刁志花
- 作品数：8 被引量：52H指数：3
- 供职机构：首都师范大学附属丽泽中学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学文化科学更多>>
- 呼吸道合胞病毒重组蛋白DsbA-G1F/M2的制备方法及免疫原性研究被引量：3
- 2007年
- 目的建立呼吸道合胞病毒(RSV)重组蛋白DsbA-G1F/M2的制备方法,并研究其免疫原性。方法PCR扩增G1和F/M2基因片段,经酶切后插入原核表达载体pET-DsbA中,构建重组质粒pET-DsbA-G1F/M2,转化大肠杆菌(Escherichiacoli)BL21(DE3),IPTG诱导表达,采用Ni+螯合亲和色谱法纯化尿素变性的包涵体溶液,梯度透析复性,Western-blot鉴定重组蛋白的RSV特异性,免疫BALB/c小鼠,用ELISA测定抗体滴度,MTT法测定细胞毒性T细胞活性(CTL)。结果构建的重组质粒在E.coli中表达了RSV特异性的重组蛋白,经变性、纯化并复性后获得了高纯度的DsbA-G1F/M2(>90%);该蛋白诱导了高滴度的RSV特异性抗体和CTL活性。结论建立了重组蛋白DsbA-G1F/M2的制备方法,该蛋白具有良好的免疫原性,为进一步研究开发RSV重组亚单位疫苗奠定了基础。
- 曾瑞红龚伟梅兴国刁志花郝丽梅
- 关键词：呼吸道合胞病毒免疫原性
- 野菊花提取物抑制呼吸道合胞病毒作用的体外实验研究被引量：40
- 2006年
- 目的评价野菊花提取物体外抑制呼吸道合胞病毒的效果方法采用MTT和空斑减数实验法,以病毒唑为阳性对照,测定野菊花提取物对呼吸道合胞病毒的抑制作用,并就野菊花提取物对呼吸道合胞病毒抑制的作用机制进行了初步研究结果药物的半数有效剂量(EC50)为(60.9±2.41)μg·ml-1,MTT法测定其半数中毒浓度(CC50)为(2.03±0.08)mg·ml-1,选择指数(SI)>33,有意义,在不同时间给药,对病毒的抑制实验中发现呼吸道合胞病毒感染HEp-2细胞后2、4、6、8h给野菊花提取物均有抑制作用(P<0.01),穿入和吸附抑制实验表明其对病毒穿入过程和吸附过程同样均有明显的抑制作用(P<0.01)。
- 张振亚方学平刁志花曾瑞红梅兴国
- 关键词：野菊花呼吸道合胞病毒抗病毒作用
- 高中生物实验几处改进
- 2013年
- 中学生物学是一门以实验为基础的科学课程，依据《普通高中生物课程标准》所编写的课标教材更加突出地体现了生物学科的这一特点。以人教版教材为例，仅3个必修模块中，实验就有32个。选修1“生物技术实践”更是一个纯实验项模块。但是有些实验，
- 刁志花
- 关键词：生物实验生物课程标准中学生物学人教版教材科学课程课标教材
- 一种改进的抗呼吸道合胞病毒药物筛选方法被引量：1
- 2005年
- 目的:在细胞病变抑制实验的基础上,对观察指标和结果评价的方法进行改进,建立一种快速、可靠的筛选抗呼吸道合胞病毒药物的方法.方法:通过观察计数接种病毒后出现的病变数目,确定改进实验中最佳的细胞接种密度和结果判定时间,并推算药物的半数有效浓度EC50.比较空斑减数实验和改进方法测定利巴韦林(病毒唑)的EC50的差异.结果:改进方法和空斑减数实验测得的利巴韦林的EC50平均值没有显著性差异(P＞0.05).最佳实验条件是:每孔接种Hep-2细胞(1.5～2.0)×104个为宜,24～36 h接种病毒,第4～5天可判读最后结果.结论:该方法具有准确可靠、简单和快速的特点,可以应用于抗呼吸道合胞病毒药物的筛选.
- 方学平张振亚曾瑞红刁志花梅兴国
- 关键词：呼吸道合胞病毒抗病毒药药物筛选
- 肿瘤抑癌基因联合治疗的新进展被引量：3
- 2006年
- 基因治疗是一种新型的治疗方法.抑癌基因治疗已经普遍用于临床,但由于肿瘤的形成是多因素、多基因参与的复杂过程,单基因的治疗效果并不理想,而联合基因治疗是目前的研究热点.本文对部分抑癌基因间联合治疗肿瘤的现状进行了简单综述.
- 刁志花刘凤华王长振尤勇
- 关键词：基因治疗抑癌基因联合基因治疗
- 基于小鼠肿瘤模型的建立及抗肿瘤药物的药效评价
- 恶性肿瘤严重威胁着人类的生存质量，被称为人类健康的第一杀手。近年来对恶性肿瘤的治疗虽取得了长足的进步，但临床用药仍然停留于文献资料和临床经验基础上，对不同肿瘤患者使用固定的治疗方案，不可避免地带来用药的盲目性及药物的耐药...
- 刁志花
- 关键词：联合基因阿霉素细胞凋亡抗肿瘤药物
- 文献传递
- 一种农杆菌介导的赤霉菌CCRC3.572的转化方法被引量：4
- 2006年
- 目的:建立农杆菌Ti质粒介导的转化赤霉菌的新方法。方法:以农杆菌Ti质粒pCAMBIA0390为基础,构建带有潮霉素抗性基因表达盒的双元载体,并用农杆菌介导的方法转化赤霉菌。结果:构建了双元载体pCAMBIA0390-hph(PgpdA),并获得了具有潮霉素抗性的赤霉菌转化子。结论:农杆菌介导的方法适于赤霉菌的转化,为赤霉菌的遗传研究提供了一种新的手段。
- 郝丽梅龚伟梅兴国刁志花曾瑞红
- 关键词：赤霉菌农杆菌双元载体
- 紫杉醇衍生物对人喉癌细胞系Hep-2的抑制作用被引量：1
- 2006年
- 目的:通过体外实验评价紫杉醇衍生物GT对人喉癌细胞系Hep-2的抑制作用。方法:应用MTT法测定GT对Hep-2细胞的增殖抑制作用;通过细胞形态学及流式细胞术考察GT对Hep-2细胞诱导凋亡的作用。结果:MTT实验显示GT对Hep-2细胞具有明显的增殖抑制作用;当GT作用细胞后,在光镜下能观察到较为典型的细胞凋亡的形态学变化,如细胞核固缩、染色质凝集成新月型紧贴于核膜周边,核碎裂、染色质断片化、凋亡小体形成等。流式细胞仪分析结果可见G2/M期的细胞比例明显增加,并出现典型的亚二倍体“凋亡小峰”。结论:GT对Hep-2细胞的生长有明显的抑制作用,其效果与紫杉醇基本相同,可使细胞分裂阻滞于G2/M期,并诱导肿瘤细胞凋亡,有进一步研究开发的价值。
- 刁志花龚伟尤勇曾瑞红张振亚郝丽梅梅兴国
- 关键词：紫杉醇增殖抑制细胞凋亡
