李小平 作品数:12 被引量:53 H指数:3 供职机构: 南开大学生命科学学院植物生物学和生态学系 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 经济管理 电子电信 更多>>
大豆叶片衰老相关的类受体蛋白激酶的分子生物学研究 王宁宁 李小平 李鹏丽 马媛媛 甘睿 张丽文 该课题研究从大豆叶片中克隆了4个衰老相关的类受体蛋白激酶基因的全长cDNA及启动子,对其结构与表达特点进行了系统分析。其中的rlpk2基因编码一个新的LRR型RLK,在大豆叶片自然衰老、人工黑暗诱导衰老和子叶衰老三个系统...关键词:关键词:叶片衰老 类受体蛋白激酶 大豆 大豆类受体蛋白激酶基因RLPK2的功能分析 李小平关键词:植物生态学 衰老 大豆 叶片 利用RNA干扰技术敲减rlpk2基因的表达可以延缓大豆叶片衰老 被引量:20 2005年 叶片衰老是受细胞内部遗传程序控制的、植物叶片发育过程的最后一个阶段,对启动和调控这一过程的分子机制及衰老信号的传递途径的研究具有重要意义.从人工诱导衰老的大豆叶片中克隆到一个新的LRR型类受体蛋白激酶基因rlpk2(GenBank登录号:AY687391),无论在前期人工诱导衰老系统还是叶片自然发育过程中,该基因在大豆叶片中的表达水平都表现出明显的衰老上调趋势.利用RNA干扰技术(RNAinterference,RNAi)“敲减”(knock-down)该基因的表达,可以明显延缓转基因大豆叶片无论自然发育还是营养缺乏胁迫引起的衰老进程,转基因植株叶片具有比较致密的表面结构及较高的叶绿素含量. 李小平 马媛媛 李鹏丽 张丽文 王勇 张韧 王宁宁关键词:RNA干扰技术 叶片衰老 蛋白激酶基因 大豆叶片 衰老进程 植株叶片 大豆类受体蛋白激酶基因GmRLCK的克隆及初步分析(英文) 被引量:1 2006年 植物类受体蛋白激酶(receptor-likeproteinkinase,RLK)在高等植物生长发育和环境刺激的信号传导中起着重要的作用。本文报告了一个新的大豆类受体蛋白激酶基因的全长cDNA克隆及对其基因结构和功能的初步分析。研究表明该基因序列编码的蛋白包含一个跨膜域、一个具有丝氨酸/苏氨酸激酶活性的胞内域和一个缺少N-末端信号肽的胞外域。采用生物信息学方法分析表明,该基因与一些拟南芥菜类受体蛋白激酶基因具有很高的相似性,这些激酶N-末端都缺少信号序列,属于植物胞质类受体激酶(receptor-likecytoplasmickinase,RLCK)亚家族。因此命名该大豆基因为GmRLCK(GenBankAccessionNo.AY687390)。对GmRLCK激酶域中磷酸化可能性较高的位点进行了预测。RT-PCR的结果表明,GmRLCK在大豆子叶、根、花以及豆荚中都有较高的表达,而在胚根、茎和成熟叶片中的表达相对较弱。进化分析表明GmRLCK与一些衰老相关的植物类受体蛋白激酶具有较近的亲缘关系。 李鹏丽 马媛媛 甘睿 张丽文 李小平 王勇 王宁宁关键词:大豆 类受体蛋白激酶 反转录PCR 进化分析 深化国企改革 重塑银企关系 本文首先对银企关系的沿革及现存的问题,进行了深入的剖析,同时,立足于市场经济这一大前提,明确商业银行是企业,揭示了银企关系的本质是信用关系,构建新型银企关系是以产权明晰作为基础的.并结合对以美国、英国为典型代表的'若即若... 李小平关键词:银企关系 国企改革 产权改革 商业银行 文献传递 大豆GmLls1基因的克隆及表达调控分析 被引量:3 2006年 玉米的叶片坏死斑点(lethal leaf-spot 1,Lls1)基因及其拟南芥中的同功能基因已证明编码叶绿素分解代谢中的关键酶脱镁叶绿酸氧化酶(pheide a oxygenase,PaO).为了深入研究大豆叶片衰老过程中叶绿素分解代谢的调控机制,从大豆中克隆了玉米Lls1的同源基因,其cDNA全长1817bp,命名为GmLls1(GenBank登录号:DQ154009).