吴家强 作品数:307 被引量:483 H指数:9 供职机构: 山东省农业科学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 山东省自然科学基金 现代农业产业技术体山东省现代农业产业技术体系创新团队建设专项资金系建设专项资金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 环境科学与工程 更多>>
鸡三种天然免疫相关受体和配体荧光定量PCR检测方法的建立及应用 被引量:3 2016年 为建立检测鸡天然免疫相关受体(Ch-MDA5、Ch-TLR3和Ch-TLR7)及其相应配体(MAVS、TRIF和MyD88)的荧光定量PCR方法并评价其应用效果,设计和筛选特异性PCR引物,制备各基因的质粒标准品,绘制荧光定量PCR的标准曲线,并对方法的灵敏度、重复性和特异性进行检验。结果表明,所建立的检测方法敏感度高、特异性强、检测线性范围广、重复性好。应用建立的方法检测新城疫油乳剂灭活苗免疫SPF鸡后上述基因表达的变化,发现免疫后6h各基因的表达水平达到峰值,表明疫苗免疫迅速有效地激活了机体的天然免疫应答。建立了与鸡抗病毒感染天然免疫相关的3种细胞受体和相应配体的定量检测方法,可应用于病毒致病机制、鸡用新型疫苗、免疫增强剂以及抗病毒药物的研究与开发。 黄艳艳 高丹丹 许传田 朱曼玲 杨少华 黄庆华 张琳 张秀美 吴家强关键词:天然免疫 实时荧光定量PCR 人工湿地去除畜禽养殖废水污染物研究进展 被引量:6 2021年 为研究人工湿地在畜禽养殖废水中处理污染物的现状,以"人工湿地"、"畜禽养殖废水或污水"、"畜禽养殖污染"、"营养物质"、"重金属"、"抗生素"和"抗生素基因"等为关键词,搜索ISI web of knowledge、SpringerLink、中国知网、万方数据库等数据库,对2007—2020年发表的相关文献进行归纳和分析。结果表明:1)人工湿地能有效去除畜禽养殖废水中营养物质、重金属、抗生素及ARGs等;2)人工湿地在畜禽养殖废水中的应用尚处于发展阶段,且具有较可观的应用前景,但其去除污染物的机理仍需要深入探;3)研究发现人工湿地综合去除畜禽养殖废水中的污染物能力以及评价人工湿地运行效能是今后的研究发展方向。本研究可为人工湿地处理畜禽养殖废水提供理论参考。 张燕 伏春燕 阎佩佩 李新华 董红云 吴家强 阎百兴 石天虹 刘雪兰关键词:畜禽养殖 废水污染 人工湿地 营养物质 抗生素 猪、鼠、鸭补体C3d基因克隆与序列分析 被引量:1 2011年 为了比较猪、鼠、鸭C3d基因的不同,以便为下一步研究不同动物C3d作为分子佐剂核酸疫苗的效果,试验对3种基因进行克隆和序列分析。首先提取猪、鼠、鸭的肝脏总RNA,以RNA为模板,通过RT-PCR方法,分别扩增C3d分子的cDNA,再将3种动物的cDNA分别克隆到pMDl8-T载体中,然后转化BL21大肠杆菌,经酶切鉴定后进行序列测定,根据测序结果利用生物信息学工具软件对3种C3d进行生物学性质分析。结果发现,猪与鼠和鸭的C3d基因的同源性分别为81.9%和65.6%,鼠与鸭C3d基因的同源性为65.8%;鼠、猪的补体C3d分子与受体CR2结合的功能区有28个氨基酸,鸭有29个氨基酸。 夏庆祥 张德庆 吴家强 王小龙 牛钟相关键词:C3D RT-PCR 克隆 黄河三角洲淡水恢复工程湿地水质监测及其评价研究 被引量:2 2020年 以黄河三角洲引黄沟渠、连河湿地和恢复湿地三种湿地系统2018年实地监测数据为基础,选取化学需氧量(COD)、氨氮(NH3-N)、总磷(TP)、总氮(TN)、铜、锌、铬和铅为评价指标,采用改进内梅罗污染指数法进行水质评价与分析。评价结果显示,仅5月份引黄沟渠水质为Ⅳ类,其余各时期三种湿地系统水质均处于Ⅴ类水质状态,说明用于淡水恢复工程的黄河水也处于重度污染状态,有效削弱污染程度需要对黄河三角洲上游来水进行严格污染管控。三种湿地水质监测结果显示:11月份三种湿地系统中各污染指标均高于5月份和8月份,这是由于11月份各湿地系统水量大量减少所致;而且各湿地系统铜、锌不存在污染风险,而铬、铅存在较大污染风险。因此,建议11月后及时补充黄河水,以有效削弱各湿地系统的污染程度。 