冷武军
- 作品数：7 被引量：9H指数：2
- 供职机构：武汉生物制品研究所更多>>
- 发文基金：国家科技攻关计划“九五”国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生化学工程生物学更多>>
- 应用生物反应器大规模培养杂交瘤细胞生产体内治疗用WuT3单克隆抗体被引量：6
- 1998年
- 用3．5L和14L生物反应器培养WUT3杂交瘤细胞，结果表明用人血清可以代替牛血清培养WuT3细胞，在1％人血清培养液中添加适当营养成分，可达到10％小牛血清浓度下的细胞浓度（1．5×106／ml）和单抗产量（大于50μg／ml）。放大到75L生物反应器中采用半连续方式培养，建立了中试培养工艺流程和质控点，收获时细胞浓度为1.0×106～1．5×106／ml，单抗产量为40～70μg／ml，平均日产单抗达1g。在3．5L、14L、75L逐级放大培养过程中，细胞支原体为阴性，收获上清中单抗免疫活性合格，热原试验合格。
- 邹昌勇杜厚明冷武军朱俊铭喻远祥雷继军陈明洁齐建新杨明詹骞刘建陈晓玲董之昌
- 关键词：杂交瘤细胞单克隆抗体生物反应器
- WuT3无血清培养上清中单抗的纯化工艺建立
- 目的：对WuT3杂交瘤细胞无血清生物反应器培养上清中单克隆抗体进行分离纯化，建立中试分离纯化工艺。
方法：采用二步离子交换层析法结合硫酸铵盐析法分离纯化wul3单抗。在通过小量试验优化纯化参数后，进行中量放大和...
- 詹骞齐建新王志友董之昌邹昌勇杜厚明冷武军雷继军杨明端义坤孙可芳侯胜桐
- 关键词：无血清培养离子交换层析纯化生物制品
- 文献传递
- 人甲状旁腺素N-端34肽基因的合成、克隆和融合表达
- 2005年
- 目的构建重组人甲状旁腺素N-端34(PTH34)肽的大肠杆菌融合表达菌株,并对其表达产物进行检测。方法选用大肠杆菌偏爱密码子,设计优化的人甲状旁腺素N-端34肽基因序列,通过6个DNA片段分段合成、片段连接、PCR扩增,经TA克隆到pMD18载体中,经测序验证,构建GST融合表达载体。结果经SDS-PAGE检测PTH(1-34)肽与GST蛋白的融合表达,经Westernblot分析具有免疫活性,通过GST亲和层析和Xa因子酶切,利用小分子蛋白电泳可检测到PTH(1-34)肽。结论已获得了能表达GST-PTH(1-34)融合蛋白的菌株。表达产物具有免疫活性,且能被Xa因子消化得到PTH(1-34)肽。
- 文力王革非冷武军王贞慧杨光
- 关键词：甲状旁腺素基因合成基因克隆免疫活性
- 大规模提取体内治疗用单克隆抗体的工艺被引量：1
- 1998年
- 用两步法从WuT3细胞培养上清中提取WuT3单克隆抗体（McAb），首先将培养上清直接上SP离子交换柱，再上DEAE柱，获取提纯的McAb。该工艺的确定及放大均在Pharmacia产Biopilot中试纯化系统上进行。一次投料20L，纯化规模达2g，纯化的McAb经SDS－PAGE测定，纯度基本达到95％，免疫荧光活性为66±9％。热原质合格，支原体、残余DNA均为阴性，达到体内制剂质控要求。
- 詹骞邹昌勇雷继军冷武军陈明洁刘建朱俊铭喻远祥陈晓玲董之昌
- 关键词：单克隆抗体
- WuT3无血清培养上清中单克隆抗体纯化工艺的建立被引量：2
- 2007年
- 目的对WuT3杂交瘤细胞生物反应器无血清培养上清中单克隆抗体进行分离纯化,建立中试分离纯化工艺。方法采用两步离子交换层析法结合硫酸铵盐析法分离纯化WuT3单抗。在通过小量试验优化纯化参数后,进行中量试验和中试放大。结果建立的纯化方法可以放大到中试规模,每批投料30000ml培养上清,可收获单抗达1.5g,单抗总回收率大于60%。经分离纯化后,单抗IgG纯度大于95%,采用免疫荧光法检测抗体活性合格。结论建立了一条生物反应器无血清培养杂交瘤细胞大规模分离纯化单抗的工艺路线。
- 詹骞邹昌勇杜厚明冷武军雷继军杨明端义坤孙可芳侯胜桐齐建新王志友董之昌
- 关键词：无血清培养杂交瘤细胞单克隆抗体纯化工艺
- 人甲状旁腺素N端34肽基因的合成克隆和融合表达
- 选用大肠杆菌偏爱密码子,设计优化的人甲状旁腺素N端34肽基因序列,通过六个DNA片段分段合成,经过片段连接、PCR及TA克隆、测序验证,构建了GST融合表达载体。经过SDS-PAGE、检测到了PTH(1-34)肽与GST...
- 文力王革非冷武军王贞慧杨光
- 文献传递
- 应用无血清培养中试的三批WuT3单抗的质量分析
- 2001年
- 邹昌勇冷武军杜厚明詹骞邱义安孙可芳赵亚杰赵良
- 关键词：无血清培养
