程丽静 作品数:34 被引量:127 H指数:8 供职机构: 大连医科大学附属第二医院 更多>> 发文基金: 国家重点基础研究发展计划 辽宁省自然科学基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
肝X受体的激活对小鼠糖尿病肝脏脂肪酸合成酶表达的调节 被引量:11 2008年 目的探讨肝X受体(LXR)对糖尿病肝脏脂肪酸合成酶(FAS)表达的影响及机制。方法将16周龄、雄性、C57BL/6背景下瘦素受体基因缺陷的db/db小鼠和对照的db/m小鼠,分别予以LXR激动剂T0901317(T0)(3mg·kg^-1·d^-1)或DMSO灌胃处理7d;T0(10μmol/L)刺激人肝癌细胞系HepG2细胞24h。此外,HepG2细胞转染小鼠FAS启动子报告基因表达质粒,同时转染pcDNA3.1表达载体或LXR或活化型固醇调节元件结合蛋白(SREBP—1c)表达质粒12h;采用免疫组织化学方法检测FAS蛋白在肝脏上的表达,实时荧光定量PCR和蛋白印迹方法分别在mRNA和蛋白水平检测FAS和SREBP-1的表达及TO对其表达的影响,荧光素酶报告基因方法检测LXR激动剂和SREBP-1c对小鼠FAS启动子活性的影响。结果免疫组化结果显示FAS蛋白在肝脏广泛表达,主要位于肝细胞胞质内。TO可显著降低db/db小鼠空腹血糖水平[由(12.00±1.06)mmol/L下降到(7.73±0.69)mmol/L,P〈0.01]和糖化血红蛋白水平(由5.67%±0.10%下降到4.87%±0.08%,P〈0.01)。db/db小鼠肝脏FASmRNA水平明显高于db/m小鼠,约为5.5倍(P〈0.01);在蛋白水平,db/db小鼠肝脏上的FAS也明显高于db/m小鼠。TO处理可使db/m小鼠肝脏FASmRNA表达升高约3.5倍(P〈0.05),可使db/db小鼠肝脏FASmRNA升高约1.7倍(P〈0.05);TO处理可使db/m小鼠肝脏SREBP-1 mRNA升高约2.4倍(P〈0.05),使db/db小鼠肝脏SREBP-1 mRNA升高约2.1倍(P〈0.01)。TO能够上调HepG2细胞FAS的mRNA表达水平,升高约1.9倍(P〈0.05);LXR的激活还能显著增加HepG2细胞中FAS基因启动子活性,约为对照组的1.5倍;过表达LXR或SREBP-1c也能增加HepG2细胞FAS基因启动子活性,分别为对照组的1.9倍和1.6倍(均P〈0.01)。结论LXR可能通过其本身的直接作用和SREBP-1c的间接作用上调肝脏FAS� 王冰 程丽静 高政南 张晓燕 霍明 张冬娟 吴静 魏明芬关键词:糖尿病 脂肪肝 肝X受体 固醇调节元件结合蛋白 脂肪酸合成酶 SIRT1与基因转录 被引量:16 2007年 SIRT1(silent mating type information regulation 2 homolog 1)是一种具有NAD-依赖的蛋白去乙酰化酶活性的多功能转录调节因子.在体内通过对几种控制代谢及内分泌信号的转录因子去乙酰化作用来调节其活性.从而广泛参与调控哺乳动物细胞寿命的不同信号通路及糖代谢,胰岛素分泌等多条代谢通路,预示着SIRT1在医学临床应用和研究中可能极具应用价值. 罗兰 高政南 程丽静 杨泽关键词:SIRT1 生物学效应 转录调节 65例膜性肾病的临床及病理分析 李智超 程丽静 赵久阳糖尿病小鼠肝脏脂肪酸合成酶的动态表达 2013年 目的观察1型、2型糖尿病小鼠肝脏脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)表达的改变,探讨其在糖尿病肝脏脂质代谢紊乱中的意义。方法 1型糖尿病小鼠模型以链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导,对照组小鼠应用等量生理盐水。2型糖尿病小鼠模型选取C57BL/6基因背景下瘦素受体基因缺陷小鼠,纯合子db/db小鼠入选实验组;杂合子db/m小鼠入选对照组。应用免疫组化法检测FAS在肝脏定位;应用Real-time PCR技术、Western印迹方法,分别从mRNA水平、蛋白水平检测FAS在1型、2型糖尿病小鼠肝脏表达的变化。结果 FAS蛋白在肝脏广泛表达,主要位于肝细胞的胞浆内。1型糖尿病小鼠HbA1c水平(5.45±0.56)%明显高于对照组(2.93±0.08)%(P<0.05),血甘油三酯(triglyceride,TG)水平(2.25±0.66)mmol/L高于对照组(0.99±0.46)mmol/L(P<0.05),血胆固醇(cholesterin,CHO)水平(1.90±0.12)mmol/L高于对照组(1.62±0.10)mmol/L(P<0.05);FAS的mRNA水平约为对照组的1.4倍,FAS在蛋白水平也明显高于对照组。2型糖尿病小鼠HbA1c水平(5.73±0.33)%明显高于对照组(3.90±0.07)%(P<0.05),db/db鼠也存在明显高脂血症,血TG水平(2.85±0.24)mmol/L高于对照组(0.87±0.40)mmol/L(P<0.05),血CHO水平(3.60±0.98)mmol/L高于对照组(1.73±0.50)mmol/L(P<0.05);FAS mRNA水平约为对照组的2.7倍,蛋白印迹显示db/db鼠肝脏FAS也明显高于db/m鼠。