麻广
- 作品数：13 被引量：21H指数：2
- 供职机构：成都生物制品研究所有限责任公司更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程更多>>
- 水痘-带状疱疹病毒(VZV84-7株)在人二倍体细胞(2BS株)中感染复数的分析被引量：1
- 2014年
- 目的探讨水痘-带状疱疹病毒（VZV84-7株）在人二倍体细胞（2BS株）上的感染活性,确定感染复数（MOI）。方法使用100 ml小方瓶培养人二倍体细胞（2BS株）,待长成致密单层后,接种病毒滴度为5.5 lgPFU/ml的水痘-带状疱疹病毒（VZV84-7株）,每瓶接种量分别为0.02、0.1、0.3、0.5、0.8、1、1.5和2 ml,于显微镜下连续观察细胞病变情况及病变比例,并连续记录收获时间;采用蚀斑法测定病毒滴度。结果当病毒接种量为0.02 ml时,细胞大部分生长正常,呈极性排列,无形态典型、广泛的病变,通过延长收获时间也无法获得形态典型、广泛的病变;当病毒接种量不低于0.1 ml时,呈典型、广泛的病变,随着病毒接种量的增加,收获时间逐渐缩短;仅病毒接种量为0.02 ml组细胞的病毒滴度低于3.7 lgPFU/ml;确定MOI在0.004 0~0.019 9之间,均可制备出质量稳定、符合成都生物制品研究所有限责任公司《水痘减毒活疫苗制造及检定规程》要求的毒种。结论确定了水痘-带状疱疹病毒（VZV84-7株）感染人二倍体细胞（2BS株）合适的MOI,为水痘疫苗生产工艺的优化提供了参考依据。
- 侯良玉麻广丁秀红黄林牟鑫尧李立刘亚宇李永忠刘晔
- 关键词：水痘-带状疱疹病毒
- 水痘-带状疱疹病毒Oka株gC基因的克隆及序列分析
- 2017年
- 目的对水痘-带状疱疹病毒(varicella-zoster virus,VZV)Oka株gC基因进行克隆及序列分析。方法取第40代Oka VZV疫苗株,反复冻融3次后,收集上清,提取病毒DNA,根据NCBI登录的Dumas株VZV序列,设计引物,扩增gC基因,与pMD19-T Vector连接后,热转化至E.coli Competent Cells JM109中,挑选阳性菌落进行测序;将得到的序列与Gen Bank中登录的其他12株VZV毒株的gC基因序列,进行核苷酸序列和氨基酸水平分析。结果 13株VZV-gC基因开放阅读框(ORF)的核苷酸长度为1 557~1 776 bp,编码的蛋白由519~592个氨基酸组成。核苷酸序列同源性在94.8%~100%之间,氨基酸序列同源性在93.9%~100%之间。R2重复拷贝数为7,Dumas、SVETA和Ellen重复拷贝数为6,LAX1为4。结论 VZV Oka株gC蛋白具有高度的保守性,与其功能的发挥密切相关。
- 何云松文崇艳麻广邹蔚然刘亚宇李立刘晔
- 关键词：水痘-带状疱疹病毒GC基因
- 不同细胞基质制备的麻疹减毒活疫苗质量比较被引量：6
- 2004年
- 目的 比较人二倍体细胞 2BS株与鸡胚细胞制备的麻疹减毒活疫苗质量。方法 观察两种细胞基质制备的麻疹减毒活疫苗的病毒滴度、稳定性、抗体阳转率及GMT。结果 两种细胞基质制备的麻疹减毒活疫苗的病毒滴度分别为 4 75、4 6 4和 4 83LgCCID50 ml,热稳定性良好 ,低温保存 2 0年的滴度无明显下降 ;人体免疫接种后均未出现局部与全身反应 ,抗体阳转率均为 10 0 % ,GMT分别为 36 14、2 8 38和 78 76。
- 沈红杰公殿力邸相辉麻广崔玉华李文波刘志强徐秀凤
- 关键词：细胞基质麻疹减毒活疫苗人二倍体细胞免疫效果
- 水痘-带状疱疹病毒Oka株和84-7株基因特征的分析被引量：1
- 2017年
- 目的对水痘-带状疱疹病毒(varicella-zoster virus,VZV)Oka株和84-7株的部分基因特征进行分析,为建立Oka株和84-7株的鉴别方法提供依据。方法利用PCR技术扩增相关基因,并运用生物信息学软件对水痘-带状疱疹病毒OKa株和84-7株的Pst I酶切位点、抗原蛋白基因序列(ORF14,ORF68)、高突变区域(ORF62)及84-7株复制起点进行序列比较和分析。结果 Oka株酶切位点特征为Pst I-Sma I^+Bss HII^+Nae I^+,84-7株的酶切位点特征为Pst I^+Sma I^-Bss HII^-Nae I^-;Oka株和84-7株ORF14编码的蛋白质同源性为99.8%,3个碱基的差异导致了3个氨基酸的变化,且这两株病毒株的R2可变区的串联重复单位拷贝数均为7;Oka株和84-7株ORF68编码的蛋白质同源性为100%,且存在2个低复杂性区域(LCR);ORF62编码区蛋白质的同源性为99.2%,具有14个低复杂性区域;84-7株复制起点区域包含一个13TA+19GA结构。结论 Oka株和84-7株的同源性很高,但在酶切位点方面存在差异,可用于Oka株和84-7株的鉴别,为今后确立水痘-带状疱疹病毒毒株的鉴别方法提供依据。
