李波 作品数:55 被引量:217 H指数:9 供职机构: 新疆农业大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 新疆维吾尔自治区高技术研究发展计划项目 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 文化科学 自动化与计算机技术 更多>>
棉花咖啡酸-O-甲基转移酶基因(GhCOMT)的克隆、表达及功能分析 棉花纤维是从胚珠外表皮细胞分化而来的单细胞,是纺织工业的重要原料,具有重要的经济价值。棉花体内通过苯丙氨酸途径进入木质素特异途径合成木质素,这条代谢途径涉及许多酶的参与,其中咖啡酸-O-甲基转移酶(caffeic aci... 李波关键词:棉纤维 原核表达 GUS基因 干旱处理对不同棉花材料SOD,CAT,MDA的影响 被引量:15 2008年 将28份不同的棉花材料,分别种植于干旱处理、对照(正常浇水)条件下,试验设2次重复。分别于苗期和开花期测定了干旱处理、正常浇水条件下28份棉花材料的超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化氢酶(CAT)活性、丙二醛(MDA)含量的变化。结果表明,干旱处理后,28份棉花材料叶片的SOD,CAT,MDA均发生了变化,经3项生理指标的综合分析并结合28个棉花材料的抗旱性表现,筛选出具有较强抗旱能力的棉花材料为红叶白絮、红叶棉、硕丰1号、新陆早1号;不抗旱的棉花材料有:石阳1号、库车96518和新炮1号。 于健 陈全家 李波 贺雅婷 高文伟 曲延英关键词:棉花 干旱处理 开花期 生理生化指标 棉花肉桂醇脱氢酶基因GhCAD3的克隆及原核表达 被引量:11 2010年 肉桂醇脱氢酶(CAD)是木质素生物合成过程中的一个关键酶类。本研究从棉花中克隆了一个CAD基因,命名为GhCAD3(GenBank登录号为FJ376601)。GhCAD3全长1573 bp,具有1个1080 bp的开放阅读框,5′非编码区为35 bp,3′非编码区为458 bp,编码359个氨基酸,预测分子量约为39.116kD,等电点为7.48。氨基酸同源性分析发现,GhCAD3与其他CAD一致性为64.13%。为了进一步研究GhCAD3基因的功能,构建了该基因的原核表达载体pET-28a-CAD3,经酶切鉴定后转化到大肠杆菌BL21(DE3)中。SDS-PAGE电泳分析表明,最佳诱导表达条件为0.5 mmol/L IPTG在37℃下诱导7 h。 倪志勇 李波 范玲关键词:棉花 肉桂醇脱氢酶 原核表达 棉花转基因“喷花法”应用条件优化的研究 被引量:1 2013年 针对目前众多的棉花转基因方法存在转化过程复杂、成本高、效率较低等问题,实验对转基因方法一“喷花法”进行优化,明确了在棉花育种科研中应用条件,达到快速、高效转化外源基因的目的。实验选用了5个陆地棉品种(系)和2个海岛棉品种为转化受体材料,转化了2个外源基因-抗虫(Bt+CpTI)和增强纤维品质基因(NPTII-GhCAD6),并对转化时等渗液各成分的比例、转化的时间段、温度及湿度条件等因素对转化率的影响进行研究。结果表明,转化效率最高时等渗液各成分的含量:陆地棉为1/2MS+10%蔗糖+0.5g/LMES+0.01mg/L6-BA+200μl//L表面活性剂,pH=6菌株浓度OD600=0.5;海岛棉为1/2MS+15%蔗糖+0.5g/LMES+0.01mg/L6-BA+200μl/L表面活性剂,pH=6菌株浓度OD600=0.5;转化效率最高时转化的时间段为11:00—13130,相应的温度为22~29℃、湿度为70%-85%;转化后的哟代受体材料,首先在田间进行抗生素检测,然后在获得的阳性植株中,转抗虫基因材料用金标BT-CryIAb/Ac试纸条定性检测,转纤维品质基因材料做PCR电泳检测,经检测最终获得了一批转基因阳性植株。最终建立一种应用在农业育种科研中大批量、高效快速、简易实用的转基因方法。 聂新辉 尤春源 雷江荣 杨洋 李波 李晓东 吕军 冯国礼 孔杰 张大伟关键词:棉花 转基因 棉花SNC2基因的克隆及表达分析 2017年 以陆地棉(Gossypium hirsutum)TM-1为材料,利用同源克隆技术从棉花中分离出SNC2基因,以actin基因为内参,采用半定量RT-PCR分析该基因在棉花组织中的表达,并采用实时定量RT-PCR分析不同棉花品种经大丽轮枝菌侵染后,SNC2基因在不同时段、不同组织的表达水平。研究分析发现该基因CDS序列长度为1 308 bp,编码435个氨基酸,蛋白的等电点(p I)为6.98,理论分子量为46.93 k D,命名为SNC2,Gen Bank登录号为AOO35322.1,SNC2基因编码多肽链中包含信号肽和跨膜结构域,且亚细胞定位于质膜,编码受体类蛋白。组织表达分析显示SNC2基因在根、侧根、茎、叶和花中均有表达,茎中的表达量较高,而在苞片组织中基本不表达。该基因在接菌后的感病品种军棉1号的根和耐病品种中棉49号的茎中呈现不断上升的趋势,而在两个棉花品种的其他组织中呈现出"升-降-升"的趋势,且在不同抗性的棉花品种中的表达存在差异,暗示SNC2基因可能在不同抗性品种抵御生物胁迫过程中扮演重要角色,研究结果为进一步研究SNC2基因的功能及应用该基因提供帮助。 