刘维
- 作品数：7 被引量：33H指数：3
- 供职机构：安徽农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：安徽省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 合肥地区奶牛源隐孢子虫的分离与鉴定被引量：12
- 2011年
- 目的分离合肥地区奶牛源隐孢子虫,并鉴定其种类。方法采集安徽省合肥市某奶牛场285头成年母牛粪样,采用饱和蔗糖溶液漂浮法和改良抗酸染色法检测牛粪中隐孢子虫卵囊,并分离纯化隐孢子虫阳性粪样中的卵囊,抽提其基因组DNA作为模板,根据隐孢子虫18S rRNA和HSP70基因设计引物,用PCR和巢式PCR方法扩增目的片段,对巢式PCR产物进行克隆、测序,并运用DNAStar软件对序列进行同源性比对,构建系统进化树。结果两种方法检测均为阳性的粪样有5份,感染率为1.8%(5/285)。隐孢子虫卵囊呈椭圆或卵圆形,饱和蔗糖溶液漂浮法分离的隐孢子虫卵囊大小为7.37μm×6.13μm,形状指数(长/宽)为1.20;改良抗酸染色法检获的隐孢子虫卵囊大小为7.58μm×6.20μm,形状指数为1.22。巢式PCR扩增出的18S rRNA和HSP70基因片段分别为250 bp和325 bp。合肥奶牛源隐孢子虫5株分离株18S rRNA基因与安氏隐孢子虫(Cryptosporidium andersoni)DQ989573序列一致性最高,两者在系统进化树上为同一分支。这5株分离株的HSP70基因序列与安氏隐孢子虫AY954892和DQ989576序列一致性最高,且在系统进化树上为同一分支。结论合肥市某奶牛场分离的奶牛源隐孢子虫为安氏隐孢子虫。
- 孙涛刘维王菊花薛秀恒赵长城李培英
- 关键词：安氏隐孢子虫奶牛
- 隐孢子虫CaNBD基因的克隆与真核表达
- 隐孢子虫病是由隐孢子虫感染引起的一种呈世界性分布的人畜共患寄生虫病。近年来，隐孢子虫因在婴幼儿、幼畜、免疫缺陷者，尤其是艾滋病(AIDS)患者中感染率高且危害严重而倍受重视。虽然国内外学者对隐孢子虫病已进行了广泛而深入的...
- 刘维
- 关键词：隐孢子虫肠上皮细胞真核表达
- 文献传递
- 安徽某动物园灵长类和草食类动物隐孢子虫感染情况调查被引量：3
- 2010年
- 为查明安徽某动物园野生动物隐孢子虫感染情况,采用饱和蔗糖溶液漂浮法和改良抗酸染色法分别对该园44只灵长类动物和41头草食类动物的粪样进行了检查。结果表明:饱和蔗糖溶液漂浮法在6只灵长类动物和2头草食类动物的粪样中查到了隐孢子虫卵囊,感染率分别为13.64%和4.88%;改良抗酸染色法在1只灵长类动物和3头草食类动物的粪样中查到了隐孢子虫卵囊,感染率分别为2.27%和7.32%。经形态学鉴定,从灵长类动物所获虫体为人隐孢子虫(Cryptosporidium hominis);从骆驼所获虫体为安氏隐孢子虫(Cryptosporidium andersoni)。
- 王小龙李培英顾有方徐前明赵长城刘维
- 关键词：隐孢子虫感染率灵长类动物
- 中草药复方制剂对球虫感染鸡免疫器官和生长性能的影响被引量：6
- 2010年
- 为探明中草药复方制剂对球虫感染鸡免疫器官和生长性能的影响,选择80只24日龄健康罗曼蛋公雏,随机分为4组,每组20只。所设组别分别为中药感染球虫组(Ⅰ)、中药不感染球虫组(Ⅱ)、不给药感染组(Ⅲ)和空白对照组(Ⅳ)。将中草药复方制剂添加至饲料中喂给Ⅰ、Ⅱ组,Ⅰ、Ⅲ组于27日龄时接种5×104个/只柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊,于34日龄时称重、剖杀,并摘取胸腺、法氏囊和脾脏等称重。结果表明:Ⅰ、Ⅱ组的平均增重与Ⅳ组相比,差异极显著(P<0.01),同样,Ⅱ与Ⅲ组差异极显著(P<0.01)。在免疫器官指数方面,Ⅰ组和Ⅲ组的脾脏指数与Ⅳ差异极显著(P<0.01)。复方中草药制剂能提高球虫感染雏鸡的生长性能,并能促进雏鸡免疫器官的生长发育,提高饲料转化率。
