孟露萍
- 作品数：17 被引量：15H指数：3
- 供职机构：石河子大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国际科技合作与交流专项项目国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 不同生物型BVDV感染对MDBK细胞类泛素基因转录水平的影响
- <正>研究目的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)是黄病毒科瘟病毒属主要成员,主要引起牛的病毒性腹泻-黏膜病(BVD-MD),能够引起持续性感染,目前,我国尚无有效的疫苗用于控制该病的发生与流行,因此研究BVDV致病的分子机制将...
- 韩玉霞孟露萍孙志华刘娟张辉陈创夫
- 关键词：基因转录水平生物型
- 文献传递
- miR-193a在MDBK细胞中诱导细胞凋亡的研究
- 研究目的：本试验旨在研究miR-193a 在致细胞病变型牛病毒性腹泻病毒(cp BVDV)感染MDBK细胞过程中诱导细胞凋亡的分子机制.材料方法：试验利用TargetScan 和Microcosm Targets 等生物...
- 史梦婷付强孟露萍史慧君包海洋张辉任艳陈创夫
- miR-193a在MDBK细胞中诱导细胞凋亡的研究被引量：1
- 2014年
- 本试验旨在研究miR-193a在致细胞病变型牛病毒性腹泻病毒(cp BVDV)感染MDBK细胞过程中诱导细胞凋亡的分子机制。试验利用TargetScan和Microcosm Targets等生物信息学在线软件预测凋亡相关的miR-193a靶基因Bax,并利用双荧光素酶报告基因系统验证miR-193a的靶基因;用过表达miR-193a的慢病毒pre-miR-193a-lv和抑制miR-193a表达的慢病毒pre-miR-193a-inhibitor-lv分别侵染MDBK细胞,48h后收集细胞,然后用实时荧光定量PCR、Western blotting和流式细胞仪检测凋亡通路中Bax的表达水平及MDBK细胞凋亡率。结果预测并验证了miR-193a的靶基因为Bax;双荧光素酶报告基因分析结果显示miR-193a能直接结合到Bax 3′UTR区域中的miRNA反应位点,并极显著下调Bax的表达水平(P<0.01);流式细胞仪检测凋亡率结果显示,感染pre-miR-193a-lv慢病毒的MDBK细胞凋亡率极显著升高(P<0.01)。结果表明miR-193a能直接靶向凋亡通路中Bax基因,从而促进凋亡的发生。
- 史梦婷付强孟露萍史慧君包海洋张辉任艳陈创夫
- 关键词：BAX凋亡
- 结核分支杆菌Rv2031c慢病毒载体的构建及其对RAW264.7细胞凋亡的影响
- 研究结核分支杆菌Rv2031c 基因对小鼠巨噬细胞对RAW264.7 细胞凋亡的影响.根据GenBank数据库中结核分支杆菌Rv2031c 的序列设计引物,以结核分支杆菌国际标准株H37Rv 株灭活的菌液上清液为模版,扩...
- 史梦婷孟露萍包海洋付强史慧君张辉任艳乔军陈创夫
- 结核分支杆菌Rv2031c慢病毒载体的构建及其对RAW264.7细胞凋亡的影响被引量：4
- 2015年
- 研究结核分支杆菌Rv2031c基因对小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞凋亡的影响。根据GenBank数据库中结核分支杆菌Rv2031c的序列设计引物,以结核分支杆菌国际标准株H37Rv株灭活的菌液上清液为模版,扩增Rv2031c基因;克隆至慢病毒表达载体plex-EGFP中,经酶切和测序鉴定后,获得plex-Rv2031c-EGFP重组慢病毒载体;将重组慢病毒质粒分别与辅助质粒共转染至293T细胞中,转染48h后收集慢病毒,并侵染RAW264.7细胞;侵染48h时收集细胞,用流式细胞术检测各试验组巨噬细胞的凋亡率;提取细胞总RNA并反转录成cDNA,PCR检测Rv2031c基因在细胞中的表达情况;同时,使用细胞裂解液提取细胞总蛋白,Western blot检测Rv2031c蛋白表达水平。结果表明,成功构建了Rv2031c的慢病毒表达载体plex-Rv2031c-EGFP;构建了过表达Rv2031c的慢病毒Rv2031c-lv;感染Rv2031c-lv的RAW264.7细胞的凋亡率为41.8%,而对照组EGFP-lv感染的RAW264.7细胞其凋亡率为30.0%;PCR结果表明Rv2031c在Rv2031c-lv侵染的RAW264.7细胞中高表达;Western blot结果显示Rv2031c蛋白在Rv2031c-lv侵染的RAW264.7细胞中高表达。该研究成功构建了结核分支杆菌Rv2031c的慢病毒表达载体并验证了其对RAW264.7细胞凋亡的影响,为结核分支杆菌在机体内潜伏期感染的药物研究奠定了基础。