- 邹蔚然刘亚宇廖海棠麻广何云松刘晔
- 关键词：水痘-带状疱疹病毒酶切位点基因特征同源性
- 麻疹减毒活疫苗毒种感染剂量的研究及疫苗临床观察
- 2004年
- 目的研究麻疹减毒活疫苗毒种的最佳感染剂量及不同感染剂量的毒种制备的麻疹减毒活疫苗的临床反应和免疫原性。方法用不同的感染剂量制备麻疹减毒活疫苗,测定疫苗滴度,通过疫苗滴度的比较,找出最佳的感染剂量。将麻疹减毒活疫苗接种易感健康儿童,观察临床反应,采血,测定血凝抑制抗体。结果毒种的感染剂量为11000时,制备的麻疹减毒活疫苗的滴度最高。毒种不同感染剂量制备的疫苗,免疫接种后,均未出现局部反应和全身反应,血凝抑制抗体均大于14,阳转率为100%。结论麻疹减毒活疫苗毒种的最佳感染剂量为1∶1000。不同感染剂量毒种制备的疫苗之间临床反应及免疫原性无差别,均具有安全性和有效性。
- 公殿力麻广哈秀杰王瑛杰徐俊峰崔玉华徐秀凤
- 关键词：麻疹减毒活疫苗毒种
- 水痘-带状疱疹病毒84-7株基因特征分析被引量：2
- 2016年
- 目的分析水痘-带状疱疹病毒(varicella-zoster virus,VZV)84-7株的基因特征。方法利用PCR法分别扩增VZV84-7株ORF38(PstⅠ)、ORF54(BglⅠ)、ORF62(SmaⅠ、Bss HⅡ、NaeⅠ)共5个酶切位点片段,运用生物信息学软件对5个酶切位点进行分析;PCR扩增病毒复制起点,分析VZV84-7株复制起点特征;PCR扩增VZV84-7株g E基因,对该基因进行序列分析。结果 VZV84-7株的酶切位点特征为:PstⅠ^+BglⅠ^+SmaⅠ^-Bss HⅡ^-NaeⅠ^-;复制起点区域包含1个13TA+19GA结构;g E基因序列与Oka株相比,在第1 170位存在1个碱基差异,为C→A,属于无义突变,但编码区氨基酸序列同源性为100%。结论 VZV84-7株的酶切位点和复制起点均有特异性,同时VZV84-7株与Oka株的g E基因仅有1个碱基突变,氨基酸序列同源性为100%。
- 邹蔚然刘亚宇何云松刘晔麻广廖海棠李永忠
- 关键词：水痘带状疱疹病毒基因聚合酶链式反应酶切位点
- 麻疹减毒活疫苗生产的季节性及周期性
- 目的;研究麻疹减毒活疫苗生产的规律性.方法:以季、年为单位统计高滴度疫苗的百分率,进行分析、研究.结果:一年中,春、秋两季制备出高滴度疫苗的百分率大都在10﹪以上,冬、厦两季制备出高滴度疫苗的百分率大都低于5﹪.多年中,...
- 公殿力冉姝王斐麻广崔玉华王瑛杰
- 关键词：麻疹减毒活疫苗季节性
- 文献传递
- 麻疹减毒活疫苗生产的季节性及周期性
- 目的:研究麻疹减毒活疫苗生产的规律性。方法:以季、年为单位统计高滴度疫苗的百分率,进行分析、研究。结果:一年中,春、秋两季制备出高滴度疫苗的百分率大都在10%以上,冬、夏两季制备出高滴度疫苗的百分率大都低于5%。多年中,...
- 公殿力冉姝王斐麻广崔玉华王瑛杰
- 关键词：季节性
- 文献传递
- 水痘减毒活疫苗(VZV84-7株)病毒培养时间优化被引量：1
- 2016年
- 目的：优化水痘减毒活疫苗（VZV84-7株）的病毒培养时间.方法：按固定MOI区间0.001～0.01感染细胞;从病毒培养70h起,以5h为间隔分5组收获病毒,采用蚀斑法对病毒收获物进行病毒滴定,通过比较,获得滴度较高病毒收获物的培养时间;再根据此时间以1h为间隔分5组进行实验,用显微镜观察记录病变量及病变细胞情况,采用蚀斑法测定病毒收获物滴度.结果：病毒培养70～90h时,随病毒培养时间的延长,病变量和病毒收获物滴度出现先升高后降低的现象,分别在培养80h和85h时获得较高滴度的病毒收获物;病毒培养82～86h时,病变量和病毒收获物滴度差异不明显.结论：病毒培养时间在82～86h间能获得滴度较高的病毒收获物.
- 曾昊哈秀杰李毅梁本丁秀红麻广刘亚宇
- 长47株麻疹减毒活疫苗纯化毒种三级种子批的建立及疫苗的临床观察被引量：2
- 2005年
- 目的:建立长47株麻疹减毒活疫苗纯化毒种三级种子批;进行疫苗的临床观察.方法:将长47株麻疹减毒活疫苗毒种从26代连续传代至38代,其中27代定为原始种子批;29代定为主种子批;30～38代定为工作种子批.将不同代次的毒种制备疫苗,接种麻疹易感儿童,观察麻疹抗体的阳转率及GMT值.结果:新建立的长47株麻疹减毒活疫苗纯化毒种三级种子批,符合<中国生物制品规程>2000年版的要求.27代、32代疫苗的阳转率均为100%,GMT值分别为56.3、44.2.结论:新建立的长47株麻疹减毒活疫苗纯化毒种三级种子批,可作为制备麻疹减毒活疫苗的种子批.长47株麻疹减毒活疫苗毒种具有良好的免疫原性及安全性.
- 公殿力李开军王舰兵李春明刘丽宣黎波王丽华刘延威麻广崔玉华喻秀杰孟东方
- 关键词：种子批阳转率GMT
