华倩倩
- 作品数：12 被引量：16H指数：2
- 供职机构：温州医科大学更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金国家级大学生创新创业训练计划国家社会科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学哲学宗教更多>>
- 弓形虫自噬蛋白8(ATG8)、ATG3的多抗制备及ATG7-HA转基因虫株构建
- 细胞自噬(autophagy)是一种真核生物中普遍存在的细胞生物学行为，是将细胞内衰老的蛋白质或损失的细胞器进一步降解回收的代谢过程。它不仅维持细胞内稳态，促进细胞的分化和发育，还在营养匮乏时帮助细胞缓解饥饿压力。 刚...
- 华倩倩
- 关键词：刚地弓形虫
- 文献传递
- 抗弓形虫β微管蛋白小分子抗原肽多克隆抗体的制备及鉴定被引量：2
- 2014年
- 对弓形虫GT1株、ME49株和人的β微管蛋白的氨基酸序列进行生物信息学分析。根据生物信息学分析结果,人工合成弓形虫β微管蛋白氨基酸序列C端小分子抗原肽。用合成的抗原肽免疫日本大耳兔,每2周免疫1次,0.5 mg/(只·次),共5次。末次免疫后2周,收集兔血清,ELISA检测血清中特异性抗体效价,蛋白质印迹(Western blotting)检测该多克隆抗体与弓形虫RH株、ME49株和PRU株速殖子蛋白的免疫反应。生物信息学分析结果表明,弓形虫GT1株与ME49株的β微管蛋白的氨基酸序列完全一致,与人的β微管蛋白氨基酸序列同源性为98%,差异氨基酸主要集中在C端。经5次免疫后,ELISA证实兔血清中抗体效价为1∶52 800。Western blotting分析结果显示,该多克隆抗体可分别与弓形虫RH株、ME49株和PRU株的β微管蛋白特异性结合。
- 毛小勇华倩倩李相志姚丽丽谭峰
- 关键词：刚地弓形虫Β-微管蛋白多克隆抗体
- 弓形虫棒状体颈部蛋白的研究进展
- 2013年
- 弓形虫棒状体颈部蛋白（rhoptry neck proteins，RONs）是由棒状体分泌的，构成运动结合体（moving junction，MJ）不可或缺的一部分，由于MJ在虫体入侵宿主细胞过程中起至关重要的作用，因此，对于RONs蛋白的研究，有助于更好地了解刚地弓形虫的致病机制，探寻预防和治疗弓形虫病的有效方法。该文就弓形虫棒状体颈部蛋白的结构和功能加以综述，并对该领域今后可能的研究方向进行展望，以期从棒状体颈部蛋白角度对弓形虫研究提供新的思路。
- 华倩倩谭峰梁韶晖
- 关键词：刚地弓形虫
- 基因芯片分析弓形虫感染宿主细胞microRNAs差异表达被引量：1
- 2013年
- 目的:研究弓形虫感染人包皮成纤维细胞(HFFs)的microRNAs(miRNAs)差异表达。方法:基因芯片分析弓形虫感染的HFFs的miRNAs差异表达,并用实时荧光定量RT-PCR法和Northern blot法验证miRNAs差异表达。结果:弓形虫感染HFFs的46种miRNAs表达量有1倍以上上调,37种miRNAs表达量有1倍以上下调。其中4种差异表达的miRNAs的实时荧光定量RT-PCR法和Northern blot法验证结果与基因芯片分析结果一致。结论:弓形虫感染可导致宿主细胞的miRNAs差异表达,差异表达的miRNAs可能在弓形虫和宿主细胞的相互作用中起调控作用。
- 李春香郝振华兰兰华倩倩梁韶晖
- 关键词：弓形虫微小RNA基因芯片
- 一种评价弓形虫TgAtg8-TgAtg3蛋白相互作用分子特性的方法
- 本发明涉及一种评价弓形虫TgAtg8‑TgAtg3蛋白相互作用分子特性的方法，步骤如下：⑴无细胞蛋白表达检；⑵AlphaScreen检测；⑶BIAcore亲和力检测；⑷单分子光谱检测。本方法首先利用无细胞蛋白表达系统、A...
- 谭峰胡昕陈弟刘淑贤华倩倩
- 文献传递
- 一种能够抑制弓形虫增殖的小分子抑制剂的筛选及应用方法
- 本发明公开了一种能够抑制弓形虫增殖的小分子抑制剂的筛选方法，其利用Alphascreen实验初步选出11个小分子抑制剂和一个小分子促进剂，这12种药物都是临床用药。在细胞水平上对这12种药物进一步筛选，空斑实验证实GSK...
