胡丽娜
- 作品数：31 被引量：32H指数：5
- 供职机构：兰州大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家科技重大专项艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 一种结核杆菌融合蛋白HspX-Mtb8.4及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种结核杆菌融合蛋白HspX-Mtb8.4，是序列表中序列2的蛋白质。本发明的有益效果是：发明选用的结核分枝杆菌Mtb8.4是从结核杆菌培养滤液中纯化分离的一种低分子治疗蛋白抗原，具有较强的细胞免疫活性，能诱...
- 祝秉东刘万波谭继英胡丽娜王秉翔吴玉敏辛奇朱丽林孝发
- 文献传递
- 炭疽灭活和裂解芽胞抗原免疫家兔后血清中的IgG抗体应答
- 2010年
- 炭疽杆菌芽胞在炭疽免疫中发挥基本作用。实验中以炭疽活芽胞疫苗为原形,建立了制备灭活和裂解炭疽芽胞的方法,研究了各种灭活和裂解炭疽芽胞疫苗不同浓度、不同剂次免疫家兔的抗芽胞和毒素IgG应答,总结分析了各种灭活和裂解炭疽芽胞疫苗用于新疫苗成分之一的可能性。甲醛灭活炭疽芽胞疫苗设芽胞浓度2.5×108剂量组、5×108剂量组、1×109剂量组,于0、4、8周时3次免疫。在3剂免疫后血清抗炭疽芽胞IgG水平持续升高,首次免疫后4、8、12周时家兔血清中抗芽胞IgG几何平均滴度可达到600～16000。裂解炭疽芽胞疫苗的制备和动物免疫中,只采取了2.5×108芽胞浓度,两剂免疫,免疫时间为0、4周。在首次免疫后4、8、12周时家兔血清中抗芽胞IgG几何平均滴度分别为362、776和388。各时间点采集的家兔血清未能测出或只测出极微量的抗炭疽毒素IgG。通过上述研究认为,以裂解炭疽芽胞抗原作为炭疽疫苗成分之一,其抗原性和免疫原性是适宜的;免疫剂量可以设定为2.5×108芽胞浓度上下;免疫次数可定为2剂间隔1个月。
- 韩少波尤明强惠一鸣傅林锋胡丽娜魏东王秉翔
- 关键词：炭疽杆菌炭疽疫苗
- 鼠疫菌V抗原的单抗系统建立和免疫学定量检测
- 目的：制造鼠疫菌V抗原的鼠单克隆抗体，经抗体表位分析建立单抗系统，并通过此单抗系统建立免疫学检测鼠疫菌V抗原含量的方法，进行鼠疫疫苗研制中V抗原的质量控制。
方法：用鼠疫菌V抗原免疫雌性BALB/c小鼠，取小鼠...
- 常娅莉惠一明王秉翔焦磊胡丽娜傅林锋王革卜培英裴明玉万艳韩少波
- 关键词：鼠疫耶尔森菌双抗体夹心免疫学检测
- 文献传递
- 结核分枝杆菌融合蛋白EAMMH、其构建、表达和纯化方法及其应用
- 本发明公开了结核分枝杆菌融合蛋白EAMMH，同时还提供了其构建、表达和纯化方法及其应用。该融合蛋白以可溶形式表达，明显改善了EAMM以包涵体进行表达的缺点。该融合蛋白与佐剂联合构建的结核亚单位疫苗（LT69）具有较强的免...
- 祝秉东牛红霞彭金秀白春香胡丽娜刘勋王秉翔雒艳萍于红娟王鸿亢鸿飞李菲
- 文献传递
- 一种无标签结核杆菌融合蛋白ESAT6-RpfE及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种无标签结核杆菌融合蛋白ESAT6-RpfE，是序列表中序列2的蛋白质，并提供了其制备方法和制备疫苗的应用。本发明选用的结核分枝杆菌早期分泌蛋白ESAT6，是抗结核免疫反应的主要配体，有较强的免疫原性和免疫...
