钱锋
- 作品数：13 被引量：14H指数：2
- 供职机构：第二军医大学长征医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部留学回国人员科研启动基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- Toll样受体激动剂作为佐剂成份在疟疾红内期疫苗中的应用被引量：2
- 2011年
- Toll样受体是一类模式识别受体,与其配体结合可激活先天性免疫系统,继而启动获得性免疫反应。因此,一些Toll样受体的配体或激动剂可作为佐剂成份用于多种疫苗的制备。恶性疟原虫蛋白AMA1和MSP1是疟疾红内期疫苗的2个主要候选抗原,但对人体是弱免疫原。为提高这两种蛋白的免疫原性,将Toll样受体激动剂作为佐剂成份,添加到以这两种蛋白为抗原所制备的疫苗中,用于临床试验。本文对Toll样受体激动剂在疟疾红内期疫苗中的应用进行综述。
- 谢创波钱锋徐沪济
- 关键词：恶性疟原虫TOLL样受体佐剂
- 用多肽-蛋白偶联方法制备抗恶性疟原虫抗体被引量：1
- 2012年
- 目的介绍一种多肽-蛋白偶联的流程,并用多肽-蛋白偶联产物制备抗疟原虫抗体。方法用化学连接剂Sulfo-EMCS在作为载体蛋白的铜绿假单胞菌重组去毒外毒素(rEPA)上加马来酰亚胺基团,用间接Ellman反应测定载体蛋白上所加的马来酰亚胺基团数量。用马来酰亚胺修饰的载体蛋白滴定Pfs48/45-158多肽[含恶性疟原虫表面蛋白48/45(Pfs48/45)第158～173氨基酸序列,其N末端带有一个半胱氨酸残基],绘制滴定曲线并用线性回归进行曲线拟合,根据滴定曲线确定理论滴定终点,计算多肽与载体蛋白的偶联比(每摩尔载体蛋白所能结合的多肽的摩尔数)。用过量的Pfs48/45-158多肽与马来酰亚胺修饰的rEPA进行反应,规模制备Pfs48/45-158-rEPA多肽-蛋白偶联物,偶联物用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)进行鉴定。用所制备的Pfs48/45-158-rEPA偶联物免疫BALA/c小鼠,制备免疫血清。用ELISA测定免疫小鼠血清抗Pfs48/45-158多肽的抗体效价,用免疫荧光试验(IFA)测定免疫血清识别疟原虫的能力。结果通过化学连接剂在每摩尔rEPA上添加约6.94摩尔的马来酰亚胺基团。制备了偶联比约为7.33的Pfs48/45-158-rEPA多肽-蛋白偶联物。偶联物免疫小鼠激发出抗Pfs48/45-158多肽的高抗体应答,免疫血清抗Pfs48/45-158多肽的效价为12 500 ELISA单位(即吸光度A405值为1时的血清稀释度倒数),同时免疫血清可识别疟原虫。结论多肽-蛋白偶联是一种可用于制备抗疟原虫抗体的便捷方法,间接Ellman检测、滴定反应和SDS-PAGE分析构成了多肽-蛋白偶联物制备的质控方法,可更好地保证多肽-蛋白偶联物的质量和稳定性。
- 钱锋
- 关键词：多肽抗体疟疾
- 识别疟色素的模式识别受体
- 2011年
- 疟色素是疟原虫消化宿主血红蛋白产生的副产物,能激发宿主的先天性炎症反应。然而对于疟色素是如何被宿主模式识别受体识别,各个研究者的实验结果和结论不尽相同。本文综述了近期该研究领域的一些进展。
- 钱锋徐沪济
- 关键词：TOLL样受体NOD样受体
- 沙门菌鞭毛蛋白作为偶联疫苗载体的应用
- 2016年
- 鞭毛蛋白是细菌鞭毛的主要成分,通过聚合鞭毛蛋白单体形成鞭毛的丝状体。鞭毛蛋白的N-末端和C-末端区域相互靠拢形成功能区域,该区域处于鞭毛丝状体的内部;中间区域是序列变异区,暴露于鞭毛丝状体表面。沙门菌鞭毛蛋白具有特殊的抗原性,称为H抗原,是沙门菌分型的依据之一。作为Toll样受体5(Toll-like receptors 5,TLR5)等先天性免疫系统受体的配体,沙门菌鞭毛蛋白是一种强效的蛋白型佐剂,已广泛应用于细菌、病毒和寄生虫的疫苗研制。本文就沙门菌鞭毛蛋白作为载体蛋白在偶联疫苗的应用作一综述。
- 钱锋徐沪济
- 关键词：沙门菌鞭毛蛋白载体蛋白
- 疟疾疫苗研制进展
- 2014年
- 近年来疟疾疫苗的研制取得了很大进展,进展最快的RTS,S疫苗已完成Ⅲ期临床试验,相信成功研制临床应用的疟疾疫苗已为期不远,但要成功研制更为高效的疟疾疫苗用于控制乃至消除疟疾将是一项艰巨和富有挑战的工作.该文综述和讨论了疟疾疫苗研制在近几年中的进展.