结论 1型、2型糖尿病小鼠均存在不同程度的脂质代谢紊乱,其肝脏FAS的含量,无论从mRNA水平还是蛋白水平均较正常小鼠明显增高。 王冰 程丽静 刘明川 高政南关键词:糖尿病 脂代谢紊乱 脂肪酸合成酶 转化生长因子β1对人肾间质成纤维细胞组织型转谷氨酰胺酶表达的影响 被引量:4 2005年 近年来组织型转谷氨酰胺酶(tTG)在组织纤维化的发生和发展中的作用受到了关注.本实验通过观察TGF-β1对体外培养的人肾间质成纤维细胞tTG表达的影响,探讨TGF-β1与tTG的相互关系及其在肾间质纤维化中可能的作用. 刘俊兰 程丽静关键词:人肾间质成纤维细胞 组织型转谷氨酰胺酶 转化生长因子Β1 组织纤维化 TTG 蛋白激酶受体2在糖尿病大鼠肾组织中的表达及意义 2014年 目的通过观察蛋白激酶受体2(PAR-2)在糖尿病(DM)大鼠肾组织中的表达情况,探讨其在糖尿病肾病肾小管间质纤维化中的可能作用。方法将60只雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为对照组(C组)、糖尿病组(DM组)和用药组(T组),DM组和T组大鼠腹腔注射链脲佐菌素55 mg/kg制备DM模型,分别于实验的第2、4、8、12、20周处死大鼠后取肾组织制片,在电镜下观察肾组织形态改变;采用免疫组化检测四型胶原(ColⅣ)蛋白和PAR-2在肾组织中表达情况,并采用病理图像分析软件进行半定量分析。结果 C组大鼠肾组织ColⅣ表达均微弱;DM组大鼠肾组织ColⅣ表达逐渐增强,与C组比较差异有统计学意义;T组大鼠肾组织ColⅣ表达增强后又逐渐减弱,与DM组比较差异有统计学意义。C组大鼠肾组织无PAR-2表达或仅微量表达于血管内皮;DM组大鼠在实验的第2周开始出现PAR-2表达,并随实验进程PAR-2表达逐渐增强,与C组比较差异有统计学意义;T组大鼠肾组织PAR-2的表达与DM组比较差异无统计学意义。结论 PAR-2早期表达于糖尿病肾病大鼠的近曲小管上皮细胞,肾组织中PAR-2表达的变化趋势提示PAR-2可能参与了糖尿病肾病的肾间质纤维化过程。 蔡志杰 高政南 程丽静关键词:糖尿病肾病 肾间质纤维化 215例狼疮性肾炎的临床及病理分析 麦李明 程丽静血透病人干体重客观指标的研究 程丽静转化生长因子β_1通过Smad_2途径调节足细胞结缔组织生长因子表达 被引量:12 2004年 目的 研究肾脏足细胞是否表达结缔组织生长因子 (CTGF)以及TGFβ1对CTGF表达调控的信号途径。方法 以肾小球足细胞为对象 ,应用Western印迹分析技术 ,观察了 3种促进肾脏纤维化的蛋白因子 ,转化生长因子 β1(TGFβ1)、血小板源生长因子 (PDGF)和血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )对体外培养的足细胞CTGF蛋白表达的影响 ,以及ERK、Smad两条信号途径在TGFβ1调节CTGF蛋白表达中的影响 ;逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测CTGFmRNA的变化。结果 体外培养的足细胞表达基础水平CTGF蛋白 ,2 0ng/mlPDGF和 10 -6mol/LAngII刺激 2 4小时后细胞内CTGF蛋白水平与对照相比差异无显著意义 (P >0 0 5 ) ,而 1ng/mlTGFβ1刺激 2 4h足细胞CTGF蛋白水平显著高于对照 (P <0 0 5 ) ,且增加呈TGFβ1剂量依赖趋势 ;1ng/mlTGFβ1刺激 12h可以使细胞CTGFmRNA表达增加。1ng/mlTGFβ1使足细胞Smad2 和细胞外信号调节激酶 (ERK1/ 2 )磷酸化 ,在刺激 30min达高峰 ;应用丝 /苏氨酸激酶抑制剂Staurosporine抑制Smad2 磷酸化可以消减TGFβ1刺激的CTGF蛋白增加 ,但ERK1/ 2 活化抑制剂PD 980 5 9阻断ERK1/ 2 磷酸化不能减弱TGFβ1刺激CTGF蛋白表达的效应。结论 在足细胞上 ,TGFβ1刺激CTGF表达依赖于Smad2 信号通路的活化 ,而不依赖于ERK1/ 黄海长 梁燕 程丽静关键词:结缔组织生长因子 肾脏纤维化 逆转录-聚合酶链反应 2型糖尿病患者尿足细胞的排泄及其相关因素 2013年 目的观测2型糖尿病(T2DM)患者尿中足细胞数量的变化,并探讨其相关因素。方法选取124例T2DM患者和25例健康体检者(正常对照组,NC组)。其中T2DM患者分为3组:正常蛋白尿组(NA组),微量白蛋白尿组(MA组),大量蛋白尿组(CP组),应用小鼠抗人肾小球足细胞特异性蛋白Podocalyxin(PCX)单克隆抗体,采用间接免疫荧光技术检测尿中PCX阳性染色细胞,计数尿足细胞数量。ELISA方法检测血清C反应蛋白(CRP)等指标。比较各组的尿中足细胞数量、血CRP水平。结果与糖尿病正常蛋白尿组比较,微量白蛋白尿组、大量蛋白尿组的血CRP、尿足细胞数量均升高(P<0.05)。结论 T2DM患者尿中足细胞数量与尿蛋白相关,并随着血CRP的升高而增加。 冯秋霞 程丽静 芦露 罗兰 白艳 李萍 季军 高政南关键词:糖尿病 足细胞