张燕 刘雪兰 伏春燕 董红云 李新华 阎百兴 吴家强 阎佩佩 石天虹关键词:黄河三角洲 淡水 湿地系统 水质评价 猪圆环病毒2型SD2分离株ORF3基因转录分析 被引量:2 2009年 对PCV2 SD2株(DQ478947)进行了序列分析发现,其含有11个开放阅读框,与以往分离株开放阅读框有较大差异。根据GenBank发表的PCV2序列设计特异性引物,扩增ORF3基因,预计扩增片段大小为209 bp。分别在接毒后12、24、364、8 h,用Trizol法自病毒细胞裂解液提取总RNA,然后用DNase I处理,除去残留的病毒DNA,利用醋酸纤维素分离mR-NA,用上述引物进行RT-PCR扩增。在接毒24 h后扩增出的目的片段大小与预计扩增片段大小相符合,测序结果表明扩增片段与PCV2 SD2(DQ478947)ORF3基因序列相符。由此证实,PCV2山东分离株ORF3基因可在接毒24 h后于转录水平表达,为ORF3基因的深入研究打下了基础。 丁鹏 李俊 于周 程凯慧 吴家强 王金宝关键词:猪圆环病毒2型 ORF3基因 转录分析 高质量党建驱动科研院所高质量发展的探索与实践 被引量:3 2023年 文章归纳梳理山东省农业科学院畜牧兽医研究所近3年来加强基层党建工作,提升党建工作质量的“1331”模式,即“拧紧一个链条,坚持三大举措,抓好三个融合,凝聚一个合力”,深入分析了党建工作模式的具体内涵、工作实践和取得成效,得出了发挥基层党组织把关定向作用、健全建强基层党组织、坚持问题导向抓党建是驱动科研院所高质量发展的前提、基石和动力的经验启示。 尹静 朱荣生 孙文博 吴家强关键词:基层党建工作 一种可溶性猪圆环病毒2型Cap蛋白及应用 本发明涉及生物技术中蛋白表达技术领域,特别涉及一种可溶性猪圆环病毒2型Cap蛋白。该可溶性猪圆环病毒2型Cap蛋白制成的铝胶佐剂疫苗比油佐剂疫苗安全效果好,免疫后猪体吸收快,应激小,比201佐剂免疫保护率高。 于江 吴家强 张玉玉 陈智 孙文博 韩红 杨杰文献传递 基于非洲猪瘟p30和p22两种蛋白的间接ELISA检测试剂盒 本发明公开了基于非洲猪瘟p30和p22两种蛋白的间接ELISA检测试剂盒,涉及动物用生物制品制造技术领域。本发明提供一种非洲猪瘟的间接ELISA检测试剂盒,包括氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示的p30蛋白和氨基酸序... 于江 吴家强 孟凯 矫健 任素芳 张玉玉 刘飞 陈智 张琳 郭立辉一种复方油佐剂及其制备方法和应用 本发明涉及疫苗佐剂技术领域,特别涉及一种复方油佐剂,由白油、油醇聚氧乙烯醚和聚氧乙烯醚硬脂酸酯三种成分组成。白油占80%-95%,油醇聚氧乙烯醚占1%-10%,聚氧乙烯醚硬脂酸酯占1%-10%。油醇聚氧乙烯醚分子量为40... 王金宝 杜以军 齐静 吴家强 李俊 黄保华 丛晓燕 任素芳 孙文博 时建立 郭立辉 吕伟文献传递 鸡传染性支气管炎病毒N蛋白的表达及ELISA诊断试剂盒的研制与应用 被引量:4 2018年 为了建立一种鸡传染性支气管炎抗体检测的ELISA方法,本研究根据GenB ank中的传染性支气管炎病毒(IBV)山东分离株LC2的N基因序列,设计一对引物,扩增N基因,将目的基因与载体pE T-32a(+)连接,构建重组表达质粒pE T-32a-N,转化E.coli BL21(DE3),诱导表达融合蛋白pE T-32a-N,纯化目的蛋白,以纯化的重组蛋白为抗原建立鸡传染性支气管炎抗体检测的间接ELISA方法,并利用所建立的ELISA方法对临床血清样本进行检测。结果表明,IBV N基因可在大肠杆菌中稳定、高效地表达。Western-blot检测表明,表达的重组蛋白能与鸡传染性支气管炎阳性血清发生特异性反应。确定间接ELISA方法的抗原最佳包被浓度为2μg·孔^(-1),血清最佳稀释度为1:200,临界值为D450值≥0.297,建立的ELISA方法具有较好的敏感性、特异性和重复性。该方法与进口IDEXX试剂盒的符合率为96.25%,初步临床应用结果表明该方法可用于雏鸡传染性支气管炎母源抗体和免疫后抗体的消长变化的检测。综上所述,本研究所建立的N-ELISA方法是一种有效的鸡传染性支气管炎病血清学诊断的方法,并为进一步研究IBV N蛋白的免疫原性和抗感染保护作用奠定了基础。 亓丽红 黄兵 吴家强 宋玲玲 王友令 马秀丽 于可响 刘涛 艾武 徐怀英关键词:鸡传染性支气管炎病毒 N基因 ELISA 抗体