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谭学方
作品数:
3
被引量:3
H指数:1
供职机构:
广州医学院附属肿瘤医院
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发文基金:
广州市重大科技攻关项目
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相关领域:
医药卫生
生物学
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合作作者
汤郡
广州医学院附属肿瘤医院肿瘤研究...
莫薇
广州医学院附属肿瘤医院
马桂璋
广州医学院
张玲
中山医科大学
林学颜
中山医科大学
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谭学方
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汤郡
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莫薇
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张玲
传媒
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广州医学院学...
1篇
热带医学杂志
年份
1篇
2002
2篇
2000
共
3
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重组膜型人肿瘤坏死因子α的克隆及GST-TNF融合基因的构建
2000年
目的 :构建膜结合型人肿瘤坏死因子与谷胱甘肽 S 转移酶 (GST)的融合基因表达载体。方法 :用RT PCR一步法扩增出人膜结合型TNF基因片段 ,定向克隆到质粒 pUC19中。再通过定向亚克隆插入真核表达质粒pGEX 4T 3中GST下游。结果 :从激活的单核细胞中扩增出70 0bp左右的膜型TNF基因 ;限制性酶切产物和以重组载体为模板的PCR扩增证实了重组载体构建成功。结论 :建立了重组膜型TNF的GST融合表达及纯化优势 ,为进一步定点突变 ,设计高效低毒的非分泌性膜结合TNF 。
谭学方
张玲
林学颜
关键词:
克隆
肿瘤
Epstein-Barr病毒LMP1-exonl反义表达载体对NPC细胞生长的抑制作用
被引量:3
2002年
目的 研究EB病毒LMP1反义基因对人鼻咽癌CNE2细胞恶性表型的逆转作用。方法 用反义LMP1DNA的真核表达载体anti pcDNA3.1 LMP1转染人鼻咽癌细胞CNE2 ,G4 18筛选抗性克隆 ;Western blot法检测转染前、后瘤细胞的LMP1表达 ;用MTT法、细胞生长曲线和软琼脂集落形成能力实验观察转染前后细胞体外生长增殖特性。结果 建立反义CNE2细胞克隆 ;转染后LMP1蛋白表达降低 ;转染后细胞活力和生长速度均有下降 ,集落形成能力显著降低。结论 将反义LMP1真核表达载体导入细胞能成功抑制NPC细胞的生长 ,逆转其恶性表型。本研究还为鼻咽癌的基因治疗提供了实验依据。
莫薇
谭学方
汤郡
马桂璋
关键词:
EB病毒
EBV-LMP1反义基因真核表达载体的构建及序列鉴定
2000年
目的 :构建EB病毒LMP1反义基因的真核表达载体。方法 :通过PCR方法 ,扩增EBV LMP1基因的第一外显子片段 ,使之反向克隆到质粒pcDNA3.1的多克隆位点中。经限制性酶切、PCR扩增和测序鉴定重组载体。结果 :酶切产物和PCR产物的凝胶电泳显示 4 0 0bp左右的目的基因片段 ,测序结果显示与已知LMP1基因序列一致。结论 :成功构建了LMP1反义基因的真核表达载体。
谭学方
汤郡
张雪雁
关键词:
LMP1
反义基因
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