- 刘淑贤谭峰张芳菲华倩倩曹佳欣王炎胡昕
- 刚地弓形虫自噬相关蛋白8(TgAtg8)多克隆抗体制备及初步应用被引量：1
- 2014年
- 目的制备、评价特异性抗刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)自噬相关蛋白8(autophagy protein 8,TgAtg8)多克隆抗体。方法生物信息学方法分析弓形虫基因组中自噬相关蛋白的基因序列和氨基酸序列。以刚地弓形虫RH株速殖子cDNA为模板,PCR扩增TgAtg8编码基因,克隆入pGEX-6p-1载体,构建pGEX-6p-1-TgAtg8重组质粒,转化至大肠埃希菌(Escherichia coli)BL21。异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达后,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹(Western blotting)分析重组蛋白表达情况。谷胱甘肽-S-转移酶(GST)标签亲和层析法纯化表达产物。以纯化的TgAtg8蛋白为抗原免疫日本大耳白兔,获得特异性抗TgAtg8多克隆抗体。以制备的多克隆抗体作为一抗,进行Western blotting分析和间接免疫荧光(IFA)检测。结果双酶切和测序结果证实,原核表达质粒pGEX-6p-1-TgAtg8构建成功。SDS-PAGE和Western blotting结果表明,TgAtg8蛋白在E.coli BL21中获得高效表达,其融合蛋白相对分子质量(Mr)约40 000,与理论值相近。Western blotting结果证实,所制备的多克隆抗体能特异性识别融合蛋白TgAtg8和虫株体内天然的TgAtg8蛋白。IFA实验表明,TgAtg8均匀分布于虫体胞浆中,但在自噬诱导培养后,TgAtg8逐渐聚集成颗粒状。结论制备的特异性抗TgAtg8多克隆抗体可用于检测虫体内TgAtg8蛋白在弓形虫自噬形成过程中的变化情况。
- 谭峰华倩倩李星潘李相志梁韶晖
- 关键词：刚地弓形虫细胞自噬多克隆抗体
- 白纹伊蚊唾液腺重组aegyptin相似蛋白alALP的制备及抗原性分析被引量：1
- 2014年
- 目的克隆、表达白纹伊蚊唾液腺重组aegyptin相似蛋白alALP编码基因并分析其抗原性。方法运用生物信息学方法分析alALP与aegyptin氨基酸序列(GenBank登录号为ABF18122.1)的同源性、二级结构和抗原肽段。提取白纹伊蚊唾液腺总RNA,根据alALP的基因编码序列(GenBank登录号为AY826121)设计引物,RTPCR扩增目的基因,亚克隆至pGEX-6P-1质粒,转化大肠埃希菌(E.coli)BL21,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹(Western blotting)分析重组蛋白表达情况。重组aegyptin相似蛋白(GST-alALP)经还原型谷胱甘肽(Glutathione Sepharose 4B)亲和层析法纯化后,皮下注射免疫BALB/c小鼠,每次免疫剂量60μg,共免疫3次,每次间隔2周,制备小鼠抗GST-alALP血清。分别以小鼠抗GST-alALP血清和白纹伊蚊叮咬后小鼠血清为一抗,Western blotting分析GST-alALP蛋白的抗原性。结果生物信息学预测结果显示,alALP与aegyptin的氨基酸序列具有65.58%的同源性,二级结构高度相似并具有一段保守的抗原多肽。RT-PCR结果显示,alALP成熟肽基因扩增产物约为762 bp。经双酶切、PCR和测序结果显示,重组质粒pGEX-6p-1-alALP构建成功。SDS-PAGE和Western blotting结果显示,经IPTG诱导获得相对分子质量(Mr)约56 000的可溶性重组融合蛋白。Western blotting结果显示,GST-alALP蛋白能被该蛋白免疫的小鼠血清和白纹伊蚊叮咬后的小鼠血清识别。结论克隆的alALP成熟肽基因能在原核表达系统中高效表达,且具有抗原性。
- 李星潘曹国梅邢翠翠华倩倩张亮亮梁韶晖
- 关键词：白纹伊蚊原核表达抗原性
- 叙事医学视域下医学生人文关怀能力培养路径探究被引量：9
- 2022年
- 通过构建叙事医学视域下医学生人文关怀能力“理论+实践”双轨培养路径,探讨基于叙事医学理念的理论教学及社会实践对提升医学生人文关怀能力的效果。研究随机选取温州医科大学临床医学专业一年级184名学生为研究对象,并随机分为试验组与对照组,试验组接受叙事医学理论教学及社会实践干预。干预前后运用人文关怀能力量表(care ability inventory,CAI)结合反思日志评估研究对象的人文关怀能力,结果显示干预后试验组CAI总分及各维度得分较对照组均有显著提高。叙事医学理念指导下的医学生人文关怀能力双轨培养路径具备有效性和可行性。
- 华倩倩戴香怡尹星皓陈蓓蓓李文
- 关键词：人文关怀社会实践医学人文
- 一种能够抑制弓形虫增殖的小分子抑制剂的筛选及应用方法
- 本发明公开了一种能够抑制弓形虫增殖的小分子抑制剂的筛选方法，其利用Alphascreen实验初步选出11个小分子抑制剂和一个小分子促进剂，这12种药物都是临床用药。在细胞水平上对这12种药物进一步筛选，空斑实验证实GSK...
- 刘淑贤谭峰张芳菲华倩倩曹佳欣王炎胡昕
- 文献传递