- 史梦婷孟露萍包海洋付强史慧君王慧勤张辉任艳乔军陈创夫
- 关键词：慢病毒RAW264.7细胞细胞凋亡
- 新疆羊种布鲁氏菌分离株的鉴定与L7/L12蛋白的原核表达和生物信息学分析
- 2017年
- 【目的】分离并鉴定新疆羊种布鲁氏菌。原核表达该菌的L7/L12蛋白,检测该蛋白的反应原性及进行部分生物学分析。【方法】采用细菌划线培养、形态学观察、PCR检测以及生化试验进行布鲁氏菌分离鉴定。利用常规分子生物学方法表达并纯化羊种布鲁氏菌分离株的L7/L12蛋白,应用Western Blot分析融合蛋白的反应原性。使用生物信息学软件对该蛋白进行了生物信息学分析。【结果】分离鉴定确定该菌株为羊种布鲁氏菌。经过测序与酶切鉴定,正确构建了表达载体p ET-28a-L7/L12.SDS-PAGE试验显示纯化的L7/L12蛋白为单一条带;经过Western Blot检测,该融合蛋白具有良好的反应原性。生物信息学分析显示,该蛋白无跨膜区结构,不存在信号肽,二级结构α-螺旋为主并利用Phyre2服务器成功构建了该蛋白的三维模型。【结论】鉴定出该分离菌株,表达并纯化了该菌的L7/L12融合蛋白,Western Blot证明该蛋白具有良好的反应原性,为后续该蛋白的亚单位疫苗研究奠定了基础。
- 刘升江雅丽付强史慧君李爽孟露萍郭飞张辉陈创夫
- 关键词：羊种布鲁氏菌蛋白纯化反应原性
- 4株布鲁氏菌弱毒株对小鼠毒力及免疫保护力的评价被引量：2
- 2017年
- 为检测国内外已有的布鲁氏菌疫苗株S19、M5、S2和RB51的胞内存活力、毒力、免疫保护力以及抗体消长水平,将上述4种疫苗株,分别以100:1的MOI侵染小鼠巨噬细胞,结果发现RB51的胞内存活力最强;以1×10~6 CFU/只免疫昆明小白鼠,测定各疫苗株在小鼠脾脏中的定居力,结果发现M5的定居力最强;待疫苗株在小鼠体内被清除后,以1×10~5 CFU/只腹腔接种2308毒株,进行攻毒试验,检测各疫苗株的保护力,结果发现M5的保护效果最好;免疫后连续10周采集血清,用ELISA检测血清中的Ig G滴度、IFN-γ的表达水平及抗体消长水平,结果发现S2、M5组的Ig G水平高于其他组,而各组间的IFN-γ水平差异不显著(P>0.05);分别用虎红平板凝集试验(RBPT)和标准试管凝集试验(SAT)检测血清凝集状况,结果发现S2、S19组的抗体持续时间较长;剖检各疫苗株对小鼠脾脏、肝脏、肾脏等组织引起的病理学变化,结果发现M5引起的病变程度最强。
- 刘升兰关团王震王月丽刘洋刘志科孟露萍张辉陈创夫
- 关键词：布鲁氏菌疫苗毒力免疫保护力小鼠
- miR-193a影响BVDV胞内复制的分子机制研究
- 牛病毒性腹泻-粘膜病(BVD-MD)是一种广泛传播的传染性疾病,主要感染对象是以牛为主的家畜。由于BVDV对于动物群体以及人类都有着重大的影响,因此被列入到了世界动物卫生组织(OIE)国际贸易重点疾病的名单中。关于BVD...
- 史梦婷孟露萍付强史慧君张辉任艳乔军陈创夫
- 文献传递
- miR-193a在MDBK细胞中诱导细胞凋亡的研究
- 研究目的:本试验旨在研究mi R-193a在致细胞病变型牛病毒性腹泻病毒(cp BVDV)感染MDBK细胞过程中诱导细胞凋亡的分子机制。材料方法:试验利用TargetS can和Microcosm Targets等生物信...
- 史梦婷付强孟露萍史慧君包海洋张辉任艳陈创夫
- 文献传递
- miR-193a影响BVDV胞内复制的分子机制研究
- 牛病毒性腹泻-粘膜病(BVD-MD)是一种广泛传播的传染性疾病，主要感染对象是以牛为主的家畜。由于BVDV 对于动物群体以及人类都有着重大的影响，因此被列入到了世界动物卫生组织(OIE)国际贸易重点疾病的名单中。关于BV...
- 史梦婷孟露萍付强史慧君张辉任艳乔军陈创夫