- 祝秉东李志达泽蛟章国平张颖王秉祥胡丽娜
- 文献传递
- 鼠疫F1抗原和V抗原双组分候选疫苗的免疫学评价被引量：1
- 2012年
- 目的通过由提取的鼠疫F1抗原和重组鼠疫V(rV)抗原组成的鼠疫候选疫苗免疫豚鼠,对其免疫效果进行评价。方法将豚鼠随机分成5个试验组,在免疫后不同时间点采血进行抗体检测、MTT法淋巴细胞增殖试验以及皮肤迟发型超敏反应(DTH)检测。结果抗体检测结果显示,双组分鼠疫候选疫苗能诱导较强的体液免疫应答;MTT细胞增殖结果显示,脾脏淋巴细胞特异性增殖不明显;中剂量组、高剂量组针对F1和rV抗原DTH阳转率均为100%。结论双组分鼠疫候选疫苗能诱导豚鼠体液免疫和细胞免疫应答,该疫苗有希望成为我国新一代鼠疫疫苗。
- 魏东汪洁英常娅莉卢锦标王秉翔胡丽娜王国治
- 关键词：鼠疫疫苗体液免疫细胞免疫
- 鼠疫耶尔森菌rV抗原单抗系统及其ELISA检测方法的建立被引量：5
- 2012年
- 目的建立ELISA双抗体夹心法,测定重组毒力因子rV抗原含量。方法采用杂交瘤技术,制备鼠疫菌rV抗原的鼠单克隆抗体,对抗原表位和单抗特异性进行分析及鉴定,建立ELISA双抗体夹心法,并验证方法的专属性、准确性、精密度和线性范围。结果成功组建了鼠疫菌rV抗原诊断试剂,灵敏度最低检测值为10 ng/mL。结论该方法可用于免疫学检测鼠疫组分疫苗原液rV抗原含量及制备过程中抗原活性,是鼠疫组分疫苗制备中一种重要的质量控制手段,也为进一步开发鼠疫诊断试剂盒及其他相关研究奠定了基础。
- 常娅莉焦磊魏东吴智远胡丽娜卜培英白钰王秉翔
- 关键词：鼠疫耶尔森菌表位双抗体夹心ELISA
- 重组鼠疫耶尔森菌LcrV抗原原液性质研究
- 2012年
- 目的进行重组鼠疫耶尔森菌LcrV抗原原液二聚体含量及性质研究,确定LcrV原液的相关质控标准。方法在不同缓冲体系(0.85%NaCl(NS)、20 mmol/L PBS),不同蛋白浓度(2.0、1.5、1.0、0.5、0.1 mg/mL)及不同保存温度(4℃、-20℃、-70℃)条件下保存LcrV抗原,采用SDS-PAGE和HPSEC方法定期检测LcrV二聚体含量及纯度。将连续三批检定合格的LcrV抗原原液进行质谱相对分子质量测定、等电点测定、N末端氨基酸序列测定、圆二色(CD)谱、HPLC肽谱及氨基酸组成分析,研究LcrV抗原的相关性质。结果随着保存时间的延长LcrV抗原二聚体含量增加,低温保存时二聚体不易大量形成。在-20℃和-70℃条件下,NS保存的LcrV抗原比PBS体系保存稳定,而在4℃条件下NS保存的LcrV抗原容易降解。LcrV抗原高浓度保存容易发生聚合。LcrV抗原在低质量浓度(0.1 mg/mL)保存时免疫学活性明显下降。质谱检测到LcrV单体和二聚体共同存在,且与理论相对分子质量一致。LcrV原液检测等电点范围为4.6～6.3。N末端测序、CD谱、HPLC肽谱图及氨基酸组成分析与理论结果一致。结论 LcrV抗原原液保存条件确定为:NS体系,蛋白质量浓度1.0～2.0 mg/mL,-20℃以下冻存。制备的LcrV抗原各项检测结果与理论结果一致,抗原性质稳定。
- 胡丽娜常娅莉万艳张轶吴智远卜培英王秉翔
- 一种结核杆菌融合蛋白及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种结核杆菌融合蛋白，是序列表中序列2的蛋白质，并提供了其制备方法和制备疫苗的应用。本发明所提供的构建并表达纯化去标签融合蛋白ESAT6-Ag85B-Mpt64<Sub>190-198</Sub>-Mtb8....
- 祝秉东辛奇胡丽娜王秉翔达泽蛟牛红霞刘万波唐克峰高娃景涛
- 结核分枝杆菌Mtb8.4-Hspx和Hspx-Mtb8.4重组基因克隆及表达被引量：1
- 2010年
- 目的构建结核分枝杆菌去标签重组蛋白Mtb8.4-Hspx(MH)和Hspx-Mtb8.4(HM)原核表达载体,并在大肠埃希菌株BL21(DE3)中表达。方法以结核分枝杆菌H37Rv基因组DNA为模板,PCR扩增Mtb8.4、Hspx基因,产物经纯化后与载体PET30a连接、转化及测序鉴定,构建原核重组表达质粒PET30a-Mtb8.4和PET30a-Hspx。抽提重组质粒,产物经纯化后与目的基因Hspx、Mtb8.4连接,转化及测序鉴定,构建重组目的基因质粒PET30a-Mtb8.4-Hspx(PET30a-MH)和PET30a-Hspx-Mtb8.4(PET30a-HM)载体,转化大肠埃希菌BL21,以IPTG诱导,SDS-PAGE电泳检测表达产物。结果 SDS-PAGE蛋白电泳验证去标签MH和HM融合蛋白分子质量单位为28 ku,与预期值相符。结论本研究成功表达去标签结核杆菌重组蛋白MH和HM,为结核亚单位疫苗免疫原性和临床前研究奠定了基础。
- 吴玉敏谭继英王革刘万波胡丽娜祝秉东
- 关键词：MTB8.4HSPX克隆
