银辉
- 作品数：3 被引量：5H指数：1
- 供职机构：中南大学湘雅医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 急性髓系白血病细胞单链DNA适体的体外筛选
- 2012年
- 目的:筛选识别急性髓系白血病M2型(acute myeloblastic leukemia M2 subtype,AML-M2)CD33+/CD34-细胞的核酸适体(aptamers)。方法:以AML-M2型白血病CD33+/CD34-细胞为靶细胞,正常人CD33+/CD34-细胞为反筛选细胞,采用细胞-指数富集配体系统进化(cell-systematic evolution of ligands by exponential enrichment,C-SELEX)技术,体外反复筛选单链DNA(single strand deoxyribonucleic acid,ssDNA)文库的适体,经聚合酶链式反应(polymerasechain reaction,PCR)扩增产生次级文库。然后将最终轮次的次级ssDNA文库克隆、测序并分析各适体的一级和二级结构。结果:琼脂糖凝胶电泳结果显示:每轮筛选出来的次级ssDNA文库PCR扩增产物均可见到清晰的DNA条带。经过13轮的反复筛选,次级ssDNA文库与细胞结合的荧光强度从2.14%上升到51.12%,至第13轮趋于稳定状态。对30个克隆子序列测定结果显示:22个适体一级结构分别含有AAGTA,TATCT,AGATG和AAATT 4个保守序列,另8个适体无此保守序列。二级结构模拟结果显示:30个适体含有4种不同的茎环、凸环模拟结构。结论:C-SELEX技术可用于急性髓系白血病原代细胞适体的筛选,筛选到的AML-M2型白血病CD33+/CD34-细胞适体有望用于白血病的诊断与治疗。
- 朱平王光平张书芹徐雅静彭敏源银辉陈焱谭三勤陈方平
- 关键词：适体
- 异基因外周造血干细胞移植供者干细胞的采集与护理被引量：4
- 2011年
- 造血干细胞移植现已成为根治性治疗恶性实体瘤、血液系统恶性疾病、遗传性疾病及其他免疫缺陷性等疾病的主要手段之一，应用范围逐渐扩大。争取供者的配合，使其达到身心的最佳状态，是移植中重要的工作。现将本院自2000年1月至2010年7月对147例异基因造血干细胞移植供者的干细胞采集与护理体会报道如下。
- 梁银华银辉
- 关键词：造血干细胞移植
- 急性髓系白血病患者造血干／祖细胞特异性微小RNA的筛选及表达研究被引量：1
- 2012年
- 目的筛选和分析急性髓系白血病（AML）患者骨髓造血干／祖细胞（HSPC）特异性微小RNA（miRNA，miR）的表达及其水平。方法分选AML患者骨髓及造血干细胞移植供者（正常对照）外周血CD34＋细胞，提取细胞总RNA，通过与miRNA芯片杂交后筛选差异表达的miRNA，随后采用实时定量PCR技术对差异表达的miR-10a和miR-220c进行定量验证，并进行DNA序列分析。结果miRNA芯片杂交结果显示，AML患者骨髓与正常对照CD34＋细胞之间，表达差异达1倍以上的miRNA有191个。差异有统计学意义的有94个，其中44个表达增高，50个表达降低。实时定量PCR结果显示，AML患者骨髓CD34＋细胞miR-10a和miR-220c表达水平是正常对照的19．6％和19．0％，PCR产物克隆DNA测序以及DNA序列同源检索证实确为miR-10a和miR-220c。结论AML患者与正常人HSPC存在多种差异表达的miRNA，miR-10a和miR-220c表达明显下调。
- 王光平张书芹朱平彭敏源谭三勤银辉徐雅静陈炎陈方平
- 关键词：微小RNA
