黄吉城
- 作品数:176 被引量:731H指数:15
- 供职机构:广东检验检疫技术中心更多>>
- 发文基金:国家质检总局科技计划项目广东出入境检验检疫局科技计划项目广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学轻工技术与工程农业科学更多>>
- 一种检测埃博拉病毒、马尔堡病毒、拉沙热病毒和裂谷热病毒的多重PCR试剂盒及其引物
- 本发明提供了一种同时检测埃博拉病毒、马尔堡病毒、拉沙热病毒和裂谷热病毒的多重荧光PCR检测试剂盒及其引物。本发明提供的试剂盒包括RT-PCR缓冲液、RT-PCR酶混合液等常规试剂外,还包括四种病毒的引物和探针,如SEQ ...
- 相大鹏师永霞郑夔黄吉城幸芦琴李小波洪烨苏锦坤钟玉清郭波旋
- 文献传递
- 广东口岸入境废弃物现状调查及其潜在危害分析
- 2010年
- 我国每年要从国外进口大量的可再生废弃物,如废纸、废钢铁、废塑料等,该类物质经回收利用,成为我国经济建设的宝贵原料。近年来,我国入境可再生废弃物数量呈明显增长趋势,对我国一些领域的生产建设起到了重要作用;同时,也有一些是通过非法途径入境的"洋垃圾",如我国明令禁止进口的废旧电子产品、废旧衣物等。入境废弃物可能携带或产生对入境口岸环境卫生和人体健康有害的物质。通过对广东省口岸入境废弃物种类、数量和来源的调查研究,了解入境废弃物中可能含有的有毒、有害物质,分析其对口岸环境卫生及相关人员身体健康的潜在危害。
- 伊怀文黄吉城相大鹏
- 一种检测黄热病病毒的荧光定量RT-PCR试剂盒及其检测方法和应用
- 本发明公开了一种检测黄热病病毒的荧光定量RT-PCR试剂盒,包括RT-PCR缓冲液,逆转录反应酶混合物和DEPC水,正向引物5’-GTTAGAGRAGAGCCTCCAGGGAA-3’;反向引物5’-AGCAAACTGTG...
- 师永霞相大鹏李小波黄吉城郑夔洪烨郭波旋幸芦琴钟玉清
- 文献传递
- 6种虫媒病毒微孔膜芯片检测方法的研制与应用被引量:1
- 2012年
- 目的研制能同时检测6种口岸重要虫媒病毒的微孔膜芯片。方法针对包括1~4型登革病毒、乙型脑炎病毒、西尼罗病毒、黄热病毒、基孔肯雅病毒和裂谷热病毒等6种虫媒病毒,选择合适的保守基因,设计特异性的PCR引物(5'端标记生物素)和检测探针,通过参数优化建立单管多重RT-PCR扩增体系;然后按每个阵列5×5的格式,并确保点样区域为96孔板的微孔大小,将探针喷点到处理后的尼龙膜上,通过条件优化建立稳定的PCR产物与固化探针的杂交体系;采用碱性磷酸酯酶标记链亲和素和化学显色底物NBT/BCIP来检测特异性的PCR杂交产物。选取2012年1—6月份从口岸输入的疑似登革热发热病例的临床血清标本,提取RNA后,直接采用本研究建立的微孔膜芯片进行未知虫媒病毒的快速检测。结果用1~4型登革病毒、乙型脑炎病毒、西尼罗病毒和基孔肯雅病毒等7种毒株、1种黄热病毒疫苗株和1种裂谷热病毒核酸体外转录的RNA模板验证已建立的微孔膜芯片,获得比较特异和稳定的实验结果。应用该研究建立的方法,从3份疑似登革热发热病例的临床血清标本中检出了1例登革1型病毒和2例登革2型病毒,与实时荧光PCR检测结果相符。结论该研究建立的6种虫媒病毒微孔膜芯片检测方法,具有快速、准确、自动化和高通量等特点,为快速应对口岸输入性发热病例提供了非常有价值的检测手段,也为进一步开发更多指标的病原体检测方法提供良好的示范作用。
- 郑夔丁国允李小波师永霞苏锦坤黄吉城
- 关键词:虫媒病毒
- 60mer寡核苷酸芯片制备及杂交系统的优化
- 2008年
- [目的]寡核苷酸芯片制备及杂交过程中的影响因素很多,本实验针对其中主要影响因素进行优化,以筛选出最佳的条件,对芯片制备及杂交系统进行优化。[方法]通过改变芯片打印加样量、斑点数和不同探针浓度,挑选出芯片制备的实验条件;采用正交试验法,以信噪比(SNR值)为评估指标,分析芯片杂交的最佳条件。[结果]最佳实验条件为:增加预打印斑点数,探针浓度为1μg/μl,与纯化后的荧光标记样品在50%甲酰胺,10×SSC,0.2%SDS杂交液中42℃杂交4h,洗脱液每次洗脱时间为1min。[结论]此方法适用于60mer寡核苷酸芯片的制备及杂交效率的提高。
- 张海燕马文丽黄吉城商涛廖之君郭波旋郑文岭
- 关键词:寡核苷酸芯片正交试验
- 一种出入境检疫中常见病毒联合检测分型基因芯片及其检测方法
- 本发明提供了一种出入境检疫中常见病毒联合检测分型基因芯片及其检测方法。本发明的一种出入境检疫中常见病毒联合检测及分型基因芯片,包括固相载体及固定在固相载体上的寡核苷酸探针,寡核苷酸探针包括流感病毒探针、登革热病毒探针、黄...
