岳玉环
- 作品数:106 被引量:111H指数:6
- 供职机构:军事医学科学院军事兽医研究所更多>>
- 发文基金:吉林省科技发展计划基金国家科技型中小企业技术创新基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学轻工技术与工程更多>>
- 主动运载外源基因的重组蛋白载体PEAⅡ-HPhA及其制备方法和应用
- 本发明公开了主动运载外源基因的重组蛋白载体核心区PEAⅡ-HphA及制备方法和应用,还公开了主动运载外源基因的重组蛋白载体核心基因片段PEAⅡ-HphA;主动运载外源基因的重组蛋白载体是由导向分子-PEA毒素跨膜转位区P...
- 张国利朱平吴广谋岳玉环
- 文献传递
- 抗人ICAM-1单链抗体表达载体的构建及在大肠杆菌中的表达被引量:2
- 2008年
- 目的构建抗人细胞间黏附分子-1(ICAM-1)单链抗体(ScFv)的表达载体,并在大肠肝菌中表达。方法从分泌ICAM-1单抗的杂交瘤细胞中提取RNA,用RT-PCR扩增抗体VH和VL基因,重叠延伸PCR扩增人ICAM-1-ScFv基因,将其连接到pET-22b(+)载体上,转化大肠杆菌BL2(DE3),IPTG诱导表达,表达产物纯化及复性后,检测特异性及活性。结果序列分析表明抗ICAM-1 ScFv基因全长为744bp,编码247个氨基酸,其中含357bp的VH基因片段和342bp的VL基因片段。表达蛋白以包涵体形式存在,表达量占菌体总蛋白的32%。经变性和复性后,纯度达80%以上,复性率达25%。Western blot和ELISA检测,ScFv均可与ICAM-1抗原特异性结合。细胞黏附试验表明ScFv能抑制ICAM-1与HSB2细胞间的黏附,其作用稍弱于亲本mAb。结论已成功构建了抗人ICAM-1的ScFv表达载体,其表达产物具有抗体特异性和活性。
- 孙红万忠海张国利吴广谋朱平岳玉环
- 关键词:细胞间黏附分子-1单链抗体活性
- 产气荚膜梭菌α毒素人源化单链抗体7D
- 本发明公开了产气荚膜梭菌α毒素人源化单链抗体7D,它是从噬菌体抗体库Source bioscience筛选出来的,是全人源抗产气荚膜梭菌α毒素抗体,既可以实现中和毒素的治疗作用,同时克服了异源性抗体的多种副作用,免除了异...
- 张国利于佳田园朱进刘雨玲岳玉环吴广谋徐艳玲史飞赵鑫
- 文献传递
- 抗A型产气荚膜梭菌α毒素全人源双价单链抗体的构建、表达及其活性的初步研究被引量:2
- 2017年
- 目的:为防治A型产气荚膜梭菌α毒素引起的肠毒血症及气性坏疽等相关疾病,构建并高效表达中和α毒素(CPA)的特异性双价单链抗体,并对其生物学活性进行初步研究。方法:以全人源噬菌体抗体库中筛选得到的抗A型产气荚膜梭菌α毒素单链抗体sc Fv基因为模板,PCR的方法扩增两条单链抗体片段并通过引物设计引入中间连接肽G4S或(G4S)3,亚克隆至原核表达载体p ET-28a(+),转化E.coli BL21,IPTG诱导表达、鉴定及表达产物的层析纯化;Western blot和间接ELISA方法检测与抗原的免疫结合活性;通过体外检测抗体抑制CPA水解卵磷脂的活性和溶血活性以及体内小鼠攻毒保护试验初步研究双价单链抗体的生物学活性。结果:双酶切鉴定及基因测序结果表明构建的双价单链抗体sc(Fv)2-5和sc(Fv)2-15均正确,诱导表达后经12%SDS-PAGE分析,两者均以包涵体形式表达且蛋白分子量符合理论值大小,Western blot和间接ELISA分析结果显示,构建的双价单链抗体与抗原CPA具有特异结合活性,且sc(Fv)2-15与抗原的结合活性明显高于sc(Fv)2-5和sc Fv,体外与体内生物活性试验结果进一步证明,sc(Fv)2-15中和毒素的能力较sc(Fv)2-5和sc Fv具有明显优势。结论:成功制备了抗A型产气荚膜梭菌α毒素的全人源双价单链抗体,为进一步研究该毒素引发的各类疾病的诊断和治疗奠定了基础。
