李琪佳 作品数:97 被引量:509 H指数:12 供职机构: 华北理工大学 更多>> 发文基金: 河北省教育厅科研基金 国家科技支撑计划 河北省医学科学研究重点课题 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
国产多孔钽材料兔竖脊肌植入组织学及生物学效应 被引量:8 2014年 目的:观察国产多孔钽材料的三维孔隙结构以及兔竖脊肌植入后组织形态学特点,对其组织相容性进行评价,为临床骨缺损修复重建提供实验依据。方法:扫描电镜观察国产多孔钽结构;成年新西兰大白兔24只,建立多孔钽兔竖脊肌植入动物模型。将2枚直径1.5 cm。厚0.2 cm圆型多孔钽植入脊柱一侧竖脊肌内(实验组),对侧植入同等数量及体积的多孔钛(对照组)。于术后2。4。8。12 周处死行硬组织切片观察肌肉周围纤维包膜及新生血管形成,并计算小血管生成数量;扫描电镜观察肌肉组织在两种材料内的生长状态。结果:扫描电镜观察多孔钽具有三维立体多孔结构,孔隙直径在400-600 μm;肌肉及纤维组织早期在多孔钽表面及孔隙内生长;晚期胶原纤维延展,相互连接并充满孔隙。硬组织切片显示:随时间的延长多孔钽-肌肉界面形成薄而致密的血管化包膜。孔隙内充满肌肉。纤维组织及小血管。结论:国产多孔钽材料具有良好的组织相容性,其三维结构可使肌肉组织在表面及孔隙内生长及延伸,有可能成为骨缺损修复材料。 甘洪全 刘鑫 赵济华 耿丽鑫 王茜 王志强 李琪佳关键词:组织相容性 组织工程学血小板裂解液促进骨重建实验研究 被引量:2 2009年 目的探讨组织工程学血小板裂解液(PL)对骨重建的干预效应。方法将制备的同种异体PL、同种异体脱钙骨颗粒(ADBG)与I型胶原凝胶(collagen type I,CG)复合构建重组合材料后,取成年健康Wistar大鼠30只,制双侧股骨髁缺损,分A、B、C3组(10只/组),分别植入等量PL/ADBG/CG、ADBG/CG和CG,移植4周时经放射学、组织学及组织形态计量学、生物力学和免疫学检测,评价骨缺损的重建效果。结果(1)X线显示A组修复区阻射影密度接近正常骨质,骨密度计量分析显示A组(4.2±1.0),显著高于B(2.4±0.9)和C组(1.1±0.5),差异有统计学意义(P〈0.01);(2)组织学观察发现A组修复区有较多新生骨或移植骨片成活,无明显的淋巴细胞浸润,成骨活动和移植骨片破骨细胞性骨吸收均较B和C组明显活跃;形态计量分析显示A组单个视野的成骨面积(286.7±17.2)显著大于B(94.3±33.6)和C组(19.1±14.5),差异有统计学意义(P〈0.01);(3)抗压生物力学测试结果:破断载荷A、B、C、正常对照组分别为(259.6±34.6)、(187.9±21.1)、(91.3±26.6)、(311.94±82.4);破断能量A、B、C分别为(10.8±1.4)、(7.8±0.9)、(3.8±1.1)和(13.0±3.4);破断载荷和能量A组均显著高于B和C组,但低于正常对照,差异有统计学意义(P〈0.01);(4)三色流式细胞术分析显示,T细胞亚群CD3^+CD4^+CD8^-、CD3^+CD8^+CD4^-和CD4/CD8在各组间差异均无统计学意义(均P〉0.05)。结论组织工程学PL(PL/ADBG/CG)可加速骨缺损再生修复,并促进异体骨移植后骨吸收,从而加速骨整合重建。 宋会平 王志强 李琪佳 李宝兴 白俊清关键词:骨重建 血小板 骨关节炎患者膝关节软骨和滑膜中p38MAPK、NF-κB的表达及其意义 被引量:13 2013年 ①目的探讨骨关节炎(Osteoarthritis,OA)中p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)、核转录因子-κB(NF-κB)蛋白的表达及其意义。