胡敏
- 作品数:1 被引量:7H指数:1
- 供职机构:淮阴工学院生命科学与化学工程学院生物工程系更多>>
- 发文基金:江苏省教育厅自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 脂肪酶基因在枯草芽孢杆菌中的表达及表达产物性质的研究被引量:7
- 2008年
- 从环境中筛选到了脂肪酶高产菌株金黄色葡萄球菌JH,依据NCBI上发表的原核微生物脂肪酶基因序列的多序列比对,发现它具有很强的序列保守性。利用PCR从金黄色葡萄球菌JH基因组中扩增得到了脂肪酶基因,利用基因重组技术将其整合到质粒pC194中,并导入到枯草芽孢杆菌中进行表达。应用选择抗药性筛选重组子,利用硫酸铵沉淀法和离子交换层析分离纯化重组脂肪酶,并用SDS-PAGE进行纯度鉴定,确定其相对分子量约为32kDa。通过对其酶学特性的研究发现,重组脂肪酶在反应温度为41℃,pH为8.0时具有最大活性,其Km和Vm各自为0.34mmol/L和308μmol/mg·min,Ca2+、K+、Mg2+能激活这种酶的活性,而Fe2+、Cu2+、Co2+则抑制它的活性。
- 贾建波李相前胡敏
- 关键词:脂肪酶基因酶学特性