序列分析表明,该基因与拟南芥、玉米、豇豆和番茄等的Lls1及其同功能基因具有很高的同源性,其编码蛋白含有典型的Rieske[2Fe-2S]结构域、非亚铁血红素铁结合域和C-末端CXXC基序,这些都是PaO功能蛋白所具有的典型结构特征.RT-PCR结果显示,在大豆叶片自然衰老、人工黑暗诱导衰老和子叶衰老3个系统中,GmLls1基因都表现出明显的衰老上调趋势.进一步分析发现,在因敲减类受体蛋白激酶rlpk2基因而导致衰老延缓的大豆转基因叶片中,GmLls1的表达显著下降,而在因过表达rlpk2而导致加速衰老的转基因叶片中,GmLls1的转录本积累明显增加,暗示RLPK2介导的信号途径可能参与调控GmLls1在大豆叶片衰老过程中的表达,而rlpk2-RNAi转基因离体叶片光照下表现出lls1突变体典型的斑状失绿坏死表型则进一步支持了上述推论. 李鹏丽 马媛媛 李小平 张丽文 王勇 王宁宁关键词:大豆 叶片衰老 类受体蛋白激酶 一个新的大豆类受体蛋白激酶基因rlpk2的克隆及其结构特征(英文) 2005年 植物类受体蛋白激酶在细胞生长及对环境胁迫反应方面起着非常重要的作用。本文报告用RACE方法(快速扩增cDNA末端)扩增一个新的大豆类受体蛋白激酶基因rlpk2的全长cDNA。根据RACE的结果,我们克隆了rlpk2的cDNA,其序列信息已经提交到GenBank(Accession No.AY687391)。经初步分析,rlpk2编码产物为LRR型类受体蛋白激酶。 李小平 甘睿 马媛媛 李鹏丽 张丽文 王勇 张韧 王宁宁关键词:大豆 末端转移酶 类受体蛋白激酶 快速扩增CDNA末端 大豆叶片衰老相关的类受体蛋白激酶基因的克隆及其结构与功能的初步研究 <正> 衰老是植物叶片发育的最后一个阶段,是一种程序化死亡过程。目前,对衰老发生的分子机制方面的研究主要集中在与蛋白质、核酸、脂降解,以及与氮、碳元素再动员有关的衰老相关基因上,而与衰老发生的信号传递途径相关的基因则鲜有... 宋爽 甘睿 李小平 朱亮基 王淑芳 王勇 王宁宁文献传递 大豆类受体蛋白激酶基因rlpk2启动子克隆及初步分析 被引量:16 2006年 用双链接头介导的基因组DNA步行技术获得了大豆中与衰老相关的类受体蛋白激酶基因rlpk25'侧翼1801bp启动子序列(Prlpk2,GenBank登录号:AY870314)。序列分析结果表明,这一启动子片段中有响应细胞分裂素、脱落酸、赤霉素和生长素等激素作用和响应干旱、寒冷及伤害等逆境胁迫的多个顺式作用元件。构建启动子Prlpk2与报告基因GUS融合基因的双元表达载体pRlpk2-GUS,并通过农杆菌介导法转化大豆幼苗和微型番茄Micro-Tom的子叶外植体,染色结果表明这1801bp的启动子Prlpk2可以有效地驱动GUS基因在大豆幼苗生长点和番茄愈伤组织中瞬时表达。 李鹏丽 马媛媛 李小平 张丽文 王勇 王宁宁关键词:大豆 类受体蛋白激酶 启动子 衰老 大豆类受体蛋白激酶基因(rlpk2)RNAi双元表达载体的构建及其转基因 被引量:13 2006年 植物类受体蛋白激酶(plant receptor-like kinases RLKs)以其特有的结构在植物的生长、发育和防御等多种生理生化过程中发挥着重要的作用。利用RNA干扰技术(RNA interference RNAi)来研究RLKs的功能已日趋成熟。本文根据植物中hpRNA(hairpin RNA)的原理,以大豆类受体蛋白激酶基因rlpk2为靶基因,在rlpk2-cDNA序列3'端选择312bp作为构建RNAi的序列,借助中间克隆载体,经过三次亚克隆,最后形成含rlpk2-RNAi表达盒的双元表达载体pART27-R2,并转入农杆菌LBA4404。采用农杆菌介导大豆子叶节转化方法,共获得了三株转基因植株。转基因植株 RT-PCR分析表明rlpk2基因已被成功敲减(knock-down),并且发现敲减大豆叶片中的rlpk2基因表达明显改善大豆叶片的光合能力,结合前期研究结果,表明rlpk2基因可能在维持叶绿体的结构及保护叶绿体膜系统的完整性方面起负调节作用。 李小平 邓楠 马媛媛 李鹏丽 王勇 张韧 王宁宁关键词:大豆 类受体蛋白激酶 RNAI 双元表达载体