②方法采用免疫组织化学技术检测60例OA患者及20例正常对照组膝关节软骨与滑膜中磷酸化p38(P-p38)、NF-κB p65的表达,并进行相关性分析。③结果 P-p38、NF-κBp65蛋白在实验组阳性表达的积分光密度(IOD)值均显著高于正常对照组(P<0.01),实验组P-p38及NF-κB p65蛋白表达成正相关(r=0.426,P<0.01)。④结论 p38MAPK及NF-κB信号转导通路在OA关节软骨和滑膜细胞中被激活,P-p38的高表达可能促进了NF-κB的表达,二者对OA的发生发展起重要作用。 郭静 勾向博 张文丽 李琪佳 王志强关键词:骨关节炎 P38丝裂原活化蛋白激酶 核转录因子-ΚB 医用多孔钽材料对大鼠软骨细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响 被引量:3 2014年 [目的]观察国产多孔钽材料对大鼠软骨细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响,为其作为软骨组织工程支架材料临床应用提供实验依据。[方法]选用3周龄SD大鼠双侧股骨头、膝关节分离软骨组织,经Ⅱ型胶原酶消化,饱和湿度培养,传代。倒置显微镜下逐日观察细胞生长状态。待第2代细胞生长至80%左右时,通过甲苯胺蓝染色、番红O-固绿染色以及Ⅱ型胶原免疫细胞化学染色进行软骨细胞鉴定。以F12-DMEM为浸提介质分别制备100%、50%、25%多孔钽浸提液,软骨细胞加不同浓度多孔钽浸提液作为实验组,未加浸提液的软骨细胞作为对照组;MTr法检测多孔钽浸提液对软骨细胞增殖的影响及细胞毒性检测。将第2代软骨细胞接种到多孔钽支架上进行体外三维培养,而对照组是将软骨细胞接种到无支架的培养板上,倒置相差显微镜观察两组软骨细胞生长状态;胰酶消化复合于材料上的软骨细胞,流式细胞仪检测软骨细胞的细胞周期变化及细胞凋亡。[结果]软骨细胞接种初期大小不等,呈圆形悬浮于培养液中,24h后贴壁细胞伸展呈三角形、多角形等。第7—-9d待细胞生长呈现融合时即可传代。甲苯胺蓝染色显示软骨细胞胞浆内可见蓝紫色颗粒,番红O-固绿染色显示胞浆呈绿色、细胞核呈紫红色,Ⅱ型胶原免疫细胞化学染色显示阳性信号位于胞浆及部分胞膜,以上方法证实了分离培养的细胞为软骨细胞;bwr法检测显示随着培养时间的延长,各浓度浸提液组细胞生长与对照组无明显差异,软骨细胞形态正常,贴壁增殖良好,相同时间点不同浓度的浸提液与对照组间细胞增殖差异无统计学意义(P〉0.05),提示软骨细胞在多孔钽浸提液中生长、增殖状态良好且多孔钽材料无毒性。多孔钽支架材料外观灰色光亮,表面及断面可见分布均匀的蜂窝状孔隙,� 张岭 李琪佳 甘洪全 刘英杰 王志强关键词:细胞周期 凋亡 软骨组织工程 免疫复合物IgG及补体C_(3c)在溃疡性结肠炎免疫发病机制中的作用 被引量:23 2001年 目的揭示溃疡性结肠炎免疫学发病新观点。方法检测 5 0例溃疡性结肠炎结肠粘膜活检标本 (32例活动期 ,18例非活动期 )及5例对照组的免疫复合物 Ig G与补体 C3c。结果免疫复合物及补体同时在粘膜上皮下及小血管壁基底膜沉积 ,在活动期较非活动期明显增强。结论免疫复合物和补体的活化与溃疡性结肠炎的活动性密切相关 ,为溃疡性结肠炎活动期组织损伤的重要参与者 。 李琪佳 徐敏 张雪怡 宫恩聪关键词:溃疡性结肠炎 免疫复合物 补体 免疫学发病机制 新型骨植入材料多孔钽-骨结合界面成骨以及相关成骨因子的表达及意义 被引量:5 2017年 背景:具有自主知识产权的国产多孔钽材料具有无毒性及良好的生物相容性,前期体内外实验研究得出结论:国产多孔钽无毒性,具有良好的生物相容性,具有促成骨作用。此次实验是多孔钽-骨界面成骨机制的探讨。目的:观察多孔钽兔股骨植入后钽-骨结合界面成骨形态特点及成骨相关因子整合素β1及纤维粘连蛋白的表达,探讨多孔钽骨内植入钽-骨界面骨整合的生物学机制。方法:实验采用自身对照方法,取日本大耳白兔制备双侧股骨髁骨缺损模型,同一动物左侧股骨内植入多孔钽棒为实验组,右侧股骨内植入异体骨为对照组。