陈琳
- 作品数：17 被引量：55H指数：3
- 供职机构：北京大学第一医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- 肾癌相关基因GYLZ-RCC18对肾癌细胞系GRC-1抗死亡作用机制的研究被引量：1
- 2001年
- 目的 应用反义基因转染技术探讨肾癌相关新基因GYLZ RCC18与肾癌细胞死亡 (包括坏死及凋亡 )之间的关系 ,并探讨肾癌基因疗法的新途径。 方法 用脂质体包裹的新基因GYLZ RCC18第一编码区起始处的 2 0个碱基的反义和正义寡核苷酸导入肾癌细胞系GRC 1,应用流式细胞技术和伊红排斥实验连续检测GYLZ RCC18反义寡核苷酸对肾癌细胞凋亡、坏死的影响。 结果 导入GYLZ RCC18反义寡核苷酸后 ,可大量杀伤GRC 1细胞并明显促进GRC 1细胞坏死 ,于第 4天达到杀伤高峰约 6 0 % ;同时可连续 8d诱导凋亡峰 ,最高于第 2天达到约 2 2 5 % ,两种作用曲线形状和峰值不完全一致。 结论 GYLZ RCC18是肾癌相关的重要的新的癌基因 ,GYLZ RCC18的表达可通过两种不同的机制即抗癌细胞坏死机制和抗凋亡机制发挥对肾癌细胞的保护作用 ,GYLZ RCC18可能对肾癌细胞生存和耐药至关重要。通过导入反义基因的方法阻断肾癌细胞中GYLZ RCC18的表达 ,可有效地杀伤肾癌细胞。对此新基因的研究将有助于为肾癌的基础研究和临床治疗提供新的思路和途径。
- 张强张志文陈琳李钟梁丽莉郭晓建那彦群郭应禄
- 关键词：肾肿瘤基因表达基因转染GRC-1
- 脂质体介导c-myc反义核酸对HL-60细胞作用的研究
- 1999年
- 原癌基因ｃ－ｍｙｃ参与调控细胞的增殖、分化和凋亡过程，在白血病细胞株ＨＬ－６０ 中有很高的表达。ｃ－ｍｙｃ通过扩增活化或基因重排而异常激活，在白血病的发生和发展中可能起着重要的作用。 目的 通过脂质体介导ｃ－ｍｙｃ反义核酸转染ＨＬ－６０ 细胞，观察其抑制细胞生长增殖、促进分化、诱导凋亡，降低ｃ－ｍｙｃｍ ＲＮＡ 和蛋白表达水平，探讨反义核酸的抗肿瘤作用机制。 方法 ＨＬ－６０ 细胞在３７℃、５％ＣＯ２ 条件下，培养于１０％ 小牛血清１６４０ 培养液中，细胞接种密度为４×１０７／Ｌ，反义核酸终浓度为１μｍ ｏｌ／Ｌ，反义核酸与脂质体比例为１ μｍ ｏｌ（６．５ μｇ）∶１０ μｇ，无血清转染６ ｈ。实验同时设置空白组、无义组、反义组、脂质体组、脂质体无义组等对照组。连续培养４ 天。通过锥虫蓝拒染实验测定细胞的生长能力；ＮＢＴ还原实验和瑞特－姬姆萨染色测定细胞的分化能力；免疫细胞化学染色检测ｃ－ｍｙｃ蛋白表达；ＲＴ－ＰＣＲ法检测ｃ－ｍｙｃ ｍ ＲＮＡ 水平；吖啶橙／溴化乙锭染色观察凋亡细胞形态；流式细胞仪检测凋亡率；ＤＮＡ抽提及电泳观察凋亡细胞ＤＮＡ降解片段的形成。
- 陈琳
- 关键词：脂质体介导C-MYC反义核酸
- 丝裂霉素对膀胱癌EJ细胞作用机制的研究被引量：28
- 2002年
- 目的 从诱导坏死和凋亡角度探讨丝裂霉素 (MMC)对膀胱癌EJ细胞的作用机制。 方法 将不同浓度的MMC作用于膀胱癌EJ细胞 ,在不同时间内采用流式细胞术 (FCM )和 3’末端脱氧核苷酸转移介导生物素 (TUNEL)及伊红排斥实验检测EJ细胞的凋亡情况和对其的杀伤作用。 结果 不同浓度的MMC在 2 4h内可以持续诱导EJ细胞凋亡 ,MMC 0 .1mg/ml组 2 4h时凋亡率为 71% ,对EJ细胞的杀伤作用与剂量呈正比。