陈方圆 王冬梅 李波 胡文冉 杨洋 李晓荣 范玲关键词:棉花 基因克隆 实时荧光定量 新疆节水灌溉现状及其展望 被引量:9 1996年 本研究在总结新疆节水灌溉经验教训的基础上,指出今后新疆节水灌溉的发展方向和研究解决的问题。 赵荣海 李波 张宗友关键词:灌水技术 节水农业 灌溉 棉花GhCOMT3基因的原核表达、纯化及鉴定 被引量:6 2010年 为了深入研究GhCOMT3基因的功能,将GhCOMT3基因构建到原核表达载体pET-28a中,并转化到大肠杆菌BL21(DE3)中。用0.2mmol/L IPTG诱导融合蛋白表达,结果发现,16℃诱导12h、30℃诱导3h和37℃诱导3h后融合蛋白均以包涵体的形式表达;30℃诱导的蛋白表达量最大,之后对包涵体进行变性溶解,进行SDS-PAGE检测,再经过蛋白标记亲和层析柱(His TrapTMHP)纯化得到变性的pET-28a-GhCOMT3融合蛋白,用SDS-PAGE和Western blotting检测纯化效果,鉴定表达产物,目的蛋白相对分子量约为39.119kDa,检测结果与预期一致。结果表明,pET-28a-GhCOMT3蛋白在大肠杆菌中获得了高效表达产物,为在蛋白水平上研究GhCOMT3基因功能奠定了基础。 李波 倪志勇 范玲关键词:原核表达 蛋白纯化 WESTERN BLOTTING 引进陆地棉种质材料纤维品质及农艺性状关联分析 被引量:4 2017年 引进陆地棉(Gossypium hirsutum)种质材料的性状-标记关联分析是发掘其优异基因并在分子标记辅助育种中使用的科学依据。本研究利用199个SSR标记和42个In Del标记对94份国外陆地棉种质材料和27份新疆本地品种的纤维品质和农艺学性状进行全基因组关联分析。遗传结构和Neighbor-Join聚类分析将陆地棉种质群体划分为2个亚群,连锁不平衡分析发现有9.42%的位点组合存在LD(p<0.01,r2≥0.05);基于混合线性模型的关联分析结果显示,能够同时在2个播期检测到的与6个纤维品质性状、4个产量性状和4个农艺性状显著关联的标记位点分别有18个、10个和5个,平均表型变异解释率分别为6.06%(1.17%~13.86%)、4.62%(1.18%~15.28%)和6.75%(1.87%~9.98%)。上述关联位点中共检测到188个等位变异,其中表型效应值大于0.6的优异等位变异有12个。研究结果可进一步用于分子辅助育种,并为基因精细定位提供参考资料。 马君 李波 胡文冉 杨洋关键词:陆地棉 分子标记 棉花纤维中木质素的相对分子量 被引量:4 2017年 分子量是聚合物的重要特性之一,木质素的分子量及其分布是研究苯丙烷类结构的反应、物理化学特性和评价其改性产物质量的内容之一。本研究以陆地棉TM-1成熟纤维为材料,分别利用酶解-温和酸解木质素法和二氧六环法提取棉纤维中木质素,结合凝胶渗透色谱法(gel permeation chromatography,GPC)调查和评价2种方法获得的棉纤维中木质素的相对分子量。结果表明,经二氧六环处理提取的棉花纤维中的木质素(dioxane lignin,DL)的重均分子量为2924g mol^(–1)、数均分子量2403 g mol^(–1),略高于由酶解-温和酸解处理提取的木质素(enzymatic hydrolysis-mild acidolysis lignin,EMAL)的重均分子量(2169 g mol^(–1))和数均分子量(1970 g mol^(–1)),EMAL的多分散系数稍低,说明木质素的均一性比DL高。表明EMAL法提取的木质素更适用于分析棉纤维中木质素的相对分子量。利用EMAL法分析棉纤维中木质素相对分子量表明,不同棉花品种的木质素重均分子量分布范围为938~2169 g mol^(–1),数均分子量分布范围为857~1970 g mol^(–1),多分散性系数在1.09~1.74间,均小于2。重均分子量与纤维马克隆值呈显著负相关,数均分子量与纤维长度呈显著负相关,与纤维马克隆值呈极显著负相关。 胡文冉 范玲 李晓荣 谢丽霞 杨洋 李波 陈方圆关键词:棉花纤维 木质素 凝胶渗透色谱 棉花甲基化酶基因COMT和CCoAOMT的组织特异性表达分析 被引量:11 2010年 本研究利用半定量RT-PCR分析方法探索了陆地棉(Gossypium hirsutum L.)木质素合成途径中甲基化酶基因家族COMT和CCoAOMT在不同组织和不同发育时期纤维中的表达情况。结果表明COMT1,COMT2,COMT3和CCoAOMT1,CCoAOMT2在棉花的7个组织器官(根、茎、叶、子叶、花瓣、雄蕊、胚珠)中都有表达,其中COMT1和CCoAOMT1在各组织中的表达趋势类似,COMT2,COMT3和CCoAOMT2表达趋势各异。在5~25d的棉纤维发育过程中,COMT1和COMT3表达稳定,COMT2表达量逐渐增加。而CCoAOMT基因家族的2个基因的表达量变化相对明显,CCoAOMT1在25d出现表达高峰,CCoAOMT2则在10d和15d呈现高表达量。本研究表明甲基化酶基因家族COMT和CCoAOMT在棉花的根,茎等维管组织中具有相对一致的高表达量,而在其他组织和发育纤维中则呈现出明显的组织特异性和纤维发育时期特异性。 吕萌 倪志勇 王娟 李波 罗淑萍 范玲关键词:组织特异性表达