术后2,4,8周于骨缺损部位取材,石蜡切片、硬组织切片光镜观察多孔钽与宿主骨交界处成骨形态特点;扫描电镜观察多孔钽-骨界面成骨特征;免疫组织化学检测整合素β1及纤维粘连蛋白的表达。结果与结论:(1)多孔钽棒植入后与宿主骨结合紧密。石蜡切片苏木精-伊红染色结果显示:界面纤维膜早期疏松、较厚,晚期致密较薄,界面出现片状成骨;(2)硬组织切片观察:2周时钽-骨界面已出现新生骨及小血管并向孔隙内生长;4、8周时钽-宿主骨界面新生骨增多并与宿主骨连接成片,骨小梁成熟;(3)扫描电镜下可见成骨细胞在多孔钽表面及孔隙内生长,晚期骨质成熟并见板层骨;(4)免疫组化结果显示:多孔钽骨植入2周时实验组整合素β1的表达显著低于对照组(P<0.05);而纤维粘连蛋白的表达在两组之间比较差异均无显著性意义(P>0.05);整合素及纤维粘连蛋白的表达在2,4,8周时均呈递减趋势;(5)结论:多孔钽有利于成骨细胞在其表面及孔隙内黏附,整合素β1及纤维粘连蛋白在成骨初期钽-骨界面表达增高,可能对早期成骨起促进作用,而在骨成熟期表达则降低,有利于骨整合及改建。 赖振权 崔逸爽 陈超 周国龙 潘祥宇 王茜 甘洪全 王志强 李琪佳关键词:生物材料 纤维粘连蛋白 成骨 溃疡性结肠炎黏膜的白细胞亚群和肿瘤坏死因子-α的表达 被引量:39 2001年 目的 :揭示溃疡性结肠炎 (UC)结肠黏膜肿瘤坏死因子 α(TNF α)的表达以及与溃疡性结肠炎不同时期浸润的炎细胞免疫表型之间的关系。方法 :应用抗T淋巴细胞 (CD45RO)、抗B淋巴细胞 (CD2 0 )、抗巨噬细胞 (CD68)表面抗原的单克隆抗体 ,对 5 0例溃疡性结肠炎结肠黏膜活检标本 (32例活动期 ,18例非活动期 )及 5例癌旁正常组织作为对照进行了淋巴细胞亚型分析 ,应用原位杂交技术 ,对上述病例进行了TNF α的检测分析。结果 :T淋巴细胞数量在活动期高于非活动期及对照组 (P <0 0 1)。而固有层内B淋巴细胞数量在三组之间差异无显著性。巨噬细胞的数量在活动期高于非活动期及正常对照组 (P <0 0 1)。细胞因子TNF αmRNA的表达在活动期高于非活动期。结论 :TNF α在溃疡性结肠炎发病机制中起到了重要作用。其可作为炎症介质 ,介导结肠黏膜的病理性损伤。 李琪佳 宫恩聪 刘叔平 鄂文关键词:溃疡性结肠炎 肿瘤坏死因子 淋巴细胞亚型 TNFΑ 温敏性高黏度几丁聚糖水凝胶复合脱钙骨基质修复兔膝全层软骨缺损的初步研究 被引量:1 2008年 目的将高黏度几丁聚糖水凝胶(high viscous chitosan/glycerol phosphate,HV-C/GP)与异体脱钙骨基质(demineralized bone matrix,DBM)颗粒复合,评估修复兔膝全层软骨缺损的效果。方法将HV-C/GP与DBM按2∶1(W/W)复合,制备HV-C/GP-DBM复合物。取成年健康34周龄新西兰大白兔24只,体重3.5~4.5kg,于两侧股骨髁间窝制备直径为3.5mm、深度为3mm的软骨全层缺损区。右侧缺损区植入HV-C/GP-DBM复合物作为实验组;左侧不作处理,作为对照组。术后4、8、16周,分别处死动物取材,行大体及组织学观察。根据国际软骨修复协会组织学评分(International Cartilage Repair Society Histological Scoring,ICRS)标准对第16周标本评分,评估软骨修复效果。结果大体及组织学观察:术后4、8周,实验组缺损区大部分被透明软骨样组织修复,DBM颗粒部分吸收;对照组缺损区可见少量纤维组织及软骨细胞;术后16周,实验组6例关节表面平滑,缺损区已基本被透明软骨样软骨组织修复,缺损区与周围软骨整合较好,新骨形成活跃,部分DBM颗粒未被爬行替代;对照组仍存在凹陷,修复组织为纤维组织。