李剑
- 作品数：15 被引量：393H指数：6
- 供职机构：杭州市江干区疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：浙江省医药卫生科学研究基金中盖艾滋病项目杭州市社会发展科研攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 两种核酸检测法在副溶血性弧菌耐热直接溶血素和不耐热溶血毒素中的应用评估被引量：1
- 2016年
- 目的比较CPA-核酸试纸条法与荧光定量PCR法检测副溶血性弧菌(VP)的tlh种特异性基因和tdh毒力基因的灵敏度与特异性。方法采用CPA-核酸试纸条法和荧光定量PCR法同时对655株不同来源的VP菌株进行tlh、tdh基因检测。结果 CPA-核酸试纸条法与荧光定量PCR法检测结果相同,VP菌株的tlh基因检测阳性率均为100%(655/655)。两种方法对tdh基因的检测结果也完全一致,tdh基因临床株与海产品株阳性检测率均分别为95.8%(207/216)与2.27%(10/439)。CPA-核酸试纸条法对tlh、tdh基因检测具有高度特异性,灵敏度可达6.2×103cfu/ml菌液,从核酸制备至完成检测最快仅需1 h。结论 VP临床株与涉水产品分离株普遍携带tlh种特异性基因,而tdh毒力基因主要存在于临床标本而在涉水产品株极少存在,可采用敏感、特异的CPA-核酸试纸条法,做VP腹泻患者的床边诊断以及食物中毒事故现场的快速检测。
- 黄世旺徐昌平方叶珍李剑赵雪琴李琳
- 关键词：副溶血性弧菌TDH
- 双重荧光定量RT-PCR快速检测肠道病毒和水痘-带状疱疹病毒被引量：1
- 2013年
- 目的建立双重荧光定量RT-PCR技术,用于同时快速检测肠道病毒(Enteroviruses,EV)和水痘-带状疱疹病毒(Varicella-Zoster virus,VZV)。方法从GenBank上下载不同年份和地区的EV和VZV基因序列,分别在其保守区域设计引物与TaqMan探针,建立优化单重和双重荧光定量RT-PCR反应体系,评价所建双重RT-PCR反应体系的特异度、敏感度和稳定性,并应用于临床标本的检测中。结果该方法对EV和VZV检测具有高度特异性,检出限分别为30 copies/μl和36copies/μl,从疑似EV/VZV患者临床标本中直接检测EV与VZV,整个操作过程仅需3 h。结论本研究建立的双重荧光定量RT-PCR方法可以同时鉴别EV与VZV,具有特异性好、灵敏度高、快速易操作等优点,适用于EV/VZV早期感染病例的快速确认以及暴发疫情的应急诊断。
- 黄世旺李剑卢亦愚严菊英方叶珍倪志敏
- 关键词：TAQMAN探针肠道病毒水痘-带状疱疹病毒
- 246件市售熟肉制品微生物学调查分析被引量：9
- 2008年
- 包芳珍方叶珍李剑徐丹戈高海明黄世旺邵景莺
- 关键词：熟肉制品微生物学
- 交叉引物恒温扩增技术快速检测副溶血性弧菌耐热直接溶血素基因被引量：5
- 2016年
- 目的建立一种特异、灵敏、简便的交叉引物恒温扩增(cross priming amplification,CPA)技术,快速检测副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VP)耐热直接溶血素基因(tdh)。方法根据Gen Bank上公布的VP tdh基因序列,在其保守区域设计CPA引物和探针,并对反应体系和反应条件进行优化,同时验证方法的灵敏度和特异性。结果本方法对tdh基因检测具有高度特异性;对tdh阳性质粒DNA和菌液检测的灵敏度分别达到了1.8×101copy/μl和6.2×103cfu/ml;对82份临床标本的检测阳性率与荧光PCR法相同,大大高于传统培养法。结论本研究建立的CPA法快速、简便、灵敏、特异,适用于VP腹泻患者的床边诊断以及食物中毒的现场快速检验中。
- 黄世旺卢亦愚李剑徐昌平方叶珍蒋雪凤
- 关键词：副溶血性弧菌
- SF-36量表应用于城市化居民生命质量评价的信度和效度分析被引量：330
- 2016年
- 目的 评价SF-36量表用于城市化居民生命质量评价的信度和效度,为选择合适的健康测量工具提供参考。方法 采用多阶段整群系统抽样方法,使用SF-36量表进行入户调查,利用Spearman-Brown系数和Cronbach＇s α 系数评价量表分半信度和内部一致性信度,集合效度实验和区分效度实验成功率评价量表集合效度和区分效度,采用相关分析和非参数检验以自评健康状况为标准进行标准关联效度分析,结构效度评价采用基于结构方程模型的验证性因子分析。结果 SF-36量表应用于城市化居民生命质量评价具有良好的分半信度（R=0.94）和内部一致性信度（除＂躯体疼痛＂和＂精力＂维度外,Cronbach＇s α 系数为0.70～0.91）,量表集合效度（定标成功率为88.57%）、区分效度（定标成功率为90.61%）和准则效度（γs=0.56,评分与自评健康状况相一致）良好,二阶验证性因子分析模型对数据拟合度较差（拟合优度指数为0.721,调整拟合优度指数为0.682,比较拟合指数为0.731,残差均方和平方根为0.084,近似误差均方为0.098）,提示结构效度欠佳。结论 SF-36量表用于城市化居民生存质量评价具有良好的信度、集合效度、区分效度和标准关联效度,但结构效度欠佳,建议在实际应用中对相应条目进行调整。
- 王山樊文洁俞婉琦李剑徐丹戈曹红艳奚颖李秀央
- 关键词：生命质量SF-36量表城市化信度
- 江干区2007年恶性肿瘤发病状况分析被引量：6
- 2009年
- 李剑桑怀虎王竟雪
- 关键词：发病状况分析恶性肿瘤发病报告网络直报
- 时空统计方法及其在肠道传染病的时空流行病学中应用
- 李秀央顾华李剑蒋征刚蔡剑徐丹戈江涛王山樊文
- 为了了解城市化建设与肠道传染病之间的关系，该研究采用时间序列图和统计地图对肠道传染病发病率和城市化率进行统计描述，对肠道传染病发病率的时间规律及预测采用时间序列分析模型，对疾病的时空聚集性采用空间自相关和扫描统计量方法，...
