关节软骨退行性变Mankin’s评分(包括软骨结构、软骨细胞、臧红O染色、潮线的完整性4个指标)对比观察光镜下两组兔关节软骨的退行性变情况;并检测滑膜组织中超氧化物歧化酶活性与丙二醛含量。结果:16只兔均进入结果分析。①术后第7周关节软骨病理改变评分结果:黄芪治疗组软骨退行性变评分明显低于模型对照组(z=-2.595,P<0.05)。②术后第7周关节软骨退行性变Mankin’s评分结果:黄芪治疗组明显低于模型对照组[(5.9±1.46),(8.8±1.39)分,t=-4.039,P<0.05]。③术后两组滑膜组织超氧化物歧化酶活性及丙二醛含量的比较:与模型对照组比较,黄芪治疗组超氧化物歧化酶活性明显升高(t=8.206,P<0.05),而丙二醛含量明显降低(t=-4.039,P<0.05)。结论:黄芪能明显降低软骨退行性变的程度,并增加骨关节炎滑膜组织中超氧化物歧化酶的活性,减少丙二醛的含量,有可能成为防治骨关节炎的良好药物。
- 袁文旗王洪赵玉鑫李艳军
- 关键词：骨关节炎软骨
- 三七总皂甙对大鼠脊髓损伤后iNOS表达及细胞凋亡的影响被引量：7
- 2006年
- 目的探讨大鼠脊髓损伤后应用三七总皂甙对诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达及细胞凋亡的影响。方法采用Allen’s法将64,只成年SD大鼠造成脊髓中度损伤模型,再随机分为损伤组和三七总皂甙组,分别给予生理盐水及三七总皂甙注射液治疗,损伤后不同时间点(1、3、7、14d)处死大鼠,用HE染色观察损伤脊髓组织病理变化,用免疫组化染色检测iNOS阳性细胞,原位末端标记法(TUNEL法)标记凋亡细胞。结果HE染色镜检发现脊髓组织病理学改变三七总皂甙组明显轻于损伤组;两组均发现iNOS表达及凋亡细胞,且损伤组iNOS表达及神经细胞凋亡指数均高于三七总皂甙组(P<0．05)。结论三七总皂甙注射液能抑制脊髓损伤后iNOS表达及神经细胞凋亡。
- 赵玉鑫王洪杨述华袁文旗李艳军
- 关键词：脊髓损伤三七总皂甙诱导型一氧化氮合酶凋亡