术后16周ICRS评分结果示,实验组的软骨细胞生成以及与周围软骨整合等6个方面均优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论HV-C/GP-DBM复合物组织相容性好,可降解,可注射,是一种较好的软骨修复材料。 井波 王志强 李宝兴 程志山 康悦 李琪佳关键词:脱钙骨基质 软骨缺损 Fas、Bcl-2蛋白在重度子痫前期胎盘滋养叶细胞凋亡的实验研究 被引量:1 2009年 目的探讨凋亡相关蛋白Fas、Bcl-2在胎盘滋养叶细胞中的表达及其意义,滋养叶细胞凋亡与Fas、Bcl-2两种蛋白的关系,从而于细胞凋亡的角度探讨重度子痫前期的发病机制。方法用免疫组织化学SP法检测重度子痫前期患者54例(试验组),同时选择同期正常晚孕妇女20例(对照组)做胎盘组织中Fas、Bcl-2蛋白的表达及滋养叶细胞凋亡检测。结果细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Fas在重度子痫前期及正常孕妇胎盘组织中均有表达。其中Bcl-2蛋白的表达在试验组低于对照组(P<0.05);而Fas蛋白的表达在试验组明显高于对照组(P<0.05);在试验组及对照组均可观察到细胞凋亡现象,在滋养层细胞(合体细胞滋养层及细胞滋养层)、间质细胞、血管内皮细胞胞浆及细胞核内均有表达,尤以合体细胞最多见。试验组细胞凋亡较对照组明显增多(P<0.05)。重度子痫前期时,Bcl-2与Fas蛋白的表达呈负性相关;Bcl-2蛋白表达与胎盘细胞凋亡呈负性相关,而Fas蛋白的表达与胎盘细胞凋亡呈正性相关(P<0.01)。结论重度子痫前期的发病原因可能与胎盘滋养叶细胞凋亡及Bcl-2、Fas基因异常表达有关。 刘颖新 李琪佳 程曼 袁鸿 冯雪梅 陈玲玲关键词:重度子痫前期 细胞凋亡 BCL-2 FAS 大鼠创伤性股骨头坏死进程中GPR48的表达研究 被引量:3 2013年 目的探讨大鼠创伤性股骨头坏死进程中骨软骨G蛋白偶联受体-48(g protein coupledreceptor,GPR48)的表达变化,为进一步理解创伤性股骨头坏死的分子机制提供新线索。方法 6个月龄SD大鼠33只,随机分实验组(24只)和对照组(9只)。实验组采用圆韧带离断结合骨膜剥离切除术,对照组采用假手术作为对照。术后1、2和4周时收集股骨头,通过大体、组织学及Masson染色,观察股骨头坏死进程;用免疫组织化学、RT-PCR、图像分析等方法检测股骨头坏死过程中GPR48表达变化。结果 (1)大体标本观察发现,与对照组相比,实验组1、2周股骨头关节软骨表面略显粗糙,4周时关节软骨出现不同程度的虫蚀样破损。X线片结果显示,实验组1、2周大鼠股骨头改变较轻微,4周时出现密度减低区,骨小梁排列紊乱。HE染色结果显示,实验组1、2周部分关节标本软骨表面出现破裂、剥脱;4周时坏死集中在软骨下骨和骺软骨区,但同时可见坏死小梁周围局部成骨细胞活跃迹象,并有少量新生骨形成;3个时间点实验组骨小梁内空骨陷窝率均高于假手术组,并随时间延长呈逐渐升高的趋势,差异有统计学意义(P<0.05)。Masson染色结果显示实验组1、2周时胶原含量下降,骨小梁欠规则;4周骨小梁稀疏、断裂,胶原含量明显减少。(2)免疫组化结果显示,实验组3个时间点GPR48表达量(IOD值)逐渐增加,但均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)RT-PCR分析结果显示,实验组3个时间点GPR48 mRNA表达量逐渐增加,但均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论创伤性股骨头坏死发展进程中,GPR48表达下降,但随坏死进程而逐渐增加,可能与骨坏死后的局部修复有关。 宋会平 王志强 毕若杰 李琪佳关键词:创伤性股骨头坏死 RECEPTOR MASSON RT-PCR G蛋白偶联受体 PROTEIN