李思瑾
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
- 供职机构：河北联合大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金河北省青年科技基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 蓝氏贾第鞭毛虫表面抗原与临床诊断的研究进展
- 2012年
- 蓝氏贾第鞭毛虫病简称贾第虫病,由寄生在人体内的蓝氏贾第鞭毛虫感染引起,以腹痛、腹泻和吸收不良为主要症状,在儿童中还能引起吸收不良和发育障碍[1]。蓝氏贾第鞭毛虫病呈全球性分布,在发展中国家和发达国家均有感染病例的报道,本虫世界范围的感染率约为1%～20%,
- 李冀任兴波沈海娥张岸平李思瑾付晓艳
- 关键词：蓝氏贾第鞭毛虫表面抗原
- C2株蓝氏贾第鞭毛虫SUMO特异性蛋白酶基因的克隆、生物信息学分析及其催化活性区的原核表达被引量：1
- 2015年
- 目的克隆C2株蓝氏贾第鞭毛虫(Giardia lamblia,简称贾第虫)的SUMO-Specific Protease(SENP)基因,并对其序列进行生物信息学分析,原核表达贾第虫SENP的催化活性区。方法提取C2株贾第虫基因组DNA,以基因组DNA为模板获得SENP编码区全长片段,连入克隆载体pGM-T,测序后进行生物信息学分析;根据分析结果克隆SENP的催化活性区,构建其原核表达载体pET-28a(+)-SENPc,在E.coli Rosetta(DE3)中诱导表达,SDS-PAGE及Western blot观察表达结果。结果成功克隆了C2株贾第虫SENP编码区全长序列,生物信息学分析显示C2株贾第虫SENP蛋白序列与WB株相同,二级结构以无规则卷曲为主,其催化活性区位于126-497aa,被一段插入序列分割成两个部分;构建了SENP催化活性区原核表达载体并在大肠杆菌中高效表达,在相对分子量约43kD的位置出现目的蛋白条带,与理论值相符。结论成功克隆了贾第虫SENP基因并原核表达了其催化活性区,为贾第虫SENP蛋白功能的研究提供了基础。
- 李少东周英斌刘晓莉禇晗李思瑾田喜凤王洋
- 关键词：蓝氏贾第鞭毛虫原核表达生物信息学
- C2株蓝氏贾第鞭毛虫SUMO基因的克隆、原核表达和生物信息学分析(英文)被引量：1
- 2013年
- 目的克隆、原核表达C2株蓝氏贾第鞭毛虫(Giardia lamblia,简称贾第虫)的小泛素相关修饰物(small ubiquitn-related modifier,SUMO)蛋白,并对其序列进行生物信息学分析。方法提取C2株贾第虫基因组DNA,以基因组DNA为模板PCR获得SUMO基因片段,双酶切连入原核表达载体pET-28a(+),经测序验证并进行生物信息学分析,将重组质粒pET-28a(+)-SUMO转化大肠杆菌Rosetta(DE3)。IPTG诱导后收集菌体,裂解后进行SDS-PAGE及Western blot检测。结果成功构建了C2株贾第虫SUMO基因原核表达载体pET-28a(+)-SUMO,经IPTG诱导后,在大肠杆菌中高效表达,SDSPAGE及Western blot分析显示,在相对分子量约12.7kD的位置出现目的蛋白条带,与理论值相符;生物信息学分析显示C2株贾第虫SUMO序列与WB株相同,其蛋白形成类似"泛素折叠"样结构,进化分析表明贾第虫SUMO蛋白与其它现存真核生物亲缘关系较远。结论成功地克隆、表达了贾第虫SUMO蛋白,明确了该蛋白的空间结构和进化地位,为贾第虫SUMO蛋白抗体的制备及相关蛋白功能的研究提供了基础。
- 王洋王沂李冀李思瑾楚晗田喜凤
- 关键词：蓝氏贾第鞭毛虫生物信息学
