赵建
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 供职机构：泸州医学院附属医院更多>>
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- 结缔组织生长因子-整合素αvβ5受体信号途径在肺动脉平滑肌细胞外基质基因表达中的作用被引量：2
- 2015年
- 目的 探讨整合素αvβ5在结缔组织生长因子（connective tissue growth factor,CTGF）促进肺动脉平滑肌细胞（pulmonary arterial smooth muscle cell,PASMC）细胞外基质沉积中的作用;明确细胞外调节蛋白激酶（ERK1/2）信号通路是否参与了CTGF-整合素αvβ5信号途径所致PASMC上述生物学行为改变的过程;初步探讨CTGF-整合素αvβ5受体信号途径在肺动脉高压肺血管重构中的作用.方法 （1）体外培养SD大鼠PASMC,并用α-SMA免疫组织化学染色鉴定细胞纯度.对照组：含10％胎牛血清的M199培养基;CTGF刺激组（CTGF组）：含10％胎牛血清的M199培养基＋50 ng/mlCTGF,培养72 h;CTGF＋整合素αvβ5单克隆抗体P1F6（10 μg/ml）刺激组（抗体组）：含10％胎牛血清的M199培养基＋50 ng/ml CTGF＋ 10 μg/ml P1F6,培养72 h.（2）实时荧光定量RT-PCR检测CTGF、P1F6对Collagen Ⅰ-α1、CollagenⅢ-α1、Fibronectin-1 mRNA表达的影响.（3）采用蛋白质印迹检测P1F6、CTGF对CollagenⅢ、ERK1/2、p-ERK1/2蛋白表达变化的影响.结果 （1）免疫组织化学染色显示,α-SMA染色阳性细胞大于95％,表明其为PASMC.（2）RT-PCR检测结果显示,与对照组比较,CT-GF作用于PASMC 72 h,CTGF能显著促进Collagen Ⅰ-α1、CollagenⅢ-α1、Fibronectin-1 mRNA表达（P＜0.05）;使用P1F6后与CTGF组比较,3种基因mRNA表达均减少（P＜0.05）,但均较对照组表达增加.（3）蛋白质印迹检测结果表明,CTGF作用于PASMC 72 h,与对照组比较CTGF明显促进CollagenⅢ蛋白表达（P＜0.05）;应用P1F6后CollagenⅢ蛋白表达较CTGF组减少（P＜0.05）,但较对照组表达增加.用蛋白质印迹检测P1F6、CTGF作用PASMC 72 h后ERK1/2磷酸化水平,提示CTGF作用PASMC 72 h后ERK1/2磷酸化程度增加,加入P1F6封闭整合素αvβ5后ERK1/2磷酸化程度降低,pERK 1/2与ERK1/2比值减小（P＜0.05）.结论 整合素αvβ5介导了CTGF诱导的PASMC细胞外基质沉积;ERK1/2信号通路参与CTGF-整合素αvβ
- 卢翠侠付杰李刚胡煜贾鹏赵建陈芃螈刘斌
- 关键词：整合素结缔组织生长因子肺动脉平滑肌细胞细胞外调节蛋白激酶
- 结缔组织生长因子-整合素β1受体信号途径在肺动脉平滑肌细胞增殖和迁移中的作用被引量：1
- 2014年
- 目的 探讨整合素β1受体在结缔组织生长因子（CTGF）促进肺动脉平滑肌细胞（PASMC）增殖、迁移和细胞骨架变化中的作用,及其受体信号途径在肺动脉高压肺血管重构中的作用机制.方法 体外培养SD大鼠肺动脉中膜平滑肌细胞.应用水溶性四氮唑（WST-1）检测整合素β1抗体对CTGF促进PASMC增殖的影响;Transwell小室检测整合素β1抗体对CTGF促进PASMC迁移的影响;考马斯亮蓝R250染色和激光共聚焦显微镜观察整合素β1抗体对CTGF促进PASMC细胞骨架的变化.结果 不同浓度整合素β1抗体对CTGF促进PASMC增殖有明显抑制作用（P＜0.05）,并呈浓度依赖性,随着整合素β1抗体浓度的增加,细胞增殖受抑越明显;其中15 mg/L整合素β1抗体对PASMC增殖抑制率在72 h最高.15 mg/L整合素β1抗体组穿越Tr-answell的细胞数量与CTGF组比较明显减少,差异有统计学意义（P＜0.01）,并能够短暂引起细胞骨架的改变.结论 整合素β1抗体对CTGF促进PASMC的增殖和迁移有抑制作用,整合素β1受体信号可能在CTGF介导的PASMC增殖、迁移和细胞骨架改变等生物学行为中起重要作用.
- 付杰卢翠侠李刚胡煜贾鹏赵建刘斌
- 关键词：整合素结缔组织生长因子肺动脉平滑肌细胞迁移
