曹丽艳
- 作品数：7 被引量：14H指数：3
- 供职机构：东北农业大学动物医学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 猪轮状病毒VP7蛋白模拟表位的噬菌体展示技术筛选与鉴定
- 2015年
- 猪轮状病毒（Po RV）是引起仔猪腹泻的重要病原之一,其主要结构蛋白衣壳蛋白VP7可诱导机体产生中和抗体。文章以制备的抗Po RV VP7单克隆抗体（MAb）3B6作为靶分子,利用噬菌体十二肽库展示技术对其模拟表位进行筛选。四轮筛选后随机挑取阳性克隆扩增后进行ELISA鉴定,同时提取其基因组DNA测序,10个阳性噬菌体亲和肽拥有共同的外源肽序列＂VPLGTDNGDIWV＂,而且与靶分子有很高亲和力。阳性噬菌体亲和肽与VP7蛋白进行序列比对,结果表明,十二肽中有4个氨基酸（第167位P、第178位T、第179位D和第184位W）与VP7蛋白167-184位氨基酸有一定的相似性。竞争抑制ELISA证明亲和多肽降低Po RV与抗VP7单克隆抗体之间的作用,病毒竞争抑制试验表明亲和多肽可以竞争性地抑制Po RV感染细胞。因此由这4个氨基酸构成的基序很有可能作为猪轮状病毒VP7蛋白的一个模拟表位。
- 任晓峰秦昭恒曹丽艳葛旭颖
- 关键词：猪轮状病毒VP7蛋白模拟表位
- 猪轮状病毒DN30209株的驯化培养被引量：1
- 2013年
- 为获得一株猪轮状病毒弱毒疫苗的候选株,用恒河猴肾细胞(MA-104)培养之前分离的猪轮状病毒DN30209株(PRV DN30209),并对预处理病毒的胰酶的浓度及时间、维持液(DMEM)中胰酶浓度和时间等条件进行优化,在最佳培养条件下对病毒进行连续传代,检测各代次病毒的TCID50,达到最高且稳定时,用该代次的病毒免疫PRV阴性BALB/c小鼠,于免疫后不同时间检测血清特异性中和抗体效价。结果,经20μg/mL胰酶37℃孵育40min,吸附90min,在含2μg/mL胰酶的DMEM中,病毒能在MA-104稳定增殖。经60代培养病毒TCID50由最初的103.40/mL增至106.00/mL,传至第60～63代时病毒TCID50维持在106.00/mL左右,并趋于稳定。选第60代病毒免疫小鼠,2周后小鼠血清中和效价为1∶91,4周后达到1∶128。结果表明,PRV DN30209株通过传代驯化培养可以作为弱毒疫苗候选株。
- 赵高伟段凤娟任玉东佟玲王婧婧曹丽艳任晓峰
- 关键词：轮状病毒疫苗株
- 猪流行性腹泻病毒M蛋白亲和肽的筛选及其抗病毒作用被引量：3
- 2015年
- 把成功构建的猪流行性腹泻病毒(PEDV)M蛋白的阳性重组质粒pET-32a(+)-M在大肠杆菌表达系统中进行诱导表达。以表达纯化的M蛋白作为靶蛋白,利用噬菌体展示技术对随机十二肽库进行筛选,4轮淘选后,挑选出了10个与PEDV及M蛋白特异性结合力高的噬菌体单克隆,序列测定后推导的氨基酸序列分别为AGWYCTEVLCV、AYCTRHVCYLDN,多肽被命名为M2、M9。就合成多肽体外抗病毒的效果而言,间接免疫荧光试验和实时荧光定量PCR试验证明,多肽M2、M9及多肽M2与M9联合使用均能够有效抑制病毒复制,且都呈剂量依赖性。其中多肽M2抑制病毒的作用比多肽M9的高,两种多肽联合抗病毒的作用最好。上述结果为进一步研究PEDV M蛋白功能性配体和研制防治PEDV的小分子治疗制剂提供了试验依据,奠定了理论基础。
- 高玉葛旭影曹丽艳李训良任玉东任晓峰李广兴
- 关键词：噬菌体展示猪流行性腹泻病毒M蛋白多肽抗病毒作用
- PEDV感染猪小肠上皮细胞通过TLR2、TLR3及TLR9途径激活NF-κB
- 猪流行性腹泻病毒(PEDV)是导致猪流行性腹泻(PED)的致病因子,可引发严重腹泻和脱水,诱发高死亡率和发病率,严重影响了世界各国养猪业的发展,并造成了严重的经济损失.为了阐明PEDV感染和疾病发生的分子机制,有必要深入...
- 曹丽艳李广兴
- 关键词：猪流行性腹泻猪流行性腹泻病毒
- 文献传递
- 细胞质内模式识别受体及其抗病毒免疫研究被引量：3
- 2014年
- 先天性免疫监视机制的核心是通过模式识别受体(pattern recognition receptors,PRRs)识别病毒分子诱导抗病毒防御,使宿主免受感染。PRRs表达在不同类型细胞的不同细胞区室,包括细胞膜、内体膜、溶酶体膜和胞质。病毒进入细胞区室后将被一个或多个模式识别受体所识别并激活机体的免疫反应。主要对细胞质内模式识别受体视黄酸诱导基因I样受体(retinoic acid-inducible gene I(RIG-I)-like receptors,RLRs)、核苷酸结合寡聚化结构域样受体(nucleotide-binding oligomerization domain(NOD)-like receptors,NLRs)、DEXDc螺旋酶受体(DLRs)及最近发现的DNA模式识别分子——DAI(DNA-dependent activator of interferonregulatory factors)识别病毒核酸并诱导I型干扰素产生的分子机制作一综述。
- 曹丽艳李广兴王克雄任玉东任晓峰
- 关键词：先天性免疫抗病毒反应模式识别受体
- 猪流行性腹泻病毒感染猪小肠上皮细胞抑制IFn-β产生及激活NF-κB机理研究
- 猪流行性腹泻病毒(PEDV)是导致猪流行性腹泻(PED)的致病因子，可引发严重腹泻和脱水，诱发高死亡率和发病率，严重影响了世界各国养猪业的发展，并造成了严重的经济损失。虽然该病在其分子流行病学的调查、诊断、预防及治疗方面...
- 曹丽艳
- 关键词：猪流行性腹泻病毒核转录因子
- PEDV感染猪小肠上皮细胞通过TLR2、TLR3及TLR9途径激活NF-κB
- <正>猪流行性腹泻病毒(PEDV)是导致猪流行性腹泻(PED)的致病因子,可引发严重腹泻和脱水,诱发高死亡率和发病率,严重影响了世界各国养猪业的发展,并造成了严重的经济损失。为了阐明PEDV感染和疾病发生的分子机制,有必...
- 曹丽艳李广兴
- 文献传递
