苗利光
- 作品数：71 被引量：128H指数：6
- 供职机构：中国农业科学院特产研究所更多>>
- 发文基金：吉林省科技发展计划基金国家科技支撑计划中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生化学工程更多>>
- 牛病毒性腹泻病毒反转录及3'-末端克隆测序方法研究被引量：2
- 2010年
- 牛病毒性腹泻病毒为黄病毒科瘟病毒属代表种,其基因组为单股正链RNA,无Poly(A)尾。传统的3'-末端快速扩增方法不适用于牛病毒性腹泻病毒的3'-末端克隆测序。本研究根据牛病毒性腹泻病毒基因组3'-末端共有特征碱基,设计回文锚定引物CGend。以BVDVJZ05-1毒株为研究对象,进行了反转录及3'-末端克隆测序。结果表明,CGend的反转录效果优于随机引物和一般特异性下游引物,并且扩增得到了JZ05-1的3'-末端完整序列。本研究为瘟病毒属病毒反转录和3'-末端克隆测序提供了新思路。
- 李庆超苗利光李海涛刘艳环张广雷庄风岐
- 关键词：牛病毒性腹泻病毒瘟病毒反转录
- 重组抗菌肽LfcinB/LfampinB基因的克隆及表达载体的构建
- 2010年
- 根据GeneBank中提供的牛乳铁蛋白基因序列,设计并合成了重组LfcinB/LfampinB基因,并通过PGEM-Teasy载体扩增。酶切回收的LfcinB/LfampinB片段与中间载体pP6连接。pP6上的启动子、信号肽和调控序列与LfcinB/LfampinB共同切下,获得具有上游调控元件的PLfc/Lfa基因片段。将PLfc/Lfa与pME290表达载体连接,并转化绿脓杆菌。结果表明,本试验成功构建了重组pPLfc/Lfa表达载体。
- 孙金霞刘艳环李海涛李庆超张广雷苗利光
- 关键词：抗菌肽克隆
- 腐蹄病节瘤拟杆菌纤毛蛋白与绵羊白细胞介素-2融合基因在PAK/2pfs细胞中的表达与鉴定
- 2004年
- 将前期工作中筛选出的含有腐蹄病节瘤拟杆菌纤毛蛋白与绵羊白细胞介素-2(Pilin-IL-2)融合基因表达载体的PAK/2pfs工程菌[1]接种于营养肉汤,40℃培养16～18h,离心,向上清液中加入饱和(NH4)2SO4提取Pilin-IL-2融合基因表达蛋白。用羊抗兔E型节瘤拟杆菌抗血清与提取的融合蛋白进行对流免疫电泳,证明该融合蛋白具有特异性,且有较高的表达量。经SDS-PAGE电泳和Westernblot确证其为Pilin-IL-2融合蛋白。
- 刘艳环郑皓苗利光王克坚
- 关键词：融合基因白细胞介素-2腐蹄病绵羊对流免疫电泳
- 牛传染性鼻气管炎病毒JZ06-8株犊牛感染模型的建立被引量：6
- 2015年
- 为建立IBRV对犊牛的感染模型,将试验组第1组~3组犊牛通过鼻腔内喷雾接种4mL/头,病毒含量分别为107.0 TCID50/mL、106.0 TCID50/mL和105.0 TCID50/mL的IBRV/JZ06-8,阴性对照组同样方法接种MDBK细胞冻融物;攻毒后第0天~第14天,每天测定直肠温度,进行临床观察,采集鼻拭子进行病毒分离鉴定。结果显示,鼻内喷雾接种对犊牛可产生有效感染,106.0 TCID50/mL的感染剂量即可致犊牛产生典型的IBR临床症状,并可分离到IBRV。试验成功实现IBRV/JZ06-8对犊牛的感染,该模型可用于IBRV研究和IBR疫苗评价。
- 李海涛苗利光朱言柱肖佳美刘艳环
- 关键词：牛传染性鼻气管炎病毒实时荧光定量PCR
- 腐蹄病C型节瘤拟杆菌纤毛蛋白基因工程疫苗对绵羊的免疫试验被引量：1
- 2003年
