顾松叶
- 作品数：28 被引量：127H指数：6
- 供职机构：舟山市疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：浙江省科技厅项目舟山市医药卫生科技计划项目浙江省高校中青年学科带头人科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学轻工技术与工程更多>>
- 对虾病毒DNA/RNA的实时荧光定量RT-PCR同步检测方法研究
- 2013年
- 为建立同步检测对虾DNA/RNA病毒的实时荧光定量反转录PCR(RT-PCR)方法,提高检验检疫工作效率,探索了一种新的实时荧光定量PCR扩增反应程序。结果显示,应用优化的实时荧光定量RT-PCR检测4种对虾病毒(白斑综合症病毒、传染性皮下及造血器官坏死病毒,桃拉综合征病毒、黄头病毒)DNA/RNA,扩增曲线形态典型,扩增效率理想(E值分别为1.06、1.07、0.92、0.92),标准曲线线性良好(r=1),重复性一致(标准差0.05～0.46,变异系数0.26%～1.62%),灵敏度高,且与实时荧光定量PCR相比差异不显著(平均Ct值误差0.04～0.40,t值0.53～2.50,P>0.05),检测时间约1h。优化的荧光定量RT-PCR可以用于4种对虾病毒DNA/RNA的快速定量检测。
- 沈飚王忠发胡兴娟顾松叶
- 关键词：对虾病毒RNA
- 海鱼弧菌的分离鉴定及药敏试验被引量：1
- 2004年
- [目的 ]检测登步乡养殖的三疣梭子蟹发病的主要病原菌。[方法 ]样本参考何晓青主编的《卫生防疫细菌检验》进行分离鉴定和药敏试验 ,并结合API 2 0E试剂条鉴定结果。[结果 ]从发病三疣梭子蟹中分离到海鱼弧菌 ,并经感染试验证实该菌高浓度 ( 10 8cfu/ml)能使三疣梭子蟹致死。该菌除对青霉素G、羧苄青霉素、万古霉素 ,杆菌肽具有耐药性外 ,对氨基氮类、头孢类和喹喏酮类药物均敏感。[结论 ]海鱼弧菌是该乡养殖梭子蟹发病的主要病原菌之一 ,氨基氮类、头孢类。
- 石亚素童国忠顾松叶
- 关键词：三疣梭子蟹药敏试验
- 实时荧光定量PCR及RT-PCR与常规PCR及RT-PCR检测对虾病毒效果的比较被引量：3
- 2012年
- 常规PCR及RT-PCR已用于对虾DNA及RNA病毒检测,但存在费时、灵敏度较低、不能定量等问题。建立了TaqMan实时荧光定量PCR及RT-PCR方法,分别用于检测白斑综合症病毒(WSSV)、传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)及桃拉综合征病毒(TSV)、黄头病毒(YHV)4种对虾病毒。与常规PCR及RT-PCR比较,所建立的TaqMan实时荧光定量PCR及RT-PCR检测上述4种对虾病毒不仅有很高的特异性,检测灵敏度也提高了10～100倍,同时还具有快速、简便、不污染环境、重复性好、实时定量等优点,可明显提高对虾病毒检验检疫工作质量及效率。
- 沈飚王忠发胡兴娟顾松叶
- 关键词：对虾病毒
- 1例婴幼儿HIV感染早期诊断及随访检测结果被引量：2
- 2019年
- 婴幼儿可以经胎盘或哺乳从母亲获得艾滋病病毒(HIV)抗体,因此常规的HIV抗体检测无法诊断其是否感染HIV,应用HIV核酸检测技术可实现婴儿HIV感染早期诊断。在实际工作中遇到1例婴幼儿HIV感染早期诊断阳性,满18个月后出现抗体难以确定的病例,在此报告对其诊断及检测情况。
- 丁晓贝夏燕顾松叶王海郭志宏范钦张文君张佳峰
- 关键词：艾滋病病毒婴幼儿核酸
- HIV抗体不确定样本的特征与确证策略研究被引量：19