- 钱锋
- 关键词：疟疾疟原虫疫苗
- 疟疾偶联疫苗被引量：6
- 2012年
- 很多疟疾抗原在人体中是弱免疫原,化学偶联是一种提升弱免疫原免疫原性的方法,其价值已在疟疾疫苗的研究工作中得到证明。本文介绍了蛋白质偶联的一些常用化学连接剂和载体蛋白,并综述了疟疾偶联疫苗的研究进展。
- 钱锋徐沪济
- 关键词：疟疾疫苗
- 注射抗TLR9抗体无法有效阻断小鼠体内的TLR9活性:谈TLR9在细胞中的分布
- 2017年
- 本文对本刊2017年第35卷第1期上发表的一篇题名为《约氏疟原虫感染小鼠树突状细胞对Th17分化和功能的调控作用》的文章所陈述的方法——用抗TLR9抗体来阻断小鼠体内树突细胞功能,提出异议,因为已有大量的研究工作显示,TLR9总体上是一个细胞内受体,注射抗TLR9抗体无法有效阻断体内TLR9活性。
- 刘晓李梦梦钱锋
- 关键词：亚细胞定位拮抗剂
- 抗CD74抗体不是汉族人群强直性脊柱炎患者的血清标志物被引量：1
- 2015年
- 目的 :检测强直性脊柱炎(ankylosing spoondylitis,AS)患者血清中抗CD74抗体的水平,并评估抗CD74抗体在AS患者中的诊断价值。方法:选取确诊为AS的85例汉族患者和46名健康献血者(对照),采集血清后用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法,用2种重组人CD74蛋白和1种CD74肽作为抗原,检测抗CD74抗体水平,并采用独立样本t检验和单向方差检验进行组间均值比较。同时比较不同冻存时间的血标本中抗CD74抗体水平差异。结果:3种抗原检测出的AS患者抗CD74抗体的吸光度值(A)均值分别为0.281±0.189、0.157±0.058和0.120±0.040,与健康对照组相比,差异均无统计学意义;而AS患者中抗CD74抗体的阳性率非常低,且在不同年龄组及不同性别间抗CD74抗体水平差异无统计学意义。结论:采用不同抗原测得的抗CD74抗体水平在85例汉族AS患者中未见显著升高,考虑其在我国汉族人群中其可能并不能作为诊断AS有价值的指标。
- 陈凌钱锋叶玲英林丽吴歆李梦梦刘晓张志国张倜王赓徐沪济
- 关键词：强直性脊柱炎诊断标志物
- 不同的化学连接剂偶联恶性疟原虫Pfs25抗原和绿脓杆菌重组去毒外毒素rEPA被引量：6
- 2011年
- 目的偶联恶性疟原虫Pfs25抗原和绿脓杆菌重组去毒外毒素rEPA,并测试不同化学连接剂的偶联效果。方法用化学连接剂NAHT(DL-N-acetylhomocysteine thiolactone)在Pfs25蛋白上加自由巯基,化学连接剂Sulfo-EMCS、EMCH、SBAP和Sulfo-SIAB分别修饰载体蛋白rEPA,通过巯基化的Pfs25和经化学基团修饰的rEPA在一定条件下反应,形成Pfs25与rEPA的偶联蛋白,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测偶联结果。结果成功地将Pfs25偶联到rEPA上,构建了偶联蛋白Pfs25-rEPA。对于蛋白的化学基团修饰,伯胺基与NHS(N-hydroxysuccinimide)酯之间的反应效率要高于以EDC为桥联剂的羧基与酰肼基之间的反应;对于偶联反应,马来酰亚胺基与巯基之间的反应效率要高于卤素乙酰基与巯基之间的反应。结论各化学连接剂都能将Pfs25偶联到rEPA上,但偶联效率各不相同,并形成不同样式的偶联蛋白。
- 钱锋
- 关键词：恶性疟原虫绿脓杆菌偶联
- 研制高效疟疾疫苗的几个关键技术问题
- 2014年
- 疟疾在很多国家仍然是严重的公共卫生问题，有效的疟疾疫苗将是控制乃至在全球消除疟疾的有效手段之一。抗原的免疫原性、变异性和质量是影响疟疾疫苗成功研制的关键因素，而建立有效的疟疾疫苗功能检测方法是发掘具有潜力的候选抗原的基础。该文综述了这几方面工作的研究结果。
- 钱锋
- 关键词：疟疾疫苗