- 将转化C型节瘤拟杆菌纤毛蛋白基因表达质粒的工程菌PAK/2pfsC在含羧苄青霉素的营养肉汤中表达,用MgCl2法在培养物上清中提取表达产物(纤毛蛋白)。将表达的纤毛蛋白用弗氏完全佐剂乳化,制成疫苗,疫苗免疫4只健康绵羊,定期采血,用对流免疫电泳和K凝集试验检测实验绵羊的体液免疫应答及抗体水平。结果发现,免疫后5d即可产生相应抗体,21d后抗体效价达到1∶4000以上。试验表明,腐蹄病C型节瘤拟杆菌纤毛蛋白基因工程疫苗对绵羊具有较好的免疫应答和免疫保护性。
- 刘艳环苗利光陈立志刘晓颖张洪涛王克坚
- 关键词：反刍动物腐蹄病基因工程疫苗绵羊免疫保护性
- 牛病毒性腹泻病二价弱毒活疫苗制备工艺研究被引量：3
- 2013年
- 研究了BVDV2/JZ05-1和BVDV1/JZ05-3二价弱毒活疫苗的制备工艺。通过对BVDV2/JZ05-1和BVDV1/JZ05-3疫苗毒传代培养测定毒价后,试制出5批毒价分别是105.4TCID50/mL和105.6TCID50/mL的BVDV二价弱毒活疫苗,经检验符合试验设计要求。
- 李海涛苗利光刘艳环朱言柱安亚雄王坤冯卓
- 关键词：牛病毒性腹泻病毒活疫苗
- 东北山葡萄酿酒酵母的分离与鉴定被引量：1
- 2019年
- 为了选育优良的饲料原料产品酿酒酵母菌种,本试验采集了酿酒品质良好的山葡萄和山葡萄园土壤样本,通过分离优化、菌种生理生化鉴定和分子生物学鉴定方法,对分离出的天然酵母菌种进行了种属鉴定。结果表明,成功分离出18株酵母菌,其中有酿酒酵母12株、发酵毕赤酵母3株、乳酸克鲁维酵母3株,为进一步对酿酒酵母特性研究奠定了基础。
- 李海涛刘艳环刘艳环苗利光
- 关键词：酿酒酵母糖发酵分子生物学鉴定
- 坏死梭杆菌保护性抗原确定与基因筛选研究
- 本项研究建立了坏死梭杆菌FN(A)P2001小鼠感染模型，对坏死梭杆菌免疫原及保护性抗原进行了筛选研究，通过对保护性抗原的氨基酸序列测定和基因筛选研究，结合保护性抗原的生物学试验，确定溶血素是坏死梭杆菌的保护性抗原，是致...
- 苗利光
- 关键词：坏死梭杆菌保护性抗原基因筛选溶血素
- 文献传递
- MSL抗菌肽对鸡白痢的预防作用被引量：7
- 2013年
- 取4日龄雏鸡50只,随机分成5组。阴性对照组正常日粮;阳性对照组第1d日粮中添加鸡白痢沙门氏菌,菌数平均为4×107个/只,以后正常饲喂;实验组第1天日粮中加入鸡白痢沙门氏菌,菌数平均为4×107个/只,之后加入不同剂量MSL抗菌肽,第2天开始每天只加入MSL抗菌肽,连加4d,以后正常饲喂。试验共进行13d,每天观察雏鸡临床表现,剖检病死雏鸡。结果表明,MSL抗菌肽不仅对鸡白痢有较好的预防作用,而且可明显促进雏鸡的生长。
- 钟宏鹏刘艳环朱言柱李海涛冯卓王坤苗利光
- 关键词：抗菌肽鸡白痢沙门氏菌鸡白痢
- 牛病毒性腹泻病毒BVDV2/JZ05-2毒株牛感染模型建立被引量：2
- 2013年
- 试验用4～6月龄健康牛22头，共分5组，4个试验组5头/组，对照组2头。各试验组分别鼻内接种强毒107 FAID50/mL、106 FAID50/mL、105 FAID50/mL、104 FAID50/mL ，4mL/头，2mL/鼻孔。对照组鼻内接种MDBK细胞培养液冻融物，4mL/头，2mL/鼻孔。试验动物接种强毒后，每天观察实验动物的反应，包括精神状态、体温、食欲、黏膜颜色、呼吸频率、咳嗽、鼻腔分泌物及腹泻等；每天采集鼻拭子用于病毒分离。攻毒前2d、0d ，攻毒后隔天采血用于白细胞计数和病毒分离；试验于病毒接种后14d结束。试验过程中如有动物死亡，对死亡动物进行病理学检查。结果，106.6 FAID50/头BVDV2/JZ05-2攻击4～9月龄的牛，可引起被攻击牛有规律地体温升高和白细胞数量下降，同时可以从鼻拭子中分离到病毒。以这些指标作为感染模型可以有效地评价BVDV2疫苗免疫效果。
- 冯卓刘艳环朱言柱李海涛钟宏鹏王坤张润祥苗利光
- 关键词：牛病毒性腹泻病毒免疫