- 黄兰薛敬洁刘维徐前明李培英
- 关键词：中草药复方制剂柔嫩艾美耳球虫雏鸡免疫器官
- 4种小鼠肠上皮细胞分离培养方法的比较被引量：10
- 2013年
- 【目的】比较4种小鼠肠黏膜上皮细胞(Intestinal epithelial cells,IECs)分离方法的分离效果,建立小鼠IECs的有效分离培养方法,获得小鼠IECs原代细胞,为后续研究做准备。【方法】分别采用组织块培养法、嗜热菌蛋白酶消化法、胶原酶Ⅺ和中性蛋白酶Ⅰ联合消化法以及胶原酶Ⅰ和中性蛋白酶Ⅵ联合消化法共4种方法分离小鼠IECs并培养,通过细胞免疫组织化学法和细胞免疫荧光法对分离的IECs进行细胞特异性鉴定,比较4种方法的分离效果。【结果】组织块培养法所获IECs活力好,增殖能力强,但成纤维细胞污染较严重,细胞纯度低;胶原酶Ⅰ和中性蛋白酶Ⅵ分离法获得的IECs数量少且细胞增殖能力弱;嗜热菌蛋白酶消化法及胶原酶Ⅺ与中性蛋白酶Ⅰ联合消化法所获得的小鼠IECs纯度较高,原代培养时增殖能力稍弱于组织块培养法,但传代后增殖能力趋于稳定。通过细胞免疫组织化学法和细胞免疫荧光法对分离的细胞进行鉴定,结果表明,分离的细胞多数为小鼠IECs。【结论】嗜热菌蛋白酶消化法及胶原酶Ⅺ与中性蛋白酶Ⅰ联合消化法均适合肠道上皮细胞的分离和培养。
- 孙秀梅程帆刘维孙涛薛秀恒李培英王菊花
- 关键词：小鼠小肠上皮细胞
- 不同条件下蔗糖溶液对隐孢子虫卵囊分离纯化效果的比较被引量：1
- 2010年
- [目的]探索以蔗糖溶液作为介质分离纯化隐孢子虫卵囊的最佳条件。[方法]以隐孢子虫感染阳性奶牛粪样为材料,设计5个蔗糖浓度、3个离心时间和3个离心速度进行隐孢子虫卵囊的分离纯化。[结果]蔗糖浓度为1∶2.0和12∶.5时,分离出的卵囊总数极显著大于其他3组(P<0.01),其中1∶2.5组卵囊平均数最大;不同离心时间分离出的卵囊总数在数量上差异均不显著(P>0.05),其中离心20 min时卵囊平均数最大;不同离心速度分离出的卵囊总数的比较表明,3 000 r/min得到的卵囊数量最多。[结论]蔗糖浓度为12∶.5、离心速度为3 000 r/min、离心时间为20 min是隐孢子虫卵囊分离纯化的最佳条件。
- 刘维李锦春李培英徐前明李志明
- 关键词：分离纯化蔗糖浓度
- 感染隐孢子虫奶牛血液免疫和抗氧化指标的变化被引量：3
- 2012年
- 目的检测感染隐孢子虫奶牛血液免疫和抗氧化体系指标。方法对安徽省某奶牛场325头奶牛粪样采用饱和蔗糖溶液漂浮法检测隐孢子虫感染情况。选择隐孢子虫感染强阳性的7头奶牛作为感染组,同时取7头隐孢子虫粪检阴性奶牛作为对照组,早晨饲喂前从奶牛颈静脉采血,分别测定总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、免疫球蛋白(IgG、IgM和IgA)、中性粒细胞吞噬率、T淋巴细胞转化率、白细胞介素-2(IL-2)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、血糖(GLU)、甘油三脂(TG)、Cl-和Ca2+等19项指标。结果 325头奶牛隐孢子虫感染率为31.7%(103/325),根据卵囊的形态和大小,初步鉴定为安氏隐孢子虫(Cryptosporidium andersoni)。与对照组相比,感染组奶牛血清中TP、ALB、IgM、IgA、GSH-Px、ALT、AST、ALP和Cl-含量无显著变化(P>0.05);血清中MDA和NO含量分别升高59.9%和28.1%(P<0.05或0.01);而血清中IgG、SOD、GLU、TG、Ca2+和IL-2含量,以及T淋巴细胞转化率和中性粒细胞吞噬率分别降低了32.9%、11.1%、18.6%、78.9%、14.5%、7.0%、22.0%和20.2%(均P<0.05)。结论感染隐孢子虫奶牛部分免疫指标下降,抗氧化酶活性降低,清除体内自由基的能力减弱。
- 周庆新李锦春徐前明赵长城王希春王菊花刘维李培英
- 关键词：隐孢子虫奶牛免疫指标抗氧化指标