- 梁丽莉张强李钟陈琳丁义张志文郭应禄
- 关键词：膀胱癌EJ细胞膀胱肿瘤丝裂霉素C
- 异源二聚体硫酸化糖蛋白在白血病细胞中的表达及作用机制的研究
- 2002年
- 陈琳梁丽莉张强李钟陈志哲郭应禄
- 关键词：白血病基因表达流式细胞术CLUSTERIN
- 脂质体介导的聚集素反义寡核苷酸对膀胱癌EJ细胞的作用被引量：1
- 2003年
- 目的 探讨clusterin对膀胱癌EJ细胞生物学特征的影响。 方法 应用脂质体包裹的clusterin反义寡核苷酸转染EJ细胞 ,阻断其表达 ,通过 3′端末端标记、MTT试验、伊红排斥实验等方法观察clusterin反义基因对EJ细胞增殖、凋亡、坏死等生物学行为的影响。 结果 转染clusterin反义寡核苷酸组 (反义组 )EJ细胞凋亡增加 ,第 5天达峰 ,凋亡率 80 % ,与转染clusterin正义寡核苷酸组 (正义组 )比较 ,差异有显著性意义 (P <0 .0 5 )。反义组细胞死亡率增加 ,以转染后 1～ 4d明显 (13.8%～ 33.3% ) ,显著高于相应正义组 (P <0 .0 5 )。反义组细胞增殖活性降低 ,以转染后第 6、7天明显 ,显著高于相应正义组 (P <0 .0 5 )。 结论 clusterin是重要抗凋亡因子 ,其表达与膀胱癌细胞的生存、增殖、抗凋亡发展密切相关。
- 梁丽莉张强李钟陈琳丁义张志文郭应禄
- 关键词：膀胱癌EJ细胞聚集素脂质体反义寡核苷酸
- 急性巨核细胞白血病三例被引量：3
- 1999年
- 急性巨核细胞白血病（ＡＭＫＬ）较少见，１９９０至１９９７年我所共诊断急性白血病１２２７例，其中经形态学、免疫学、电镜确诊ＡＭＫＬ者仅３例。为提高对ＡＭＫＬ的认识，现将我所收治３例报道如下。一、病例和方法１临床资料：３例中男２例，女１例，年龄４４～７...
- 陈琳王少元陈志哲吕联煌梁玉英黄淑桦
- 关键词：急性白血病巨核细胞
- 肾癌差异表达基因克隆的研究被引量：1
- 2001年
- 目的 克隆并鉴定肾癌与正常肾之间差异表达的基因。方法 应用抑制性消减杂交技术构建人肾癌组织与正常肾组织差异表达的cDNA消减文库 ,并从中克隆鉴定出肾癌差异表达的基因。结果 构建成功了高消减效率的人肾癌cDNA消减文库 ,对其中 5个克隆插入的cDNA片段进行测序后经Genbank检索表明 ,5个片段均为未知新序列 ,其中GYLZ RCC18为 3个拷贝 ,提示以上 5个cDNA片段可能来自 3个新基因。Northern杂交分析显示 ,GYLZ RCC18在肾癌组织中有明显表达 ,而在正常肾组织中无表达 ,这证明GYLZ RCC18是肾癌相关的新基因。结论 人肾癌cDNA消减文库的建立为进一步筛选、克隆肾癌特异性表达的新基因奠定了基础。
- 张强张志文陈琳梁丽莉郭晓健丁义郭应禄
- 关键词：肾肿瘤肾癌基因克隆
- 原癌基因c-myc和白血病被引量：11
- 2000年
- 陈琳
- 关键词：原癌基因白血病基因表达
- 抗c-myc基因反义核酸治疗血液系统恶性肿瘤的研究
- 刘庭波陈琳吕联煌卓光生陈志哲张学敏
- 完成了急性白血病细胞系HL60、淋巴瘤细胞系CA46及白血病、淋巴瘤原代细胞c－myc基因及其产物的反义核酸治疗的前后细胞动力学研究，RT－PCR检测c－myc基因表达，TUNEL检测凋亡及FCM检测c－Myc蛋白表达，...
- 关键词：
- 关键词：反义核酸血液肿瘤C-MYC基因
- 血液肿瘤中p16基因的研究新进展
- 2001年
- 陈琳张强陈志哲张志文
- 关键词：血液肿瘤P16基因