- 2013年
- 目的分析HIV抗体不确定样本的血清学特征,结合筛查结果,探索HIV抗体不确定样本的分类确证策略。方法以随访最终结果为金标准,回顾分析和评价抗体筛查结果及免疫印迹试验各种带型对判定HIV不确定的效果。结果102例不确定样本中,env类、gag类和pol类带型分别占36.27%、6.86%和56.86%。单一带型中,P24带型占的比例最高,为54.90%;其次是gp160和p24带型,占12.75%。73例随访样本中,6例发生HIV抗体阳转,均为env类不确定,该类发生阳转比例为23.08%;首次样本经酶标试剂检测抗体阳性(S/CO>6)且快速试剂强阳性,其随访样本条带均转归为阳性。结论 HIV抗体不确定样本中,gag类不确定最常见,但基本上都是非特异性反应;env类不确定发生阳转的可能性较大。HIV抗体不确定及首次确证试验刚符合阳性判定标准的样本应当慎重对待,根据带型特征联合运用抗体筛查结果有助于判定不确定结果及提高检测准确率。
- 王海蒋文雅顾松叶
- 关键词：HIV抗体
- 快速荧光定量PCR检测副溶血性弧菌及其毒力基因方法建立与应用效果评价的研究被引量：12
- 2009年
- 目的:建立一种快速、特异、灵敏、定量检测副溶血性弧菌及其毒力基因的方法,用于副溶血弧菌性食物中毒的应急检测。方法:根据GenBank中副溶菌(AY-289609)全基因序列上不耐热溶血素基因(tlh)、耐热直接溶血素基因(tdh)、耐热相关溶血素基因(trh)为靶序列,设计引物与Tagman探针并对模板DNA制备方法和PCR反应时间进行改进与优化以提高检测速度,采集食物中毒样本与国家标准方法进行现场平行比对。结果:本方法检测时间仅需30 min。检出限2×101cfu/ml,定量线性范围2×103cfu/ml^2×108cfu/ml,对77份患者粪便增菌前后平行检测结果显示该方法检出率明显高于国家标准方法并具有统计学意义(χ2=58.80,P<0.01;χ2=42.98,P<0.01)。与7种常见肠道细菌均无反应。对6个浓度的副溶血弧菌测定的批内标准差在0.10~0.56之间。结论:该方法可在30 min内完成粪便中副溶血性弧菌的tlh、tdh、trh的检测,具有灵敏度高、特异性好、结果稳定、抗杂菌与药物干扰能力强等优点。非常适合食物中毒的应急检测。
- 王忠发顾松叶王虹玲
- 关键词：副溶血性弧菌
- 1例HIV患儿母婴阻断失败后多次实验室检测情况被引量：2
- 2018年
- 艾滋病母婴传播是15岁以下幼儿感染艾滋病病毒（HIV）的主要途径。感染HIV的婴儿疾病进展非常迅速,如不接受任何抗病毒治疗（ART）,50%以上会在2岁前死亡。尽早明确HIV感染孕产妇所生婴儿的HIV感染状态,是对其进行治疗和干预的前提。现将调查的案例情况简述如下。
- 顾松叶王海吴文杰张均和陈圆静余海燕
- 关键词：艾滋病母婴阻断核酸
- 两种RNA试剂盒提取肠道病毒71型的效果比较被引量：1
- 2009年
- 顾松叶张志超蒋文雅王忠发
- 关键词：肠道病毒EV71
- 舟山海产品副溶血性弧菌污染及毒力基因分析被引量：14
- 2007年
- 石亚素张行钦薛超波顾松叶龚红霞梅玲玲程苏云
- 关键词：副溶血性弧菌污染舟山渔场毒力基因海产品基因分析副溶血弧菌
- 用FQ-PCR检测嗜水气单胞菌的方法
- 本发明提供的用FQ-PCR检测嗜水气单胞菌的方法，应用FQ-PCR方法和针对仅存于有毒力的嗜水气单胞菌中的因子的上下游引物对模板中是否存在有毒力的嗜水气单胞菌进行检测，所用上下游引物及TaqMan探针是针对溶血素基因（h...
- 王志铮顾松叶杨阳王忠发赵蓓蓓