- 黄吉城马文丽张海燕相大鹏幸芦琴钟玉清郭波旋胡龙飞洪烨师永霞李小波郑夔商涛郑文岭
- 文献传递
- 新疆出血热病毒的实时荧光RT-PCR检测方法研究
- 2012年
- 目的:建立新疆出血热病毒的实时荧光RT-PCR检测方法。方法:分析新疆出血热病毒核酸S片段序列的保守性,设计新疆出血热病毒实时荧光RT-PCR引物和探针。以体外转录后的RNA作为阳性对照模板,摸索出实时荧光RT-PCR检测的最佳引物浓度、探针浓度和反应体系条件,并进行灵敏度和特异性分析。结果:建立的新疆出血热病毒的实时荧光RT-PCR检测方法最佳反应体系为:正向引物CCHFV-FP终浓度250 nM,反向引物CCHFV-RP终浓度500 nM,探针CCHFV-Probe终浓度500 nM;扩增程序为:50℃10 min,95℃10 min;95℃5 s,57℃20 s 45次循环。该方法最低检测限约为2 copies病毒/反应,与森林脑炎病毒和汉坦病毒无交叉反应。结论:该方法灵敏度高、特异性强,适用于新疆出血热病毒的快速检测。
- 苏锦坤师永霞郑夔李小波黄吉城相大鹏幸芦琴郭波旋
- 关键词:新疆出血热病毒实时荧光RT-PCR
- 交叉引物等温扩增技术在恶性疟疾快速检测中的应用被引量:9
- 2013年
- 目的建立一种快速、敏感、特异检测恶性疟原虫的交叉引物等温扩增(cross priming amplification,CPA)技术。方法根据疟原虫的18SrRNA基因保守序列,设计CPA引物和探针。分别用CPA法、吉氏染色镜检法检测78份发热患者血样,验证CPA法特异性和灵敏性。结果采用CPA法对不同病原体核酸的检测结果显示,38份含有恶性疟原虫血样中检出37例阳性,其他病原体检测结果均为阴性,证明其特异性良好;该方法检测的灵敏度可达102拷贝/μl;与镜检法比较,其检测的灵敏度为97.37%,特异性为100%,准确度为98.72%。结论用于检测恶性疟原虫的CPA检测体系具有简便、快速、灵敏、特异的优点,可用于临床、预防和出入境口岸现场疟疾的快速检测。
- 祁军于智睿詹曦菁黄吉城李智慧
- 关键词:恶性疟疾疟原虫
- 浅述口岸卫生检疫实验室建设
- 2017年
- 作为口岸卫生检疫核心能力建设的重要环节,卫生检疫实验室在历次传染病疫情防控中发挥了重要的技术支撑作用。2009年甲型H1N1流感疫情席卷全球之时,检验检疫系统中具备病原体检测能力的实验室很少,广东出入境检验检疫局检验检疫技术中心卫生检疫实验室充分发挥了自身强大的科技优势,成功地检出国境口岸首例甲型H1N1流感病例(广东地区首例,全国第4例)。历经中东呼吸综合征、人感染高致病性H7N9禽流感、埃博拉病毒病、寨卡热、黄热病、裂谷热疫情,检验检疫系统已逐渐形成由点到面、日益严密的口岸传染病检测体系,越来越多的口岸卫生检疫实验室检出了多种重要病例。在新的历史条件下,卫生检疫实验室应更专业化、规范化并突出严谨性,更好地为卫生检疫提供技术支持。
- 李小波黄吉城
- 关键词:甲型H1N1流感卫生检疫实验室
- 广东地区345例SARS病例流行特征分析被引量:4
- 2004年
- 黄平俞守义黄吉城陈清李晖陈秋霞李灵辉梁文佳聂军
- 关键词:急性呼吸综合征SARS传染性非典型肺炎IAP抗体