- 关键词：
- 关键词：肠道传染病流行病学
- 公务员工作压力与抑郁症状之间的关系被引量：11
- 2006年
- 目的探讨公务员工作压力和抑郁症状之间的关系。方法工作压力采用中文版的付出-获得不平衡量表,抑郁评价采用中文版CES-D量表。采用问卷形式对474名浙江省公务员进行横断面调查,调查内容包括工作付出、获得、超负荷,抑郁症状和一般情况。采用方差分析、秩和检验或χ2检验进行单因素分析,采用logistic回归进行多因素分析。使用Epidata2003建立数据库,采用SPSS13.0进行统计分析。结果本次调查结果显示浙江省公务员抑郁症状阳性率为41.56%(95%CI:39.30%～43.82%)。采用多元logistic回归校正了其他因素后,工作中付出-获得不平衡的OR=1.772(95%CI:0.369～8.508)。公务员抑郁症状与超负荷(OR=3.468,95%CI:1.542～7.801)、单身(OR=2.661,95%CI:1.017～6.963)、社会支持(OR=2.088,95%CI:1.246～3.498)和亚健康状态(OR=2.475,95%CI:1.110～5.520)有关。结论公务员工作超负荷对其健康状况有负面影响。
- 李秀央郭永松夏中华陈坤李剑边平达
- 关键词：公务员工作压力抑郁症状
- 荧光定量PCR技术用于快速检测水痘-带状疱疹病毒的研究被引量：4
- 2012年
- 目的:建立特异、灵敏、高效的TaqMan荧光定量PCR方法用于水痘-带状疱疹病毒(VZV)的快速检测。方法:从GenBank下载几十株VZV基因序列进行同源性比对,选取高度保守区ORF62(编码即刻早期蛋白IE62)设计荧光定量PCR引物和TaqMan探针,并对反应体系与反应条件进行优化,同时验证方法的特异性、敏感性和重复性。结果:本方法对VZV的检测具有高度特异性,与肠道病毒EV71型,柯萨奇A、B组,麻疹病毒,风疹病毒,流感病毒以及相关腺病毒B、C组等均无交叉反应;检测灵敏度达36 copies/μl;反应体系具有很高的稳定性;整个操作过程仅需3 h～4 h。采用该方法对9份疑似VZV患者标本进行检测均为阳性,检测灵敏度明显高于病毒分离法、普通PCR法。结论:本研究建立的TaqMan荧光定量PCR方法特异、灵敏、高效,适用于VZV早期感染病例的快速确认以及暴发疫情的应急诊断中。
- 黄世旺方叶珍卢亦愚李剑徐丹戈蒋雪凤倪志敏
- 关键词：荧光定量PCRTAQMAN探针水痘-带状疱疹病毒
- TaqMan双重荧光PCR用于快速检测模拟临床标本中产毒型O139群霍乱弧菌的研究
- 2011年
- 目的:研究建立TaqM an双重荧光PCR技术,用于快速检测模拟临床标本中产毒型O139群霍乱弧菌。方法:以O139群霍乱弧菌O抗原编码基因rfb O139和毒力基因CT的特异性序列设计引物和TaqM an探针,建立优化TaqM an双重荧光PCR反应体系,进行特异性与敏感性的研究,并应用于模拟粪便感染和外环境监测标本的快速检测中。结果:该方法对产毒型O139群霍乱弧菌检测具有高度特异性,对rfbO139和CT基因序列检出限达到1.0×102cfu/m l或5 cfu/PCR反应体系,对模拟粪便感染和外环境监测标本的检测结果与实际情况完全一致,整个检测过程最快仅需3 h。结论:本研究建立的产毒型O139群霍乱弧菌双重荧光PCR检测技术具有特异性好、敏感性高、快速易操作等优点,可用于临床粪便标本和外环境监测样本的快速检测。
- 徐丹戈黄世旺方叶珍徐昌平张政包芳珍李剑蒋雪凤卢亦愚
- 关键词：霍乱弧菌CTO139