- 王冬冬张国利岳玉环吴广谋田园刘雨玲吉元刚王金鹏李建潘荣荣马洪圆
- 关键词:生物活性检测
- 亲和标记DAB389(Gly4Ser)2-αMSH重组蛋白的构建、表达及纯化
- 2008年
- 目的:构建含有亲和标记His-tag的DAB389(Gly4Ser)2-αMSH重组蛋白,便于融合蛋白质的纯化。方法:利用含有His-tag序列、Factor Xa酶切识别序列、白喉毒素N端序列的基因作上游引物,含有αMSH全序列和(Gly4Ser)2互补序列基因作下游引物,以pET28a/DAB389(Gly4Ser)2EGF为模板,PCR扩增目的基因片段,并插入到原核表达载体pET28a中,构建了重组表达载体pET28a/亲和标记DAB389(Gly4Ser)2-αMSH,融合蛋白在BL21(λDE3)中以可溶形式表达,通过硫酸铵盐析、亲和层析纯化、脱盐、Factor Xa酶切得到重组蛋白纯品。结果:扩增的片段与理论值一致,序列分析正确;目的蛋白表达量约占菌体总蛋白量的30.6%;纯化得到纯度为94.36%的重组蛋白。结论:成功构建了含有His-tag的DAB389(Gly4Ser)2-αMSH重组蛋白,减少了纯化步骤,为进一步研究重组毒素、简便纯化途径奠定基础。
- 李泽鸿张国利岳玉环朱平
- 关键词:重组蛋白基因表达免疫毒素类白喉毒素
- A型产气荚膜梭菌α毒素疫苗rCPA-HSP65的生物活性研究被引量:3
- 2017年
- 产气荚膜梭菌是一种革兰氏阳性厌氧菌,广泛分布于土壤、食物、污水、粪便及许多健康人和动物的肠道中,引起人或动物的各种组织毒性感染,包括气性坏疽、厌氧性蜂窝织炎和单纯的创伤感染,另外还可引起人或动物的肠炎和肠毒血症。根据该菌产生的各种毒素可将其分为A~E五种类型,其中A型产气荚膜梭菌产生的α毒素(CPA)是引起各类疾病最关键也是最重要的致病因子,它是一种依赖于锌离子的多功能性金属酶,是第一个被鉴定为酶类的细菌毒素。
- 王冬冬张国利岳玉环吴广谋田园吉元刚李健王金鹏刘雨玲潘荣荣马洪圆
- 关键词:A型产气荚膜梭菌Α毒素疫苗创伤感染蜂窝织炎
- 生物安全型发酵菌液中空纤维超滤系统
- 本实用新型公开了生物安全型发酵菌液中空纤维超滤系统,从发酵罐、超滤罐、超滤器到消毒罐,采用全封闭管道连接运送、超滤;一方面防止外部微生物污染,另一方面防止发酵菌液外泄;可根据需要,通过打开或关闭(控制)各个阀门,对每个装...
- 张国利姜柏涛钱军万忠海岳玉环吴广谋田园史飞于新海冯书章
- 文献传递
- 重组白喉毒素及其制备方法和应用
- 本发明公开了重组白喉毒素及其制备方法和应用,白喉毒素DAB<Sub>389</Sub>与α-促黑素细胞激素两者之间添加了以(Gly<Sub>4</Sub>Ser)<Sub>2</Sub>组成的连接肽,为了重组毒素纯化的方...
- 李泽鸿张国利岳玉环朱平陈萍张林波赵福广吴广谋郑艳军张玲
- 文献传递
- EGF-PE35KDEL重组毒素的基因构建及表达被引量:1
- 2003年
- 目的 构建表达有特异细胞毒性融合蛋白的工程质粒。方法 利用PCR扩增出PE3 5KDEL基因片段 ,经酶切后插入EGF PET2 8A载体 ,并转化至BL2 1(DE3 )中。采用Westernblot对重组毒素进行鉴定。结果EGF PE3 5KDEL重组毒素占菌体总蛋白的 2 0 % ,分子量约为 410 0 0。结论 EGF PE3
- 李树民李丽萍岳玉环李铁征邱业峰朱平
- 关键词:基因构建绿脓杆菌外毒素重组毒素
- 靶向性抗肿瘤融合蛋白质LPO的制备和应用
- 本发明公开了靶向性抗肿瘤融合蛋白质LPO,它是将人工合成的目的基因片段<i>LHRH-PEA</i>转膜肽-<i>ONC</i>(简称为LPO),插入PET28a质粒中,转...
- 张国利史飞李泽鸿田园刘雨玲岳玉环吴广谋
- 文献传递